钻山风颗粒剂的质量标准研究
作者：朱才庆，曾宪仪，李艳，吴迪，何南生，余华。
【摘要】 目的以钻山风对照药材和肉桂酸作为对照，分别建立薄层（TLC）鉴别和高效液相色谱（HPLC）法检测控制钻山风颗粒剂的质量。方法TLC鉴别用三氯甲烷—甲醇（14∶1）为展开剂；HPLC法采用Hypersil BDS C18色谱柱（5 μm，4.6 mm×250 mm），用乙腈—0.1%磷酸溶液(25∶75)为流动相，检测波长278 nm；柱温25℃；流速1.0 ml/min。结果TLC鉴别图谱斑点清晰，阴性无干扰；肉桂酸含量0.114 64～1.834 24 μg范围内呈良好线性关系，得回归方程Y=5×106X+97 402，r=0.999 9（n=6），平均加样回收率及RSD分别为99.67%和2.35%。结论以钻山风对照药材和肉桂酸作为对照，采用TLC法和HPLC法控制钻山风颗粒剂质量的方法简便快速、准确可靠、重复性好，专属性强。
类风湿性及风湿性关节炎属于中医学“痹证”范畴，中医认为是由于风、寒、湿之气杂而为病，闭阻经络病气血，痹阻关节、肌肉而发，故采用祛风、散寒、除湿及舒经通络等为治疗痹证的基本原则。我国人口众多，特别是随着老年化社会的逐渐到来，类风湿性及风湿性关节炎等疾病在临床上十分常见。因此与此相关的治疗药具有广泛的市场前景。钻山风糖浆是由钻山风、勾儿茶、四块瓦、威灵仙、千斤拔、丰城鸡血藤、山姜7味药组成的中药复方制剂，具有祛风除湿、散瘀镇痛、舒筋活络的功效，可用于风寒湿痹引起的腰膝冷痛，肢体麻木，伸屈不利等症。本实验室在原有钻山风糖浆的基础上［1］，开发了便于携带与服用的颗粒剂，可使患者拥有更多的选择，同时建立了新的质量控制方法，提高了新产品质量的可控性。
1 器材。
1.1 仪器 高效液相色谱仪(大连依利特分析仪器有限公司)：P200 Ⅱ型高压恒流泵，UV200 Ⅱ紫外可变波长检测仪，Rheodyne 7725i 高压六通进样阀，20 μl定量环；HW色谱工作站（南京千谱软件有限公司）；百万分之一电子天平（瑞士Mettler公司M3型）。
1.2 试药 钻山风颗粒剂（由本实验室自制）；钻山风对照药材(中国药品生物制品检定所，批号121193—200402)；肉桂酸对照品（供含量测定用，中国药品生物制品检定所，批号0786—980）；乙腈、甲醇为色谱纯（中国医药集体上海化学试剂公司）；水为自制的重蒸水，其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果。
2.1 钻山风的薄层鉴别取本品15 g，研细，加氨试液60 ml，使其完全溶解，移入分液漏斗中，用氯仿振摇提取3次，30 ml/次，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇1 ml使溶解，作为供试品溶液；另取钻山风对照药材15 g，加水200 ml，煎煮30 min，离心，取上清液，蒸干，残渣同供试品溶液制备方法制得对照药材溶液。照薄层色谱法［2］实验，吸取对照药材溶液4 μl，供试品溶液10～20 μl，分别点于同一以0.2%羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷—甲醇（14∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照药材色谱主斑点相应的位置上，显相同颜色的斑点。
2.2 肉桂酸的含量测定。
2.2.1 色谱条件 色谱柱为Hypersil BDS C18（5 μm，4.6 mm×250 mn）；流动相为乙腈—0.1%磷酸溶液(25∶75)；使用前用孔径为0.45 μm的有机滤膜减压过滤，超声20 min；检测波长278 nm，柱温25℃，流速1 ml/min；进样量20 μl。
2.2.2 可行性实验 精密称取肉桂酸对照品适量，加甲醇制成每毫升含肉桂酸约40 μg的溶液，即得，作为对照品溶液。取装量差异项下的本品内容物，研细，混匀，取约10 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 ml，密塞，称定重量，超声处理［功率250 W，频率(26.5±1)kHz］30 min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过（0.45 μm滤膜），取续滤液，即得，作为供试品溶液。分别取肉桂酸对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液注入液相色谱仪，记录色谱图。结果见图1～3。
图1 阴性对照样品（同时含钻山风和山姜）HPLC图谱（略）。
图3 钻山风颗粒剂HPLC图谱 从图1～3中可知肉桂酸保留时间为19 min左右，阴性对照（同时含钻山风和山姜）在相应的位置处无干扰峰，说明本品在上述色谱条件下肉桂酸与其它组分分离较好。理论板数以肉桂酸计算不低于2000。