补心软脉颗粒质量标准的研究分析
补心软脉颗粒为江苏省中医院院内制剂，由红景天、麦冬、山萸肉、水蛭、银杏叶、虎杖6味中药组成，具有补益心肾、化瘀通络的功能，临床用于气阴两虚、痰血阻络型冠心病心绞痛。本研究采用薄层色谱法对制剂中的麦冬、山萸肉、水蛭、银杏叶、虎杖进行定性鉴别，采用高效液相色谱法（HPLC）对制剂中红景天苷、马钱苷进行定量研究，为建立该制剂的质量控制方法提供参考依据。 1 仪器与试药 Waters 2695—2996高效液相色谱系统，2998PAD检测器， Empower工作站（Waters公司）；色谱柱为Hedera C18（4.6 mm250 mm，5 ?m）；BP—211D型电子分析天平（德国赛多利斯公司）；超声仪（SK6200H，上海科导超声仪器有限公司）；939薄层制板器（重庆市南岸贝尔德仪器技术厂）；凝胶成像分析仪（WD—9413A型，北京市六一仪器厂）。 红景天苷、马钱苷对照品为含量测定用，均购自于四川维克奇生物科技有限公司，批号分别为100826、111127；对照药材麦冬、山萸肉、水蛭、银杏叶、虎杖均购自中国药品生物制品检定所，批号分别为121013—200908、121495—200702、121061—200904、121160—201003、120980—201005；制剂所用饮片经检验，均符合2010年版《中华人民共和国药典》（一部）项下相关要求和规定。液相测定用甲醇为色谱纯，水为超纯水，其余试剂均为分析纯。补心软脉颗粒（江苏省中医院，批号121210、121215、121220，规格10 g/袋），阴性样品按补心软脉颗粒制备工艺自制。 思想汇报 /sixianghuibao/ 2 方法与结果 2.1 薄层色谱鉴别 2.1.1 麦冬 取补心软脉颗粒10 g，加5%HCl 50 mL水解1 h，取出，趁热过滤，滤液放冷后用二氯甲烷萃取2次，每次50 mL，合并二氯甲烷液，挥干，残渣加甲醇1 mL溶解，作为供试品溶液；取缺麦冬的阴性样品，按供试品溶液制备方法制备麦冬阴性对照溶液；取麦冬对照药材3 g，加甲醇50 mL，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣自加5%HCl 50 mL起同法制成对照药材溶液。吸取上述3种溶液各10 ?L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷—乙酸乙酯—甲酸（4∶4∶1.6）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105 ℃加热至斑点清晰，置紫外光（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性未见干扰。 2.1.2 山萸肉 取补心软脉颗粒10 g，加无水乙醇25 mL，超声30 min，滤过，滤液浓缩至5 mL，作为供试品溶液；取缺山萸肉的阴性样品，按供试品溶液制备方法制备山萸肉阴性对照溶液；取山萸肉对照药材1 g，同法制成对照药材溶液。吸取上述3种溶液各10 ?L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯—乙醇—冰醋酸（50∶10∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，105 ℃加热至斑点清晰，置日光下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的斑点，阴性未见干扰。
开题报告 /html/lunwenzhidao/kaitibaogao/ 2.1.3 水蛭 取补心软脉颗粒5 g，加无水乙醇50 mL，超声30 min，滤过，滤液浓缩至5 mL，作为供试品溶液；取缺水蛭的阴性样品，按供试品溶液制备方法制备水蛭阴性对照溶液；取水蛭对照药材1 g，同法制成对照药材溶液。吸取上述3种溶液各10 ?L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷—乙酸乙酯（4∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10 %硫酸乙醇溶液，105 ℃加热至斑点清晰，置紫外光（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性未见干扰。 2.1.4 银杏叶 取补心软脉颗粒5 g，加甲醇25 mL，加热回流30 min，取出，趁热过滤，滤液蒸干，残渣加水25 mL使溶解，用二氯甲烷萃取2次，每次50 mL，合并水层液，挥干，残渣加甲醇5 mL溶解，作为供试品溶液；取缺银杏叶的阴性样品，按供试品溶液制备方法制备银杏叶阴性对照溶液；取银杏叶对照药材1 g，同法制成对照药材溶液。吸取上述3种溶液各5 ?L，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以40%乙酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3%AlCl3乙醇溶液，热风吹干，置紫外光（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性未见干扰。 2.1.5 虎杖 取补心软脉颗粒5 g，加5%HCl 50 mL水解1 h，取出，趁热过滤，放冷，滤液用二氯甲烷萃取2次，每次50 mL，合并二氯甲烷液，挥干，残渣加二氯甲烷5 mL使溶解，作为供试品溶液；取缺虎杖的阴性样品，按供试品溶液制备方法制备虎杖的阴性对照溶液；取虎杖对照药材0.2 g，加甲醇50 mL，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣自加5%HCl 50 mL起同法制成对照药材溶液。吸取上述3种溶液各10 ?L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚—甲酸乙酯—甲酸（15∶5∶1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性未见干扰。
作文 /zuowen/ 2.2 红景天苷及马钱苷含量测定 2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取红景天苷与马钱苷对照品适量，加甲醇制备成浓度分别为145.12、41.56 ?g/mL的混合对照品储备溶液。 2.2.2 供试品溶液的制备 精密称取补心软脉颗粒约1.2 g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，称定质量，超声处理（频率53 kHz，功率280 W）30 min，取出，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，0.45 ?m滤膜滤过，取续滤液，即得。 2.2.3 阴性对照溶液的制备 按补心软脉颗粒制备工艺，分别制备缺红景天、山萸肉的阴性样品，按2.2.2项下方法制备阴性对照溶液。 2.2.4 色谱条件 Hedera—C18色谱柱（4.6 mm250 mm，5 ?m）；流动相：甲醇（A）—水（B）；梯度洗脱：0～16 min 80%A，18～60 min 72%A；柱温30 ℃；流速1.0 mL/min；检测波长：红景天苷为275 nm，马钱苷为240 nm。在上述色谱条件下，各组分分离度良好。色谱图见图1、图2。阴性对照在各指标成分相应的保留时间处无干扰。 2.2.5 线性关系考察 分别精密量取上述混合对照品储备溶液1.0、1.5、2.5、4.0、5.0、6.0 mL于10 mL容量瓶中，加甲醇稀释并定容至刻度，摇匀。分别精密吸取上述6个混合对照品稀释液及混合对照品储备液20 ?L进样，测定并计算。结果红景天苷回归方程为Y=464 356X—13 091，r=0.999 5，
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