高效液相色谱法同时测定苦参片中苦参碱和氧化苦参碱的含量
作者：姜艳玲，张善玉，吕惠子。
【关键词】 苦参片；,,氧化苦参碱；,,苦参碱；,,高效液相色谱。
摘要：目的建立苦参片中氧化苦参碱和苦参碱的含量测定 方法 。方法采用高效液相色谱法，使用 The rmo色谱柱，以乙腈—磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾1.36ｇ,加1 ml三乙胺,加水至1000 ml,用磷酸调节pH5.5）（3∶97）为流动相，流速为1.0 ml/min，检测波长为220 nm。结果氧化苦参碱在0.005 5～0.088 mg/ml之间与峰面积积分值呈良好的线性关系（r=0.999 8）,平均加样回收率99.41％，RSD为1.28％；苦参碱在0.106～0.170 mg/ml之间与峰面积积分值呈良好的线性关系（r=0.999 9）,平均加样回收率99.35%，RSD= 1.25%。结论该法灵敏、准确、专属性强，重现性好，可作为苦参片的质量控制方法。 论文代写。
Abstract：ObjectiveTo establish a method for simultaneous determination of the content of matrine and oxymatrine in Kushen Tablets. MethodsHPLC method was carried out through Thermo C18 column, using acetontrile— phosphate buffer solution (contained 1.36 g potassium dihydrogen phosphate and 1 ml triethylarmine, add water to 1000 ml, adjusted to pH 5.5 with phosphate acid)（3∶97） as mobile phase. The flow rate was 1.0 ml/min with detective wavelength of 220 nm. ResultsThe calibration curve of oxymatrine content was linear within the range of 0.0055～0.088 mg/ml (r=0.999 8),the average recovery of oxymatrine was 99.41%, RSD was 1.28%；the calibration curve of matrine content was linear within the range of 0.170～0.0106 mg/ml (r=0.999 9),the average recovery of Matrine was 99.35%, RSD was 1.25%. ConclusionThe method is simple, fast and accurate, it can increase the quality control index of Kushen Tablets.
Key words：Kushen Tablets； Oxymatrine； Matrine； HPLC 苦参片是由苦参经加工制成的纯中药制剂。具有清热燥湿、杀虫的功能，主要用于湿热蕴蓄下焦所致的痢疾、肠炎、热淋及阴肿阴痒、湿疹、湿疮等症。苦参具有清热燥湿、抗炎、抗肿瘤等作用，其主要活性成分为苦参碱和氧化苦参碱。苦参片原标准（部颁标准WS3—B—1953）中仅对苦参片进行了显微鉴别和薄层色谱鉴别，为提高产品的定量控制水平，本文对苦参片中氧化苦参碱和苦参碱的含量同时进行测定。
1 仪器与试药。
美国惠普HP1100高效液相色谱仪，HP1100色谱工作站；氧化苦参碱对照品（批号：0780—200004）、苦参碱对照品（批号：110805—200306）等均由 中国 药品生物制品检定所提供；苦参片，按部颁标准WS3—B—1953收载的制备方法自制（批号：050801，050802，050803，050804，050805）乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，其他试剂均为 分析 纯。 毕业论文。
2.1 色谱条件色谱柱：Thermo色谱柱（规格4.6 mm×250 mm，5μm）；流动相：乙腈—磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾1.36 g,加1 ml三乙胺,加水至1 000 ml,用磷酸调节pH 5.5）（3∶97）为流动相；流速：1 ml/min；检测波长：220 nm。 论文代写。
2.2 对照品溶液的制备 分别精密称取氧化苦参碱对照品4.4 mg，苦参碱对照品8.5 mg，置于50 ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备液（浓度分别为氧化苦参碱0.088 mg/ ml和苦参碱0.17 mg/ ml）。 论文代写。
2.3 供试品溶液的制备取本品10片，除去糖衣，研细，称取0.1 g精密称定, 置三角瓶中，加甲醇50 ml，氨试液4滴，称定重量，超声提取1 h，冷却，称定重量，加甲醇补足减失的重量，滤过，取续滤液，0.45μm微孔滤膜滤过，滤液作为供试品溶液。
2.4 系统适用性实验分别精密吸取供试品溶液及对照品溶液各5 μl，注入液相色谱仪，依法测定。结果见图1。 理论 塔板数：按氧化苦参碱峰及苦参碱峰 计算 ，均不低于3 000。 论文代写。
2.5 线性关系考察精密吸取储备液一定量，加甲醇分别准确配制含氧化苦参碱0.088 0，0.044 0，0.022 0，0.011 0，0.005 5 mg/ml的对照品溶液和含苦参碱0.170 0，0.085 0，0.042 5，0.021 2，0.010 6 mg/ml的对照品溶液，按“2. 1”项的色谱条件下进行测定，进样量20 μl，以氧化苦参碱、苦参碱进样量（mg）为横坐标，峰面积积分值为纵坐标绘制标准曲线，分别得回归方程:氧化苦参碱:Y = 739.26 X + 35.429，r=0.999 8；苦参碱: Y =516.42 X + 11.264，r=0.999 9。说明氧化苦参碱在0.005 5～0.088 mg/ml范围内，苦参碱在0.010 6～0.170 mg/ml范围内，与峰面积积分值呈良好的线性关系。 代写论文。