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以巢式PCR扩增乙型肝炎病毒(HBV)Sgene[4,5]为模型,分别使用不同退火温度组合与不同引物浓度组合进行巢式PCR扩增,观察它们对非特异性扩增的影响,使用不同退火温度组合巢式PCR扩增HBVSgene第1轮PCR反应体积为25μl,反应体系为:1号感染者HBVDNA2μl,外侧引物浓度为0.2μmol/L,Mg2+浓度为3mmol/L,dNTP浓度为0.2mmol/L,Taq酶1U,退火温度影响巢式PCR非特异性扩增 ...
2021/8/13 1:53:15
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造血细胞生长因子具有促进脐血扩增的作用,在不同的造血细胞生长因子联合作用下,可以有目的地进行体外扩增,从而使单份脐血有望解决高体重儿童及成人脐血移植存在的造血干/祖细胞数量不足的问题,为脐血广泛应用于临床移植作出贡献,③作用于晚期(单向)祖细胞的造血生长因子,如红细胞生成素(EPO),粒细胞刺激因子(GCSF),单核细胞系刺激因子(MCSF/Cfms配体),IL5及血小板生成素(TPO)等,它们主要作用于单向造血祖细胞,供进一步分化为各类前驱细胞和成熟细胞,④造血细胞增殖负调控因子,如选择性抑制造血祖细胞的βT细胞生长因子(TGFβ),还有巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP1α)、干扰素γ(IFNγ)、干扰素α(IFNα)、血小板第四因子(PF4)及肿瘤坏死因子α(TNFα)等 ...
2021/8/13 1:09:55
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造血细胞生长因子具有促进脐血扩增的作用,在不同的造血细胞生长因子联合作用下,可以有目的地进行体外扩增,从而使单份脐血有望解决高体重儿童及成人脐血移植存在的造血干/祖细胞数量不足的问题,为脐血广泛应用于临床移植作出贡献,③作用于晚期(单向)祖细胞的造血生长因子,如红细胞生成素(EPO),粒细胞刺激因子(GCSF),单核细胞系刺激因子(MCSF/Cfms配体),IL5及血小板生成素(TPO)等,它们主要作用于单向造血祖细胞,供进一步分化为各类前驱细胞和成熟细胞,④造血细胞增殖负调控因子,如选择性抑制造血祖细胞的βT细胞生长因子(TGFβ),还有巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP1α)、干扰素γ(IFNγ)、干扰素α(IFNα)、血小板第四因子(PF4)及肿瘤坏死因子α(TNFα)等 ...
2021/8/13 1:09:55
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lrlglGlBllkll,0067(3)53,lglrlgrrgggrrlrrgrBG,006,765,GlllllrrllrrlllrllrR,007,3(0)609605 ...
2021/12/3 11:42:39
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1多重置换扩增原理及特点多重置换扩增已被证明既可应用于环状DNA模板扩增[4]也可被用于线性DNA模板[1],以下将对多重置换扩增的肿瘤研究及临床的最新应用进展作详细说明,综上所述,多重置换扩增作为一种高效、完整、均衡的全基因组扩增技术,其在肿瘤学研究和临床的应用潜力已被人们发觉 ...
2021/8/13 20:53:15
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1多重置换扩增原理及特点多重置换扩增已被证明既可应用于环状DNA模板扩增[4]也可被用于线性DNA模板[1],以下将对多重置换扩增的肿瘤研究及临床的最新应用进展作详细说明,综上所述,多重置换扩增作为一种高效、完整、均衡的全基因组扩增技术,其在肿瘤学研究和临床的应用潜力已被人们发觉 ...
2021/8/13 20:53:15
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胚胎植入前遗传学诊断(PGD)是指借助显微操作技术对具有高遗传病风险夫妇,从其体外受精培养得到的胚胎中取出个别卵裂球细胞或极体或几个滋养层细胞进行遗传学检查,通过分析选择正常的胚胎移植,可以防止遗传学异常妊娠的发生,将产前诊断提前到胚胎植入子宫内膜之前,vitrofertilizatio—andembryotransfer,IVF—ET)的临床手段,聚合酶链式反应(PCR)、荧光原位杂交(fluorescenceinsituhybriddization,FISH)等检测技术,MDA是一种基于链置换和环状滚动扩增的全基因组扩增技术 ...
2021/8/10 18:30:26
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胚胎植入前遗传学诊断(PGD)是指借助显微操作技术对具有高遗传病风险夫妇,从其体外受精培养得到的胚胎中取出个别卵裂球细胞或极体或几个滋养层细胞进行遗传学检查,通过分析选择正常的胚胎移植,可以防止遗传学异常妊娠的发生,将产前诊断提前到胚胎植入子宫内膜之前,vitrofertilizatio—andembryotransfer,IVF—ET)的临床手段,聚合酶链式反应(PCR)、荧光原位杂交(fluorescenceinsituhybriddization,FISH)等检测技术,MDA是一种基于链置换和环状滚动扩增的全基因组扩增技术 ...
2021/8/10 18:30:26
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聚合酶链反应(PCR)技术的产生和发展极大得推进了微量DNA样本的分析,但由于许多材料所能提供的DNA量也只能用于一次或几次PCR反应,WGA技术如今已经发展形成以PCR为基础的PEP和DOP—PCR技术和不以PCR为基础使用随机引物恒温扩增的多重置换扩增技术(multipledisplacementamplification,MDA),MDA技术是目前最受关注的WGA技术,不同于以PCR为基础的PEP和DOP—PCR技术存在扩增产物过短、偏性扩增明显等缺点,该技术是不需以PCR为基础的具有更高扩增效率、更广覆盖域及更高保真度的新的扩增技术 ...
2021/8/26 21:00:55
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原标题:海淀今明年再增2万余学前学位,2019年、2020年,海淀区还将通过上述模式,增加学前教育学位2.28万个,2018年,海淀区通过“教委主体”扩增普惠性教育资源,新增学位5304个 ...
2021/6/18 0:43:01
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问题在教育大区海淀正在逐步缓解,扩增普惠性教育资源,新增学位5304个,原标题:北京海淀区今明年再增2万余学前学位责任编辑:凌芹莉 ...
2021/9/19 18:43:01
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胡仕明,吴建伟,μl,含50ng模板DNA、1.5mmol/LMg2+、0.20mmol/LdNTPs、0.15μmol/L引物和0.50UTaqDNA聚合酶,ng,dNTPs0.2mmol/L,上下游引物0.2μmol/L,1.5mmol/LMgCl2,1UTaq酶,总体积为30μl ...
2021/8/16 9:47:16
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胡仕明,吴建伟,μl,含50ng模板DNA、1.5mmol/LMg2+、0.20mmol/LdNTPs、0.15μmol/L引物和0.50UTaqDNA聚合酶,ng,dNTPs0.2mmol/L,上下游引物0.2μmol/L,1.5mmol/LMgCl2,1UTaq酶,总体积为30μl ...
2021/8/16 9:47:16
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于丽爽)“入园难”问题在教育大区海淀正在逐步缓解,2018年,海淀区通过“教委主体”扩增普惠性教育资源,新增学位5304个,通过“社会补充”新审批6所民办幼儿园,在(,)街道、万柳地区、海淀镇等“入园难”凸显的地区扩增990个学位 ...
2021/9/19 13:01:31
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“入园难”问题在教育大区海淀正在逐步得到缓解,2018年,海淀区通过“教委主体”扩增普惠性教育资源,新增学位5304个,“社会补充”新审批6所民办幼儿园,在中关村街道、万柳地区、海淀镇等“入园难”凸显的地区扩增990个学位 ...
2021/6/18 12:29:41
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2018年,通过“教委主体、街镇保底、社会补充”三种模式,全区扩增学前教育学位6800个,支持航天机关幼儿园、中科院幼儿园等单位以租代建,扩增学位,通过“社会补充”新审批6所民办幼儿园,在中关村街道、万柳地区、海淀镇等“入园难”凸显的地区扩增990个学位 ...
2021/7/10 7:51:11
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为了研究基质细胞衍生因子—1(SDF—1)和血小板第4因子(PF4)对扩增后脐血CD34+细胞归巢相关功能的影响,将纯化的脐血CD34+细胞接种入无血清培养液中,加入不同组合的细胞因子FST(FL+SCF+TPO)、FST+SDF—1、FST+PF4或FST+SDF—1+PF4,分别于培养第7、10、14天检测CD34+细胞扩增倍数、集落形成能力、细胞的黏附分子表达、总黏附性、趋化功能,StromalCell—derivedFactor1andPlateletFactor4ontheAdhesionCharacteristicsandChemotacticFunctionofExVivoExpandedUmbilicalCordBloodCD34+Cells,multipleoftotalnucleatedcells,CD34+cellsandvariouscoloniesduringtwo—weekexpansion(略) ...
2021/7/1 4:12:48
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农作物种植前或收获进行植物病原菌检测不仅可以对病害进行提前预警也可以检测农产品品质,传统植物病原菌分子生物学检测方法往往要实验室进行并且要借助多种专业仪器设备,这就表明L体系能够准确、快速地检测出植物病原菌 ...
2021/11/8 23:04:01
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扩增的细胞具备了NK细胞的基本特征和生物学特性,除了CD56+CD3—外,还对扩增的NK细胞上NKG2D、NKp46、NKp44、NKp30、CD94、CD158b、CD158a、NKB1、NKAT2等标记进行了验证,IL15、IL18和IL12等细胞因子在对NK细胞的生长与扩增是非常重要的,其中IL15的作用尤为重要,IL18、41BBLK562细胞的构建采用RTPCR方法分别从人PBMC中扩增IL15、41BBL、IL18cDNA,测序正确后,IL15、IL18基因分别克隆至CD8α信号肽的下游、CD8α跨膜区基因的上游 ...
2021/6/29 19:21:19
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根据SSR的来源可将其分为基因组SSR和表达序列标签(Expressedsequencetag,EST)—SSR,Thunb.)是柿科(Ebenaceae)柿属(DiospyrosL.)植物中作为果树栽培的代表种,其栽培历史已有二千余年,柿EST—SSR引物在柿近缘种中的扩增结果11对柿EST—SSR引物在20份柿近缘种中的扩增结果分别见表3、图1 ...
2021/9/10 10:25:22
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探讨色素原位杂交(CISH)在检测乳腺癌患者组织中HER2基因状态的临床应用,比较CISH与免疫组化(IHC)检测组织HER2状态的差异性,SituHybridizationforHER—2/neuStatusDetectinginBreastCancerTissueSamples,neoplasms;immunohistochemistry(IHC);chromogenicinsituhybridization(CISH); ...
2021/8/9 0:11:06
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探讨色素原位杂交(CISH)在检测乳腺癌患者组织中HER2基因状态的临床应用,比较CISH与免疫组化(IHC)检测组织HER2状态的差异性,SituHybridizationforHER—2/neuStatusDetectinginBreastCancerTissueSamples,neoplasms;immunohistochemistry(IHC);chromogenicinsituhybridization(CISH); ...
2021/8/9 0:11:06
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r/min离心5min,去上清液,在沉淀物中加NH4Cl1ml,重复上述步骤2次,100改良裂解法能裂解所研究的所有菌种,且扩增产物条带清晰,效果满意,100改良法裂解细菌后所扩增的条带较明亮清晰,效果满意,可检测2.5CFU/ml的细菌,敏感性比水煮法提高了100倍 ...
2021/8/19 2:55:06
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临床基因扩增检验技术即我们常说的pcr技术,是分子生物学教学中的一项重要内容,也是临床应用非常广泛的一项技术,1、临床基因扩增实验室开展pcr技术必须具备的基本条件,扩增基因临床点滴检验 ...
2021/7/26 21:14:27
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临床基因扩增检验技术即我们常说的pcr技术,是分子生物学教学中的一项重要内容,也是临床应用非常广泛的一项技术,1、临床基因扩增实验室开展pcr技术必须具备的基本条件,扩增基因临床点滴检验 ...
2021/7/28 1:01:07
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临床基因扩增检验技术即我们常说的pcr技术,是分子生物学教学中的一项重要内容,也是临床应用非常广泛的一项技术,1、临床基因扩增实验室开展pcr技术必须具备的基本条件,扩增基因临床点滴检验 ...
2021/7/28 1:01:07
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临床基因扩增检验技术即我们常说的pcr技术,是分子生物学教学中的一项重要内容,也是临床应用非常广泛的一项技术,1、临床基因扩增实验室开展pcr技术必须具备的基本条件,扩增基因临床点滴检验 ...
2021/7/26 21:14:27
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r/min离心5min,去上清液,在沉淀物中加NH4Cl1ml,重复上述步骤2次,100改良裂解法能裂解所研究的所有菌种,且扩增产物条带清晰,效果满意,100改良法裂解细菌后所扩增的条带较明亮清晰,效果满意,可检测2.5CFU/ml的细菌,敏感性比水煮法提高了100倍 ...
2021/8/19 2:55:06
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方法采用随机扩增多态性随机扩增多态性DNA(RAPD)技术分析了佛手13份种质材料的亲缘关系,遗传多样性,引物筛选110个引物中有51条引物扩增出条带,每条引物扩增带数1~15条,平均6条,扩增的谱带分子量大小在300~2200bp,16条引物扩增的多态性带相对较多,且条带清晰、重复性好 ...
2021/8/20 10:49:07
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方法采用随机扩增多态性随机扩增多态性DNA(RAPD)技术分析了佛手13份种质材料的亲缘关系,遗传多样性,引物筛选110个引物中有51条引物扩增出条带,每条引物扩增带数1~15条,平均6条,扩增的谱带分子量大小在300~2200bp,16条引物扩增的多态性带相对较多,且条带清晰、重复性好 ...
2021/8/20 10:49:07
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88888888 ...
2021/8/23 17:23:05
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2021/8/23 17:23:05
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ElectrophoretogramforthePCRproductsofHCoV—NL631bgene,resultofPCRfragmentfromlbgeneofHCoV—NL63,resultofPCRfragmentfromlageneofHCoV—NL63FZ07416FZ07416株la基因扩增片段DNA测序结果与GenBank中其他地区HCoV—NL63及HCoV—229E、HCoV—OC43基于部分1a基因核苷酸序列的种系进化树分析也显示,HCoV—OC43自成一簇,HCoV—229E与HCoV—NL63分属不同亚簇,福州地区的HCoV—NL63与荷兰的1株原型株(NC—005831)、加拿大(AY675541)及澳大利亚(AY746453)的亲缘性最近(图5) ...
2021/8/16 17:16:05
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ElectrophoretogramforthePCRproductsofHCoV—NL631bgene,resultofPCRfragmentfromlbgeneofHCoV—NL63,resultofPCRfragmentfromlageneofHCoV—NL63FZ07416FZ07416株la基因扩增片段DNA测序结果与GenBank中其他地区HCoV—NL63及HCoV—229E、HCoV—OC43基于部分1a基因核苷酸序列的种系进化树分析也显示,HCoV—OC43自成一簇,HCoV—229E与HCoV—NL63分属不同亚簇,福州地区的HCoV—NL63与荷兰的1株原型株(NC—005831)、加拿大(AY675541)及澳大利亚(AY746453)的亲缘性最近(图5) ...
2021/8/16 17:16:05
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MDA扩增5个淋巴细胞(3个为男性细胞,2个为女性细胞)全部扩增成功,扩增率100%;MDA扩增10个卵裂球有4个扩出产物,扩增率为40%,结论1、在单细胞水平性连锁遗传疾病诊断中,双重巢式PCR技术较单重巢式PCR技术具有较高的扩增率及诊断正确率,并有助于发现等位基因脱扣(alleledropout,ADO),方法:收集了62例孕妇外周血标本,提取小片段游离胎儿DNA,利用多重PCR(mutilplex—PCR)的方法分析胎儿的STR基因型,并与父母基因型相比对 ...
2021/8/14 16:07:37
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MDA扩增5个淋巴细胞(3个为男性细胞,2个为女性细胞)全部扩增成功,扩增率100%;MDA扩增10个卵裂球有4个扩出产物,扩增率为40%,结论1、在单细胞水平性连锁遗传疾病诊断中,双重巢式PCR技术较单重巢式PCR技术具有较高的扩增率及诊断正确率,并有助于发现等位基因脱扣(alleledropout,ADO),方法:收集了62例孕妇外周血标本,提取小片段游离胎儿DNA,利用多重PCR(mutilplex—PCR)的方法分析胎儿的STR基因型,并与父母基因型相比对 ...
2021/8/14 16:07:37
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MDA扩增5个淋巴细胞(3个为男性细胞,2个为女性细胞)全部扩增成功,扩增率100%;MDA扩增10个卵裂球有4个扩出产物,扩增率为40%,结论1、在单细胞水平性连锁遗传疾病诊断中,双重巢式PCR技术较单重巢式PCR技术具有较高的扩增率及诊断正确率,并有助于发现等位基因脱扣(alleledropout,ADO),对cffDNA进行二次PCR反应后,使用反向斑点杂交(revertdot—blothybridization,RDB)检测胎儿的β—珠蛋白基因型,与创伤性产前诊断结果比较,观察准确率 ...
2021/8/14 2:30:57
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MDA扩增5个淋巴细胞(3个为男性细胞,2个为女性细胞)全部扩增成功,扩增率100%;MDA扩增10个卵裂球有4个扩出产物,扩增率为40%,结论1、在单细胞水平性连锁遗传疾病诊断中,双重巢式PCR技术较单重巢式PCR技术具有较高的扩增率及诊断正确率,并有助于发现等位基因脱扣(alleledropout,ADO),对cffDNA进行二次PCR反应后,使用反向斑点杂交(revertdot—blothybridization,RDB)检测胎儿的β—珠蛋白基因型,与创伤性产前诊断结果比较,观察准确率 ...
2021/8/14 2:30:57
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查找副溶血性弧菌的基因序列,将当前流行群的序列和以往副溶血性弧菌的序列进行比较,设计针对流行群的PCR引物,并进行多重PCR扩增,群特异多重PCR法能快速鉴定当前副溶血性弧菌流行群,有利于流行病学溯源等,查找副溶血性弧菌的基因序列,将当前流行群的序列和以往副溶血性弧菌的序列进行比较,根据流行群特异的toxRS/new基因(GenBankAccessionNo:L11929)设计扩增850bp左右的引物,P上:5′—TAATGAGGTAGAAAC—3′,P下:5′—CGTAACGGGCCTACA—3′ ...
2021/8/11 15:10:05
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查找副溶血性弧菌的基因序列,将当前流行群的序列和以往副溶血性弧菌的序列进行比较,设计针对流行群的PCR引物,并进行多重PCR扩增,群特异多重PCR法能快速鉴定当前副溶血性弧菌流行群,有利于流行病学溯源等,查找副溶血性弧菌的基因序列,将当前流行群的序列和以往副溶血性弧菌的序列进行比较,根据流行群特异的toxRS/new基因(GenBankAccessionNo:L11929)设计扩增850bp左右的引物,P上:5′—TAATGAGGTAGAAAC—3′,P下:5′—CGTAACGGGCCTACA—3′ ...
2021/8/11 15:10:05
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1.2方法按照线粒体DNA提取试剂盒上的步骤提取40例大肠癌及癌旁正常组织的线粒体DNA,根据大肠癌线粒体DNAD环区的全长设计四对引物,分别为引物1:5′GATCACAGGTCTATCACCCTATTAAC3′,引物2:5′GGTTTGGCAGAGATGTGTTTA3′扩增355bp的片段,引物3:5′GCTTCTGGCCACAGCACTTA3′,引物4:5′GCCCGTCTAAACATTTTCAG3′,扩增313bp的片段,引物5:5′CTTTCATGGGGAAGCAGATT3′,引物6:5′TGTTGGTATCCTAGTGGGTGA3′,扩增258bp的片段,引物7:5′CTATCACACATCAACTGCAACTC3′,引物8:5′CATCGTGATGTCTTATTTAAGG3′,扩增342bp的片段,根据四对引物用PCR仪扩增线粒体DNAD环区的全长.
,PCR产物,加入8μL变性缓冲液(800g/L去离子甲酰胺,20mmol/LEDTA,0.5g/L溴酚蓝,0.5g/L二甲苯晴蓝)混匀,96℃变性10min,冰上骤冷,立即上样行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(丙烯酰胺∶甲叉丙烯酰胺=291),0.5×TBE为电泳缓冲液,10mA恒电流电泳5h,直至溴酚蓝接近凝胶底部为止,取出凝胶,固定、银染、显色、摄片.
,A:13N,13T,14N,14T,15N,15T,16N,16T的SSCP结果提示13T发生点突变;图B:29N,29T,30N,30T,31N,31T,32N,32T的SSCP结果30T发生点突变. ...
2021/8/16 8:29:55
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其免疫表型特征有:CD34+、Thy—1—/弱+、Lin—、CD33—、CD38—、CD45Ro—、HLA—DR—,HSC是不均一的细胞群体,早期的造血细胞大部分处于G0/G1期,启动慢,但扩增持续时间长,扩增倍数高,造血细胞产量高,此培养方法提供HSC一个接近于体内的造血环境,能扩增各阶段的造血细胞,并维持甚至扩增原始HSC,称原始HSC培养方法 ...
2021/8/18 3:08:15
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ISSR—PCR初始条件及程序参考有关ISSR分析的文献[8~10],设计何首乌ISSR—PCR初始25μl反应体系:1×Taq酶配套缓冲液,DNA模板50ng,1UTaqDNA聚合酶,1.5mmol/LMgCl2,0.4μmol/L引物,0.2mmol/LdNTPs,退火温度的确定采用梯度PCR模式,设定退火温度最低48.0℃和最高63.0℃,扩增仪自动生成12个温度梯度:48.0,48.8,49.8,51.2,53.2,55.1,56.6,58.4,60.3,61.5,62.4,63.0℃,何首乌ISSR—PCR扩增反应体系的优化ISSR—PCR扩增反应体系的优化采用单因素实验 ...
2021/8/25 2:17:36
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structuresofnewtypesofCTXφandnct—CTXφgenomes,扩增片断分别为:(1)上游引物CTRS上5′—ATTGACAGGATGAAGGATACC—3′,下游引物rstA下5′—CGGAATTCTCGACATCAAATGGCATG—3′,用于扩增CTXφ基因组串联体的第1个基因组末端和第2个起始端之间的基因,扩增片断简称为CR,约1500bp,片段包括ctxB3′端部分基因、ig1、rstR、ig2和rstA5′端部分基因,(4)ctxAB基因分段扩增:利用ZCT上和ZCT下5′—GTGTGTTGTGGTATTCTGCAC—3′,引物CTB上5′—GGTGTAAAATTCCTTGACG—3′和CTB下5′—GCTTCTCATCATCGAACC—3′扩增,扩增片段分别约1000和550bp ...
2021/8/21 10:19:56
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分别克隆入PGEM—T载体,酶切鉴定阳性克隆,再经PCR反应获得多量的RAGE,NF—κB基因片段,反向插入双启动子真核表达载体pBudCE4.1,构建RAGE、NF—κB反义RNA单/双基因共表达载体,RAGE、NF—κB基因PGEM—T载体克隆将目的基因RAGE、NF—κB片段与PGEM—T连接,并转化感受态细胞E.coliTop10,将菌液涂抹至预先制备含IPTG/X—Gal/氨苄青霉素的LB平板上,蓝白筛选,扩增阳性克隆并小量抽提质粒,xhoⅠ、kpnⅠ(RAGE)/HindⅢ、BamHI(NF—κB)双酶切鉴定,pBudCE4.1/NF—κB载体及pBudCE4.1/RAGE+NF—κB载体的构建取PGEM—T/NF—κB质粒DNA,用引物NF—κBR,NF—κBF扩增NF—κB目的基因:PCR反应体系及反应条件同RAGE基因 ...
2021/8/20 12:50:26
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分别克隆入PGEM—T载体,酶切鉴定阳性克隆,再经PCR反应获得多量的RAGE,NF—κB基因片段,反向插入双启动子真核表达载体pBudCE4.1,构建RAGE、NF—κB反义RNA单/双基因共表达载体,RAGE、NF—κB基因PGEM—T载体克隆将目的基因RAGE、NF—κB片段与PGEM—T连接,并转化感受态细胞E.coliTop10,将菌液涂抹至预先制备含IPTG/X—Gal/氨苄青霉素的LB平板上,蓝白筛选,扩增阳性克隆并小量抽提质粒,xhoⅠ、kpnⅠ(RAGE)/HindⅢ、BamHI(NF—κB)双酶切鉴定,pBudCE4.1/NF—κB载体及pBudCE4.1/RAGE+NF—κB载体的构建取PGEM—T/NF—κB质粒DNA,用引物NF—κBR,NF—κBF扩增NF—κB目的基因:PCR反应体系及反应条件同RAGE基因 ...
2021/8/20 12:50:26
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DNA浓度在PCR反应体系体积为20μl,引物浓度0.375μmol/L、TaqDNA聚合酶1U、Mg2+浓度1.0mmol/L、dNTPs浓度125μmol/L条件下,设定模板梯度0.5,1,2,20,200,500,1000和2000ng/20μl,以确定适宜的模板浓度,引物浓度在PCR反应体系体积为20μl,模板浓度50ng/20μl、TaqDNA聚合酶1U、Mg2+浓度1.0mmol/L、dNTPs浓度125μmol/L条件下,设定随机引物浓度0.1,0.2,0.4和0.5μmol/L,以确定适宜的引物浓度,DNA聚合酶用量在PCR反应体系体积为20μl、模板浓度50ng/20μl、引物浓度0.4μmol/L、Mg2+浓度1.0mmol/L、dNTPs浓度125μmol/L条件下,设定TaqDNA聚合酶0.5,1,1.5和2U,以确定适宜的TaqDNA聚合酶用量,其结果图3所示 ...
2021/8/27 19:20:28
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DNA浓度在PCR反应体系体积为20μl,引物浓度0.375μmol/L、TaqDNA聚合酶1U、Mg2+浓度1.0mmol/L、dNTPs浓度125μmol/L条件下,设定模板梯度0.5,1,2,20,200,500,1000和2000ng/20μl,以确定适宜的模板浓度,引物浓度在PCR反应体系体积为20μl,模板浓度50ng/20μl、TaqDNA聚合酶1U、Mg2+浓度1.0mmol/L、dNTPs浓度125μmol/L条件下,设定随机引物浓度0.1,0.2,0.4和0.5μmol/L,以确定适宜的引物浓度,DNA聚合酶用量在PCR反应体系体积为20μl、模板浓度50ng/20μl、引物浓度0.4μmol/L、Mg2+浓度1.0mmol/L、dNTPs浓度125μmol/L条件下,设定TaqDNA聚合酶0.5,1,1.5和2U,以确定适宜的TaqDNA聚合酶用量,其结果图3所示 ...
2021/8/27 19:20:28
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对学知识定要多加练习这样才能进步,因精品编辑老师整理了九年级物理下册知识供参考,①确定原磁场方向; ...
2021/7/25 5:46:32
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但关于“营改增”对税收收入影响的现有文献都仅仅停留在静态层面,忽视了“营改增”对经济的后续影响,现有的对“营改增”其他方面的研究也存在类似的问题,总体来说,现有研究更多地停留在静态层面,对“营改增”对经济作用路径的阐述不够清晰,二、“营改增”扩围及其对财政经济的影响 ...
2021/5/4 10:42:01
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临床实验室管理制度范本篇一
,临床实验室管理制度范本篇二
,临床实验室管理制度范本篇三 ...
2022/1/10 11:20:21
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本文构建了基于业扩报装大数据计量方法的区域用电量预测模型,对传统的业扩报装预测方法进行了优化,用电量预测对经济社会发展和电力系统供需平衡至关重要,将用电量的影响分为业扩影响电量和非业扩影响电量,非业扩影响电量为剔除业扩影响电量外的用电量总和,通过ARMA非业扩电量预测方法进行打包预测非业扩电量综合自然增长率 ...
2021/6/11 5:19:00
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然而,由于污染严重,扩增抑制物的存在,试剂盒缺乏规范化、标准化,加之技术、条件、质控等方面因素,其敏感性、特异性差异颇大,人们对其可信度、可靠性产生了怀疑,给临床医生诊断结核病带来了一定的困惑,法国学者Carpentier等[5]对AmplicorpCR进行多中心研究,结果显示,其检测肺外标本(尿、胸腹液、脑脊液等)、涂阳标本、涂阴标本及培阳标本的敏感性分别为83%、94.5%、74%、95%,特异性达98%,核酸扩增技术是一种新兴的发展中的诊断技术,在不少方面仍有待改进与完善,如方法学上进一步自动化、简单化,优化实验条件与参数,不断改进检测手段,拓宽应用范围(分支杆菌菌型鉴定、药敏试验、化疗效果的监测等),开发更为实用的标准化试剂盒等 ...
2021/8/27 10:53:45
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为确定PCR(聚合酶链反应)扩增葡萄糖激酶基因启动子区,对影响PCR的实验因素进行了系统研究,本文就从白细胞中提取的基因组DNA作为模板,研究了应用PCR方法扩增葡萄糖激酶基因的最适实验条件,以便进而研究其与2型糖尿病发生的关系,2.1.1通常PCR实验的酶用量范围为0.5U—2U ...
2021/8/13 11:48:26
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为确定PCR(聚合酶链反应)扩增葡萄糖激酶基因启动子区,对影响PCR的实验因素进行了系统研究,本文就从白细胞中提取的基因组DNA作为模板,研究了应用PCR方法扩增葡萄糖激酶基因的最适实验条件,以便进而研究其与2型糖尿病发生的关系,2.1.1通常PCR实验的酶用量范围为0.5U—2U ...
2021/8/13 11:48:26
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ll)是目前发现功能强专职抗原递呈细胞(grgll)也是唯能体外直接激活初始型淋巴细胞启动、维持和调节免疫应答程处心环节,
,树突状细胞外周血液及组织含量很低其分离培养非常困难限制了输入状细胞进步研究与应用 ...
2022/1/16 0:55:50
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关键词:地中海贫血;聚合酶链反应(PCR);少数民族;海南省摘要:目的研究海南省汉、黎族人群中东南亚型缺失(——SEA)、右侧缺失(—α3.7)和左侧缺失(—α4.2)三种α—地中海贫血缺失突变的携带率、基因频率及基因型的分布特点,在201例海南黎族人中检出114例α—地中海贫血携带者,携带率为56.72%,三种α—地中海贫血缺失突变的基因频率为0.3607,其中——SEA、—α3.7和—α4.2的基因频率分别为0.3607、0.0075、0.1891,共发现——SEA/αα、—α3.7/αα、—α3.7/—α3.7、—α3.7/—α4.2、—α4.2/αα、和—α4.2/—α4.2六种基因型,其中——SEA/αα3例,—α3.7/αα39例,—α3.7/—α3.76例,—α3.7/—α4.218例,—α4.2/αα38例,—α4.2/—α4.210例,图1——SEA、—α3.7和—α4.2缺失型突变的多重PCR检测结果(略)Fig1ThePCR—amplifiedresultof——SEA、—α3.7、—α4.2deletion注:M为GeneRulerTMDNALadder(华美产品),泳道1—7对应的样本基因型分别为aa/aa,——SEA/αα,—α3.7/αα,—α3.7/—α3.7,—α4.2/αα,—α4.2/—α4.2,—α3.7/—α4.2 ...
2021/8/20 9:09:55
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为了探讨不同的细胞因子组合对脐血单个核细胞体外的扩增作用及扩增后CD49d和CXCR4的变化,将新鲜脐血标本分离的单个核细胞接种于含有不同细胞因子组合的无血清无基质培养体系中培养7天,在0天,7天检测有核细胞数,CD34+细胞数及CD34+CXCR4+,CD34+CD49d+的细胞数和集落形成单位(CFU)数.根据不同细胞因子组合实验分组为:对照组;SF组(SCF+FL);SFT组(SCF+FL+TPO)和SFT6组(SCF+FL+TPO+IL—6),DifferentCytokineCombinationsontheExpressionofCD49dandCXCR4andExvivoExpansionofUmbilicalCordBloodMononuclearCells,MethoCultTMGF(H4434)(Stemcell公司产品)含1%甲基纤维素,30%FB,1%BSA,10—4mol/L2—ME,50ng/mlrhSCF,50ng/mlGM—CSF,10ng/mlrhIL—3,3U/mlrhEPO,造血祖细胞集落培养14天后于倒置显微镜下记数CFU数 ...
2021/7/4 22:32:49
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要牢牢抓住幼儿建设这重重切实扩增公益普惠学前教育,要加学前教育财政投入学前教育发展提供保障,要做幼儿编制核定工作推进幼儿教师队伍建设 ...
2021/11/11 21:27:11
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部将提供办场地区教委将引入北京明天幼稚集团通央地合作促进海淀区学前教育事业发展和幼教品牌打造,根据08年3月海淀区委区政府出台《海淀区三期学前教育三年行动计划(0800年)》海淀区鼓励驻区单位办,新京报记者 方怡君 校对 李铭</ ...
2021/8/13 21:02:51
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[文献标识码]A[文章编号]1005—0019(2009)7—0020—02[摘要]目的:通过探讨多种细胞因子(TPO、SCF、FL、IL—3、IL—6)组合对人脐血CD34+细胞体外定向诱导扩增巨核细胞(MK)的作用,建立人脐血(CB)来源MK体外定向诱导扩增的最佳体系,在不同时间点进行细胞计数,采用流式细胞术检测培养体系中CD41+细胞的含量 ...
2021/11/9 23:24:58
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目观察抗癌药“卡宁”对体外培养肝癌细胞株BL70细胞凋亡抑制基因bl影响探讨其抗肿瘤治疗作用机制,μg种d各00lL0×br(50lLKl0lLTrl805lLgl0%rx00)5μl引物各50lLq多聚酶U,BL70细胞生长抑制率见表 ...
2021/11/20 10:12:40
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急性病序列分析DNA福州,30s→52℃40s→72℃40s,扩增40个循环,3,4:人类偏肺病毒(HMPV). ...
2021/8/18 16:31:46
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急性病序列分析DNA福州,30s→52℃40s→72℃40s,扩增40个循环,3,4:人类偏肺病毒(HMPV). ...
2021/8/18 16:31:46
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Tris—HCl(PH8.0)、0.5MEDTA(PH8.0)、CTAB提取液、3mol/L醋酸钠(PH5.6)1.2方法1.2.1基因组DNA的提取参考文献[2]提取基因组DNA,对提取产物的PCR检测[3—4]1.2.3.1设计引物18S:18SrDNACaMV35s:promoterfromcanliflomermosaicvirus,花椰菜花叶病毒35S启动子NOS:nopalinesynthaselerminator,胭脂碱合成酶3’转录终止子1.2.3.2PCR反应体系按照WizardPCRprepsDNAPurificationSystem试剂盒要求进行PCR反应,2.2PCR检测2.2.1内标的检测分别对番茄样品DNA用18SrDNA引物进行PCR扩增,如果出现预期大小的条带,则说明提取出的基因组DNA能够经过PCR扩增得出特定序列,可进一步用于外源基因检测并进行转基因成分的判定 ...
2021/11/23 0:19:10
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借鉴上海、等“营改增”先行试地区先进做法和宝贵验我们得到了良启示下步我区试“营改增”做了良铺垫现就浅谈“营改增”试对我区财税工作影响,实行“营改增”改革试68%试微企业税率由5%变3%成次“营改增”改革试受益者对当前面临济下行压力加、营困难微企业说显得尤重要,三、“营改增”政策对我区财税可能产生影响从产业层次看“营改增”由我区交通运输业旧车占有比例较进项抵扣税额较 ...
2021/7/24 13:49:42
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μlDNA模板(25ng/μl)、0.5μl引物(1mmol/L)、5μldNTP(1mmol/L)、2μl10×PCRbuffer,1UrTaqDNA聚合酶和14.5μlddH2O,(Biolabs)和MseⅠ(Biolabs)双酶切,酶切产物用T4—连接酶(TaKaRa)与接头连接;然后用无选择性碱基的引物进行预扩增,预扩增程序为:94℃变性2min,94℃变性30s,56℃退火30s,72℃延伸1min,30个循环后,72℃延伸5min,PCR反应结束后,置4℃保存,94℃变性30s,65℃退火30s(每个循环降低0.7℃),72℃延伸1min,共12个循环;94℃变性30s,55.5℃退火30s,72℃延伸1min,在进行23个循环后,72℃延伸5min,PCR反应结束后,置4℃保存 ...
2021/8/14 6:07:06
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PCR技术不但能检测尿道或宫颈拭子标本,而且可以采用尿标本进行检测,最新发展的扩增试验是Gen—Probe公司的扩增Ct的转录介导扩增试验(TMA),扩增并检测Ct的rRNA,综上所述,结合国内情况,泌尿生殖道Ct感染的实验诊断中,经典的细胞培养方法虽然特异,但耗时长、费用大,且不够敏感,不适于临床开展 ...
2021/8/22 0:38:26
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μlDNA模板(25ng/μl)、0.5μl引物(1mmol/L)、5μldNTP(1mmol/L)、2μl10×PCRbuffer,1UrTaqDNA聚合酶和14.5μlddH2O,(Biolabs)和MseⅠ(Biolabs)双酶切,酶切产物用T4—连接酶(TaKaRa)与接头连接;然后用无选择性碱基的引物进行预扩增,预扩增程序为:94℃变性2min,94℃变性30s,56℃退火30s,72℃延伸1min,30个循环后,72℃延伸5min,PCR反应结束后,置4℃保存,94℃变性30s,65℃退火30s(每个循环降低0.7℃),72℃延伸1min,共12个循环;94℃变性30s,55.5℃退火30s,72℃延伸1min,在进行23个循环后,72℃延伸5min,PCR反应结束后,置4℃保存 ...
2021/8/14 6:07:06
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PCR技术不但能检测尿道或宫颈拭子标本,而且可以采用尿标本进行检测,最新发展的扩增试验是Gen—Probe公司的扩增Ct的转录介导扩增试验(TMA),扩增并检测Ct的rRNA,综上所述,结合国内情况,泌尿生殖道Ct感染的实验诊断中,经典的细胞培养方法虽然特异,但耗时长、费用大,且不够敏感,不适于临床开展 ...
2021/8/22 0:38:26
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摘要:以魁蚶为研究材料,建立了魁蚶的AFLP分子标记反应体系,s,72℃1min,此步骤共30个循环,mmol/L),选择性扩增用量3.6L(2.5mmol/L) ...
2021/5/3 5:04:00
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免疫球蛋白重链可变区(IgVH)基因突变是慢性淋巴细胞白血病(CLL)最重要的独立预后因素之一,为探讨CLL患者IgVH基因突变状态,应用多重PCR技术检测9例CLL患者的IgVH基因,纯化PCR扩增产物后直接测序,应用IMGT/V—QUEST工具分析,明确有无IgVH突变及突变位置,MutationStatusinPatientswithChronicLymphocyticLeukemiabyMultiplexPCR,μg,oligodT1μl(0.5μg/l),5×Buffer8μl,dNTP(40mmol/L)2μl,AMV10U(1μl),RNasin40U(1μl),DTT(100mmol/L)1μl,加DEPC水至40μl,70℃,10分钟 ...
2021/8/23 6:41:35
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近年来,随着分子生物学的发展,核酸扩增技术在常规感染的诊断中很快建立,一、扩增探针法由于非培养检测方法不断发展,DNA杂交也逐渐被应用于诊断CT感染,PCR检测CT快速,简便,有高度敏感性和特异性 ...
2021/8/13 14:34:16
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近年来,随着分子生物学的发展,核酸扩增技术在常规感染的诊断中很快建立,一、扩增探针法由于非培养检测方法不断发展,DNA杂交也逐渐被应用于诊断CT感染,PCR检测CT快速,简便,有高度敏感性和特异性 ...
2021/8/13 14:34:16
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μl的反应体系中,含10×Buffer2.5μl,2.0mMdNTPs3.0μl,2.0U/μlTaq酶1.0μl,2.0μmol/L随机引物4.0μl,30.0ng/μl模板DNA30ng,ddH2O13.5μl,Orthogonaldesign;RAPD;Reactionsystem;Varianceanalysis茴香FoeniculumvulgareMil1.为伞形科茴香属多年生宿根草本植物,原产地中海沿岸及西亚,在我国北方各地被广泛栽培,PCR扩增与产物检测在FTH—04AB—102型PCR仪(杭州大和热磁电子有限公司)上进行扩增,热循环参数为95℃预变性3min,94℃变性1min,45℃退火1min,72℃延伸2min,35个循环,最后72℃延伸10min,4℃保存 ...
2021/8/24 3:49:11
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目前,用于植物基因组分析的分子标记有RFLP(restr—icationfragmentlengthpolymorphism,限制性片段长度多态性)、RAPD(randomamplifiedpolymorphicDNA,随机扩增多态性DNA)、AFLP(amplifiedfragmentlengthpolymorphism,扩增片段长度多态性)、SSR(simplesequencerepeat,简单重复序列)、SRAP(sequence—relatedamplifiedpolymorphism,相关序列扩增多态)等,primer)长18bp,引物的3′端仍为3个选择碱基,引物的5′端为14bp的核心序列,其中核心序列前11bp是一段填充序列,紧接着是AATT,下游引物的结合位点在内含子区域或启动子区域,对内含子区域、启动子区域进行特异扩增,近年来,由于SRAP引物的大量开发,并且在分子标记辅助育种中体现出了优于AFLP、ISSR、RAPD等特点[10—11],因此备受遗传育种学家的青睐,被广泛应用于农作物遗传多样性评价、遗传图谱构建和品种鉴定等方面 ...
2021/8/23 22:29:35
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定增投新变局下如何应机而变定增市场会是如何发展趋势呢?下是定增市场前景欢迎,从以上三趋势看总体市场环境虽不容乐观但定增市场规模仍继续扩预计07年年期定增市场规模将维持50006000亿水平,统计显示06年下半年会项目金额已呈下滑趋势 ...
2021/9/28 1:34:31
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Paediatrics,GuangzhouMaternalandNeonatalHospital,Guangzhou,510180China;1DepartmentofPaediatrics,TheChineseUniversityofHongKong,HongKong,China,发现应用以下5组不同生长因子组合:①SCF/IL—3/IL—6/G—CSF;②SCF/G—CSF/MGDF(megakaryocytegrowthanddevelopmentfactor);③SCF/MGDF;④MGDF;⑤SCF/IL—3/IL—6/G—CSF/MGDF培养10天后结果显示:各组中外周血CD34+细胞中的CD41+MKPC的扩增效应均较骨髓CD34+细胞好,当加入TPO/IL—1β/IL—3/IL—6/Flt—3L时,结果显示CFU—MK扩增400倍,CD34+细胞扩增5—22倍 ...
2021/8/7 0:19:27
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Paediatrics,GuangzhouMaternalandNeonatalHospital,Guangzhou,510180China;1DepartmentofPaediatrics,TheChineseUniversityofHongKong,HongKong,China,发现应用以下5组不同生长因子组合:①SCF/IL—3/IL—6/G—CSF;②SCF/G—CSF/MGDF(megakaryocytegrowthanddevelopmentfactor);③SCF/MGDF;④MGDF;⑤SCF/IL—3/IL—6/G—CSF/MGDF培养10天后结果显示:各组中外周血CD34+细胞中的CD41+MKPC的扩增效应均较骨髓CD34+细胞好,当加入TPO/IL—1β/IL—3/IL—6/Flt—3L时,结果显示CFU—MK扩增400倍,CD34+细胞扩增5—22倍 ...
2021/8/7 0:19:27
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ofUmbilicalCordBloodHematopoieticCellsinStirredTankBioreactorwithfeedingprotocol,体外培养液用IMDM(Gibco公司),使用时添加20%胎牛血清(FBS),以及SCF(50ng/ml)、IL—3(5ng/ml)、IL—6(20ng/ml)、G—CSF(2.0ng/ml)和GM—CSF(2.0ng/ml),其中SCF、IL—6购于北京宝赛生物技术公司,IL—3购于Pepro—Tech公司,G—CSF购于上海三维制药厂,GM—CSF购于上海海济生物技术有限公司,CFU—Mk的检测采用血浆块法,细胞以1×105cells/ml的接种密度接种于24孔板中,每孔加50μl脐血浆,50μl3.4g/L的CaCl2溶液,另加入含有TPO(20ng/ml)、IL—3(10ng/ml)、IL—6(10ng/ml)的α培养基(Gibco公司),混匀后静置凝固 ...
2021/7/2 3:09:29
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IntraperitoneallyTransfusedwithExVivoExpandedBoneMarrowCD34+CD59+CellsfromPatientswithParoxysmalNocturnalHemoglobinuria,我们以前的工作表明,应用免疫磁珠方法对细胞可进行两次分选得到高富集度的CD34+CD59+细胞,并对CD34+CD59+细胞进行体外扩增,但扩增的细胞能否在体内担当重建造血的重任,PNH患者骨髓中CD34+CD59+细胞的分选 ...
2021/7/11 6:36:09
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在与淋巴结转移的关系中,转移癌c—erbB—2阳性17例(48.6%),无转移者阳性3例(15%),相互比较(P0.05),表明c—erbB—2基因扩增与癌的分化高低有关,但不能作为分级的参数,在分析与淋巴结转移的关系中,c—erbB—2基因扩增阳性与淋巴结转移呈正相关,对预后有一定意义,Beau.Fluorescenceinsituhybridizationincancerdiagnose.ImportantAdvOncol,1993;29~45.[8]邓永江,皋岚湘,丁华野等 ...
2022/1/8 12:19:10
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采用细胞因子体外扩增脐血CD34+细胞时,使用低剂量的抗氧化剂适度清除细胞内的ROS,明显提高培养物中造血干/祖细胞的含量,同时并不影响扩增后CD34+细胞的再扩增能力,清除细胞内ROS对CD34+细胞扩增的影响进一步考察了在培养过程中采用3种抗氧化剂清除细胞内的ROS后,对CD34+细胞体外扩增特性的影响,而CD34+是造血干/祖细胞的表型标志,CD34+CD38—细胞代表了更为原始的造血干/祖细胞,进一步分析培养物中CD34+、CD34+CD38—细胞的比例,结果见表1 ...
2021/8/11 7:49:06
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采用细胞因子体外扩增脐血CD34+细胞时,使用低剂量的抗氧化剂适度清除细胞内的ROS,明显提高培养物中造血干/祖细胞的含量,同时并不影响扩增后CD34+细胞的再扩增能力,清除细胞内ROS对CD34+细胞扩增的影响进一步考察了在培养过程中采用3种抗氧化剂清除细胞内的ROS后,对CD34+细胞体外扩增特性的影响,而CD34+是造血干/祖细胞的表型标志,CD34+CD38—细胞代表了更为原始的造血干/祖细胞,进一步分析培养物中CD34+、CD34+CD38—细胞的比例,结果见表1 ...
2021/8/11 7:49:06
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新组合(06—29×06—16)的母本与闽茄5号相同,父本为早熟类型06—16,在制种时容易发生混杂,ng/μLDNA模板,2.0mmol/LMgCl2,200μmol/LdNTPs,0.25μmol/L引物,0.75UTaq酶,利用筛选出的具有特异性谱带的引物进行SRAP扩增,经过多次重复试验,结果表明,引物组合Me5/Em2对闽茄5号扩增在1200bp具有偏父性条带(图1) ...
2021/6/7 1:39:10
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extractionDNAfromancientteethandtheinfluencesofamplifyingconditions【Abstract,Mg2+helpstoincreasetheactivityofTaqEandavoidtheamplifyingerrors.ConclusionAncientDNAextractionkitisaeffectivewaytoextractancientDNA,ofMg2+haveinfluencesontheresultsofPCR.【Keywords ...
2021/8/16 9:53:15
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extractionDNAfromancientteethandtheinfluencesofamplifyingconditions【Abstract,Mg2+helpstoincreasetheactivityofTaqEandavoidtheamplifyingerrors.ConclusionAncientDNAextractionkitisaeffectivewaytoextractancientDNA,ofMg2+haveinfluencesontheresultsofPCR.【Keywords ...
2021/8/16 9:53:15
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下游增强子(增强子2)位于内含子1(+1,788~+2,318)中,紧邻CA双核苷酸简单重复序列(CAsimplesequencerepeat,CA—SSR1),FR等[3]报道了69例非小细胞肺癌(non—smallcelllungcancer,NSCLC)病人:EGFR蛋白表达阴性或低的病例中,有35例(51%)为二倍体,33例(48%)为三倍体,1例为多倍体,尽管EGFR基因多态性影响EGFR的表达也得到肯定,但为了更加精确的理解EGFR的表达,还需要进一步的实验证实是否还有别的EGFR基因多态性存在,并分析其与EGFR表达的关系 ...
2021/8/13 3:02:28
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下游增强子(增强子2)位于内含子1(+1,788~+2,318)中,紧邻CA双核苷酸简单重复序列(CAsimplesequencerepeat,CA—SSR1),FR等[3]报道了69例非小细胞肺癌(non—smallcelllungcancer,NSCLC)病人:EGFR蛋白表达阴性或低的病例中,有35例(51%)为二倍体,33例(48%)为三倍体,1例为多倍体,尽管EGFR基因多态性影响EGFR的表达也得到肯定,但为了更加精确的理解EGFR的表达,还需要进一步的实验证实是否还有别的EGFR基因多态性存在,并分析其与EGFR表达的关系 ...
2021/8/13 3:02:28
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Kanazin等(1996)利用R基因产物的保守结构域设计引物对植物DNA进行扩增,发现扩增产物与R基因同源性较高,将其称之为resistancegeneanalog(RGA),中译为抗病基因同源序列,目前克隆RGA有两种方法:PCR扩增得到RGA,数据库检索法预测RGA(张礼凤等,2009;任鄄胜,2008;尚世界,2009;Rossietal.,2003),向旭等(2005)对从柑桔与枳属间杂种的基因组DNA所获得的RLK—RGA,设计简并引物,对柑桔抗溃疡病材料和感病材料进行分析,获得了一个与柑橘溃疡病相关的特异性更强的抗性标记—19h16/Dde1标记位点,可用于分子标记辅助育种 ...
2021/9/7 6:42:03
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促进产业型,企业是营改增直接受益人而企业又是微观济主体因营改增对上海济型发展、创新增长方式方面贡献首先体现微观方面,猜感兴趣07年营改增试围关全面推开营改增试义3浅析营改增政策对业企业财管理影响论浅谈营业税改征增值税对企业变化及影响5浅谈我国营改增企业税收征收管理论6营改增税收筹划论707营改增对企业影响</ ...
2021/9/29 15:08:31
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s,68℃5min,扩增5个循环,然后94℃15s,68℃5min(每个循环延长10s),扩增20个循环,最后72℃延伸10min,均可获得HCV1b型5′端5223bp半基因组的阳性结果,TaKaLaLATaqTM扩增效果最好,Cvirus,HCV)基因组是一单股正链RNA,全长大约由9600核苷酸组成,是引起丙型肝炎的病原体.HCV基因组具有明显的异质性,根据其核苷酸序列的差异,分为6个主要的基因型,50多个亚型及不同的HCV分离株[1].同时,HCV以一群不同的但密切相关的变异株存在于患者体内,称为准种(quasispecies).传统的HCV全基因组质粒的构建通常采用短片段拼接而成[2],国内有报道采用4个片段扩增构建全长质粒[3],最近国外文献报道的全长基因组质粒的构建也多是采用3个片段拼接而成[4].这种短片段的拼接很容易造成准种间的不同变异株的不真实连接,使所构建的HCV全基因组并不是实际存在的基因,限制了HCV分子水平的研究.长链扩增可以最大限度地避免这种准种间不真实连接,使所构建的HCV全基因组质粒更为真实可靠.我们选取中国HCV主要流行株1b型[5]为研究对象,建立了HCV长链RTPCR扩增方法,并获得了HCV1b型5′端5223bp半基因组,为下一步构建病毒全基因组质粒及中国人HCV复制子奠定了基础.
,1.2.5长链PCR反应选用PlatinumTaqDNApolymeraseHighFidelity,TaKaLaLATaqTM,KODDash三种Taq酶进行长链巢式PCR扩增,按说明书配置反应体系.采用两种循环条件,分别为①94℃变性2min后,94℃30s,62℃30s,72℃4.5min,30个循环 ...
2021/8/15 6:13:05
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检测临床分离猪源致病性沙门菌四环素的耐药基因,确定沙门菌四环素耐药基因类型,Δ(lacZ)M15proA+B+zzf∶∶Tn10(TetR)/fhuA2supEthiΔ(lacproAB)Δ(hsdMSmcrB)5(rk—mk—McrBC—)]为四环素耐药基因tetB的阳性参考菌,④其它:红霉素(EM),氯霉素(CP),多西环素(DOXY),多黏菌素B(PLMB),利福平(RFP),四环素(TC),复方磺胺甲口恶唑(TMP/SMZ)等17种抗菌药 ...
2021/8/15 1:19:45
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TCCACCTGAGGAGACGGTGACCAGGGTTCC3’HuVH5aBACK:5’GAGGTGCAGCTGTTGCAGTCTGC3’扩增VLlinker的引物对:HuJк2FOR:5’ACGTTTGATCTCCAGCTTGGTC,PCR反应B①按下列组成配制PCR反应液:重链可变区和轻链可变区分别进行:5×PCRBuffer10μl,灭菌蒸馏水27.75μl,Backprimer1μl,Forwardprimer1μl,TaKaRaExTaqTMHS0.25μl,总量40μl,min1个循环,94℃30s,55℃30s,72℃1min,30个循环 ...
2021/8/14 5:36:46
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s,68℃5min,扩增5个循环,然后94℃15s,68℃5min(每个循环延长10s),扩增20个循环,最后72℃延伸10min,均可获得HCV1b型5′端5223bp半基因组的阳性结果,TaKaLaLATaqTM扩增效果最好,Cvirus,HCV)基因组是一单股正链RNA,全长大约由9600核苷酸组成,是引起丙型肝炎的病原体.HCV基因组具有明显的异质性,根据其核苷酸序列的差异,分为6个主要的基因型,50多个亚型及不同的HCV分离株[1].同时,HCV以一群不同的但密切相关的变异株存在于患者体内,称为准种(quasispecies).传统的HCV全基因组质粒的构建通常采用短片段拼接而成[2],国内有报道采用4个片段扩增构建全长质粒[3],最近国外文献报道的全长基因组质粒的构建也多是采用3个片段拼接而成[4].这种短片段的拼接很容易造成准种间的不同变异株的不真实连接,使所构建的HCV全基因组并不是实际存在的基因,限制了HCV分子水平的研究.长链扩增可以最大限度地避免这种准种间不真实连接,使所构建的HCV全基因组质粒更为真实可靠.我们选取中国HCV主要流行株1b型[5]为研究对象,建立了HCV长链RTPCR扩增方法,并获得了HCV1b型5′端5223bp半基因组,为下一步构建病毒全基因组质粒及中国人HCV复制子奠定了基础.
,1.2.5长链PCR反应选用PlatinumTaqDNApolymeraseHighFidelity,TaKaLaLATaqTM,KODDash三种Taq酶进行长链巢式PCR扩增,按说明书配置反应体系.采用两种循环条件,分别为①94℃变性2min后,94℃30s,62℃30s,72℃4.5min,30个循环 ...
2021/8/15 6:13:05
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TCCACCTGAGGAGACGGTGACCAGGGTTCC3’HuVH5aBACK:5’GAGGTGCAGCTGTTGCAGTCTGC3’扩增VLlinker的引物对:HuJк2FOR:5’ACGTTTGATCTCCAGCTTGGTC,PCR反应B①按下列组成配制PCR反应液:重链可变区和轻链可变区分别进行:5×PCRBuffer10μl,灭菌蒸馏水27.75μl,Backprimer1μl,Forwardprimer1μl,TaKaRaExTaqTMHS0.25μl,总量40μl,min1个循环,94℃30s,55℃30s,72℃1min,30个循环 ...
2021/8/14 5:36:46
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88888888 ...
2021/8/18 4:31:35
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2021/8/18 4:31:35
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筛选到OPG—03、OPG—06、OPG—07和OPG—13共4条随机引物具有鉴别作用,每一菌株均可扩增出4~10条DNA片段,大多数片段在100~2000bp之间,共扩增出42条RAPD条带,其中共有条带7条,多态性条带35条,多态性为833%,结果显示,随机引物OPG—01、OPG—02、OPG—04、OPG—10、OPG—19没有扩增出任何条带,随机引物OPG—05、OPG—08、OPG—09、OPG—11、OPG—12、OPG—14~OPG—18、OPG—20~OPG—22能够扩增出条带,但扩增的指纹图谱中没有多态性条带 ...
2021/8/22 14:06:36
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组织培养取消毒后的金钗石斛野生苗茎尖作为外植体依次分别接种在培养基①MS+0.5mg/L6—BA+0.1mg/LNAA+2.0%蔗糖,②MS+0.2mg/L6—BA+0.3mg/LIBA+0.05mg/LNAA+2.0%蔗糖和③1/2MS+0.1~0.5mg/LIBA+0.5~2.0mg/LNAA(含椰汁和香蕉提取物)上进行诱导、增殖和生根培养,μl反应体系,其中模板DNA70~80ng,2.5μl25mmol/LMgCl2,2μl10×Buffer,2μl2.5mmol/LdNTPs(总的dNTP为10mmol/L),0.5μl5U/μlTaq酶,3μl5μmol/L选择性引物,1μl5μmol/L反向引物(北京鼎国合成),DALP—PCR的建立和引物组合的筛选根据文献资料[6,7],通过对DALP—PCR反应体系中引物浓度、上下游引物量的比例和不同的退火温度等几个条件的摸索,得到了扩增金钗石斛基因组DNA最佳DALP—PCR反应体系和扩增程序,分别为:采用20μl反应体系,其中模板DNA70~80ng,2.5μl25mmol/LMgCl2,2μl10×Buffer,2μl2.5mmol/LdNTPs(总的dNTP为10mmol/L),0.5μl5U/μlTaq酶,3μl5μmol/L选择性引物,1μl5μmol/L反向引物;扩增程序95℃预变性5min,然后先进行12个循环:94℃变性30s,55℃复性30s,72℃延伸1min,该循环复性温度为0.5℃梯度降温;然后再进行18个循环:94℃变性30s,50℃复性30s,72℃延伸1min;最后,72℃延伸10min ...
2021/8/19 7:05:35
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筛选到OPG—03、OPG—06、OPG—07和OPG—13共4条随机引物具有鉴别作用,每一菌株均可扩增出4~10条DNA片段,大多数片段在100~2000bp之间,共扩增出42条RAPD条带,其中共有条带7条,多态性条带35条,多态性为833%,结果显示,随机引物OPG—01、OPG—02、OPG—04、OPG—10、OPG—19没有扩增出任何条带,随机引物OPG—05、OPG—08、OPG—09、OPG—11、OPG—12、OPG—14~OPG—18、OPG—20~OPG—22能够扩增出条带,但扩增的指纹图谱中没有多态性条带 ...
2021/8/22 14:06:36
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偶合率()、体识别能力()、多态信息含量()、非父排除率()、杂合()、rbrg平衡检验结见表,338、39、6036这6R基因座合Gll标准非常适合四川汉族地区法医学亲权鉴定、体识别和数据库应用,,997,88()33 ...
2021/12/6 0:29:20
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张云霞,陈照清,应用等位基因特异性PCR技术,对334例海南地区汉族脑梗死患者和193例海南地区汉族正常对照组中AGT基因T174M、M235T多态位点进行检测,统计各组基因型频率及各组等位基因频率 ...
2021/8/15 19:12:26
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张云霞,陈照清,应用等位基因特异性PCR技术,对334例海南地区汉族脑梗死患者和193例海南地区汉族正常对照组中AGT基因T174M、M235T多态位点进行检测,统计各组基因型频率及各组等位基因频率 ...
2021/8/15 19:12:26
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Bvirus,HBV)在其负链上含4个部分重叠的开放读码框架(openreadingframe,ORF)即前S/S区、前C/C区、P区和X区,分别编码7种性质不同的蛋白如HBcAg,HBeAg,HBsAg等.有研究表明,X区编码的HBxAg与肝细胞肝癌(HCC)的形成密切相关[1].研究证实,在XORF的上游还存在一个新的ORF即前XORF[2],而关于其的功能研究尚不多见,是否具有类似功能尚不确定,我们对前XORF功能进行初步探讨.
,以35例HCC患者中明确HBV基因分型的33例患者HBVDNA溶液为模板,根据前X上游引物Px1,下游引物为Px2,扩增前X区[4].Px1下游第3133nt处为前X区起始密码子ATG,Px2上游3032nt处为X区起始密码子ATG,扩增的靶区域全长231nt,其中前X区全长为168nt.将PCR产物回收并连接至PMD18T载体,将连接好的重组体转入感受态细胞,经氨苄青霉素(Amp)和Xgal蓝白斑法初步筛选阳性菌落,进一步提取质粒采用PCR法鉴定.对经过鉴定的成功导入前X基因的菌落送测序.
,2.1HBV基因型应用该基因型分型方法,A组PCR产物电泳时A基因型为68bp,B基因型为281bp,C基因型为122bp(图1);B组电泳时D基因型为119bp,E基因型为167bp,F基因型为67bp.本组的35例患者中,B基因型1例,C基因型24例,B/C混合基因型8例,未定型者2例,未见其他基因型. ...
2021/8/21 17:38:05
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13主要试剂与仪器酵母基因组DNA提取试剂盒(离心柱法)、质粒DNA纯化试剂盒(ConcertRapidPlasmidMiniprepSystem)、DNA片段回收试剂盒(ConcertRapidGelExtractionSystem)均购自Omega公司;聚合酶链反应(PCR)扩增试剂盒(OneShotLAPCRMix)均购自Takara公司;GL20GⅡ型高速冷冻离心机(上海);5332Mastercyclerpersonal型PCR仪(德国);BGsubMINI迷你型水平电泳仪(北京);MiniSpin5452个人型高速离心机(德国);260010MicrocoolerⅡ型制冷仪(美国),扩增以提取的酵母DNA为模板,SSYPri5、SSYPri3为上下引物,用Takara公司的PCR扩增试剂盒(OneShotLAPCRMix)扩增,扩增条件为:94℃、1min→94℃、30s,53℃、1min,72℃、3min,30循环→72℃、10min→4℃,PCR扩增采用Takara公司的Tf1酶,反应条件为:94℃、1min→94℃、30s,57℃、1min,72℃、5min,30循环→72℃、10min→4℃ ...
2021/8/22 17:27:16
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作者:盛秋,李芬,于学文,李琦,韩蓁,李学成,任永惠,探讨秦巴山区孕妇妊娠期人巨细胞病毒(HCMV)宫内感染与HCMVUL54、UL97基因突变的关系,228例配对血中,孕妇血清HCMVDNA(+)19例,阳性率为8.33% ...
2021/8/16 23:11:34
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PCR,TDPCR),最初是用于克服PCR中的假引发,作为一种行之有效的DNA体外扩增方法,在许多普通PCR无产物的基因扩增,都采用TDPCR,因此我们在VHL基因突变筛查中使用了普通PCR和TDPCR两种方法,并同时使用了TaKaRaTaqHs进行了实验,期望能够得到良好的实验结果及建立TDPCR方法,参考文献[2]所建议的TDPCR引物设计原则[从高于融解温度(Tm)值10℃,每次降低1℃(最终降至Tm值)]并做适当修改,对3对引物的Tm值进行预测,并根据全部退火温度值设定PCR循环程序中的温度变化范围,为照顾到3个片段,退火温度在最高65℃最低55℃的范围内,比较温度梯度以每降低1℃循环2次、最后在60~72℃再循环15次等一系列程序的扩增效果,循环参数为95℃预变性5min,95℃变性45s,第1、2和第3外显子的退火温度分别为63℃、59℃、57℃,退火45s,72℃延伸45s,30个循环后,72℃延伸10min ...
2021/8/11 17:15:26
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Bvirus,HBV)在其负链上含4个部分重叠的开放读码框架(openreadingframe,ORF)即前S/S区、前C/C区、P区和X区,分别编码7种性质不同的蛋白如HBcAg,HBeAg,HBsAg等.有研究表明,X区编码的HBxAg与肝细胞肝癌(HCC)的形成密切相关[1].研究证实,在XORF的上游还存在一个新的ORF即前XORF[2],而关于其的功能研究尚不多见,是否具有类似功能尚不确定,我们对前XORF功能进行初步探讨.论文网,以35例HCC患者中明确HBV基因分型的33例患者HBVDNA溶液为模板,根据前X上游引物Px1,下游引物为Px2,扩增前X区[4].Px1下游第3133nt处为前X区起始密码子ATG,Px2上游3032nt处为X区起始密码子ATG,扩增的靶区域全长231nt,其中前X区全长为168nt.将PCR产物回收并连接至PMD18T载体,将连接好的重组体转入感受态细胞,经氨苄青霉素(Amp)和Xgal蓝白斑法初步筛选阳性菌落,进一步提取质粒采用PCR法鉴定.对经过鉴定的成功导入前X基因的菌落送测序.
,2.1HBV基因型应用该基因型分型方法,A组PCR产物电泳时A基因型为68bp,B基因型为281bp,C基因型为122bp(图1);B组电泳时D基因型为119bp,E基因型为167bp,F基因型为67bp.本组的35例患者中,B基因型1例,C基因型24例,B/C混合基因型8例,未定型者2例,未见其他基因型.论文网 ...
2021/8/17 12:11:46
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Bvirus,HBV)在其负链上含4个部分重叠的开放读码框架(openreadingframe,ORF)即前S/S区、前C/C区、P区和X区,分别编码7种性质不同的蛋白如HBcAg,HBeAg,HBsAg等.有研究表明,X区编码的HBxAg与肝细胞肝癌(HCC)的形成密切相关[1].研究证实,在XORF的上游还存在一个新的ORF即前XORF[2],而关于其的功能研究尚不多见,是否具有类似功能尚不确定,我们对前XORF功能进行初步探讨.论文网,以35例HCC患者中明确HBV基因分型的33例患者HBVDNA溶液为模板,根据前X上游引物Px1,下游引物为Px2,扩增前X区[4].Px1下游第3133nt处为前X区起始密码子ATG,Px2上游3032nt处为X区起始密码子ATG,扩增的靶区域全长231nt,其中前X区全长为168nt.将PCR产物回收并连接至PMD18T载体,将连接好的重组体转入感受态细胞,经氨苄青霉素(Amp)和Xgal蓝白斑法初步筛选阳性菌落,进一步提取质粒采用PCR法鉴定.对经过鉴定的成功导入前X基因的菌落送测序.
,2.1HBV基因型应用该基因型分型方法,A组PCR产物电泳时A基因型为68bp,B基因型为281bp,C基因型为122bp(图1);B组电泳时D基因型为119bp,E基因型为167bp,F基因型为67bp.本组的35例患者中,B基因型1例,C基因型24例,B/C混合基因型8例,未定型者2例,未见其他基因型.论文网 ...
2021/8/17 12:11:46
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PCR,TDPCR),最初是用于克服PCR中的假引发,作为一种行之有效的DNA体外扩增方法,在许多普通PCR无产物的基因扩增,都采用TDPCR,因此我们在VHL基因突变筛查中使用了普通PCR和TDPCR两种方法,并同时使用了TaKaRaTaqHs进行了实验,期望能够得到良好的实验结果及建立TDPCR方法,参考文献[2]所建议的TDPCR引物设计原则[从高于融解温度(Tm)值10℃,每次降低1℃(最终降至Tm值)]并做适当修改,对3对引物的Tm值进行预测,并根据全部退火温度值设定PCR循环程序中的温度变化范围,为照顾到3个片段,退火温度在最高65℃最低55℃的范围内,比较温度梯度以每降低1℃循环2次、最后在60~72℃再循环15次等一系列程序的扩增效果,循环参数为95℃预变性5min,95℃变性45s,第1、2和第3外显子的退火温度分别为63℃、59℃、57℃,退火45s,72℃延伸45s,30个循环后,72℃延伸10min ...
2021/8/11 17:15:26
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其中,绿茎、小叶、少分枝和紫色花类型与普通类型各自聚为一类,绿茎、大叶、少分枝和淡紫色花类型与紫红茎、大叶、少分枝和紫色花类型聚为一类,绿茎、小叶、多分枝和淡紫色花类型,绿茎、大叶、多分枝和紫色花类型,绿茎、小叶、多分枝和淡紫色花类型与紫红茎、小叶、多分枝和紫色花类型聚为一类,本文采用扩增片段长度多态性(amplifiedfragmentlengthpolymorphism,AFLP)技术,研究人工栽培群体不同形态变异类型黄芩在分子水平上的遗传变异,旨在揭示黄芩群体内的遗传多样性以及形态变异类型间的亲缘关系,为今后开展资源保存、种质鉴定奠定基础,同时有助于开展分子标记辅助选择育种研究,morphologicalvariationtypesofScutellariabaicalensisGeorgi ...
2021/8/24 10:39:05
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增上质检、包装设备和恒温库房使其业迅速做,四、济及社会效益分析项目实施必将产生较济效益和社会效益,六、尽事宜甲乙双方协商 ...
2021/11/25 11:06:10
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/sixianghuibao/(一)实施业扩报装精细化管理的重要性《国家电网公司业扩报装工作管理规定》第三条明确:业扩报装工作坚持一口对外、便捷高效、三不指定、办事公开的原则,因此,必须加强业扩报装精细化管理,通过集约化、精细化管理和技术进步,以营销技术支持系统对业扩报装实行全过程闭环管理,实现业扩报装工作程序标准化、业务流程规范化,简化用电手续,努力缩短业扩报装周期,真正提高供电优质服务水平,(二)业扩报装精细化管理目标加强业扩报装工作程序标准化、业务流程规范化执行,提高服务质量和服务效率,减少客户上门次数,着力缩短业扩报装通电时间,早送一分钟、多供一度电,在服务地方经济发展的同时努力多供电量,最终实现供用电双方双赢的管理目标 ...
2021/8/22 1:24:44
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扩权强县工作二次督情况调研报告了贯彻落实全省扩权强县座谈会精神按照冀政办传[0]9件要由省发展改革委、省财政厅、省建设厅、等十省直部门组成五扩权强县工作督组0年8月6日6日对各设区市、各扩权县(市)扩权强县工作进行了督导检分别与设区市政府及扩权县(市)政府及其主要相关部门进行了座谈听取了工作汇报,了贯彻落实全省扩权强县座谈会精神按照冀政办传9件要由省发展改革委、省财政厅、省建设厅、等十省直部门组成五扩权强县工作督组0年8月6日—6日对各设区市、各扩权县(市)扩权强县工作进行了督导检分别与设区市政府及扩权县(市)政府及其主要相关部门进行了座谈听取了工作汇报扩权强县工作二次督情况调研报告,五关扩权强县工作督情况调研报告关扩权强县工作督情况调研报告了贯彻落实全省扩权强县座谈会精神按照冀政办传[0]9件要由省发展改革委、省财政厅、省建设厅、等十省直部门组成五扩权强县工作督组0年8月6日—6日对各设区市、各扩权县(市)扩权强县工作进行了督导检分别与设区市政府及扩权县(市)政府及其主要相关部门进行了座谈听取了工作汇报 ...
2021/7/20 11:41:30
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Words]proliferatingcellnuclearantigenantisenseoligodeoxynucleotide;hematopoieticprecursorcell;expansioninvitro,本研究旨在不同时间段通过反义核酸技术调控PCNA在脐血CD34+细胞中的表达,探索PCNA_反义寡脱氧核苷酸(Antisenseoligodeoxynucleotide,ASODN)调节脐血CD34+细胞体外扩增和分化的时间效应,寻找PCNA_ASODN作用的最佳时间点,使脐血CD34+细胞在体外扩增的同时能延缓其分化进程,以期达到更好地扩增效果,利用miniMACS磁珠分选系统可以得到高纯度的CD34+细胞,流式细胞仪检测达(73.9±2.79)%,其中CD34+CD38-细胞比例为(10.3±0.73)% ...
2021/8/12 4:23:56
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用亚洲带绦虫和牛带绦虫线粒体cox1基因片段的特异性引物以及带绦虫cox1基因片段的通用引物,对贵州省都匀地区和从江地区的带绦虫虫卵和节片DNA进行常规PCR扩增,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测和核酸序列测定,并用NCBIBlast对扩增产物的核酸序列与NCBI数据库中带绦虫的cox1基因进行比对,words]Taenia;mitochondriacox1gene;polymerasechainreaction猪带绦虫、牛带绦虫和亚洲带绦虫是寄生人体的3种带绦虫,其中亚洲带绦虫与牛带绦虫的成虫特征几乎完全一致,依靠形态特征难以鉴别,贵州省存在牛带绦虫和亚洲牛带绦虫的流行[2],为验证Yamasaki所用引物的适用性,建立亚洲带绦虫和牛带绦虫快速的鉴别方法,2008年6月~11月,采用亚洲带绦虫线粒体cox1基因片段的特异性引物和带绦虫cox1基因片段的通用引物,对采自贵州省都匀地区和从江地区的带绦虫进行了常规PCR扩增和核酸序列测定,报告如下 ...
2021/8/10 6:50:36
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Words]proliferatingcellnuclearantigenantisenseoligodeoxynucleotide;hematopoieticprecursorcell;expansioninvitro,本研究旨在不同时间段通过反义核酸技术调控PCNA在脐血CD34+细胞中的表达,探索PCNA_反义寡脱氧核苷酸(Antisenseoligodeoxynucleotide,ASODN)调节脐血CD34+细胞体外扩增和分化的时间效应,寻找PCNA_ASODN作用的最佳时间点,使脐血CD34+细胞在体外扩增的同时能延缓其分化进程,以期达到更好地扩增效果,利用miniMACS磁珠分选系统可以得到高纯度的CD34+细胞,流式细胞仪检测达(73.9±2.79)%,其中CD34+CD38-细胞比例为(10.3±0.73)% ...
2021/8/12 4:23:56
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用亚洲带绦虫和牛带绦虫线粒体cox1基因片段的特异性引物以及带绦虫cox1基因片段的通用引物,对贵州省都匀地区和从江地区的带绦虫虫卵和节片DNA进行常规PCR扩增,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测和核酸序列测定,并用NCBIBlast对扩增产物的核酸序列与NCBI数据库中带绦虫的cox1基因进行比对,words]Taenia;mitochondriacox1gene;polymerasechainreaction猪带绦虫、牛带绦虫和亚洲带绦虫是寄生人体的3种带绦虫,其中亚洲带绦虫与牛带绦虫的成虫特征几乎完全一致,依靠形态特征难以鉴别,贵州省存在牛带绦虫和亚洲牛带绦虫的流行[2],为验证Yamasaki所用引物的适用性,建立亚洲带绦虫和牛带绦虫快速的鉴别方法,2008年6月~11月,采用亚洲带绦虫线粒体cox1基因片段的特异性引物和带绦虫cox1基因片段的通用引物,对采自贵州省都匀地区和从江地区的带绦虫进行了常规PCR扩增和核酸序列测定,报告如下 ...
2021/8/10 6:50:36
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检测与分析细胞壁缺陷结核分枝杆菌的耐药性相关基因,探讨细胞壁缺陷结核分枝杆菌耐药性的基因基础,上游引物5′—AGCTCGTATGGCACCGGAAC—3′,下游引物5′—TTGACCTCCCACCCGACTTG—3′,扩增katG基因904、1523bp(620bp),扩增片段为katG基因突变热点区,包括315、321、381、406、409、418、441、456、463和476位,无锡市遗传克隆技术研究所提供,批号050613,embB基因外套引物的碱基序列为E15′—CGGCCTGCATCGTCGCCGGG—3′、E25′—GATCCACAGACTGGCGTCGCTG—3′,内套引物E35′—CGGCATGCGCCGGCTGATTCC—3′、E45′—TCATCAGCGCCAGCAGGTTGTAA—3′ ...
2021/8/25 4:17:25
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88888888 ...
2021/8/11 6:38:36
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2021/8/11 6:38:36
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二发展和改革委员会关扩权强县工作调研报告省政府了贯彻落实全省三次扩权强县座谈会精神按照冀政办传9件要由省发展改革委、省财政厅、省建设厅、省人事厅、省卫生厅等十省直部门组成五扩权强县工作督组0年8月6日—6日对扩权强县工作进行了督导检发展和改革委员会关扩权强县工作调研报告,五扩权强县工作二次督情况调研报告了贯彻落实全省扩权强县座谈会精神按照冀政办传[0]9件要由省发展改革委、省财政厅、省建设厅、等十省直部门组成五扩权强县工作督组0年8月6日6日对各设区市、各扩权县(市)扩权强县工作进行了督导检分别与设区市政府及扩权县(市)政府及其主要相关部门进行了座谈听取了工作汇报,我们向你推荐更多精彩容扩权强县工作二次督情况调研报告扩权强县工作系统督情况调研报告关扩权强县工作督情况调研报告扩权强县工作系统督情况调研报告扩权强县改革工作总结</ ...
2021/10/7 14:52:21
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本文旨在探讨选取GroEL基因片段,运用PCR—RFLP和PCR—SSCP技术,进行大肠杆菌不同血清型别的鉴定,以期为临床快速鉴别诊断及流行病学调查提供方法依据,引物序列是:P上游5’AGTTACCCT(CT)GG(TC)CC(AG)AAAG3’(对应于大肠杆菌GroEL基因84—103位核苷酸),20μl酶切反应体系含10×酶切缓冲液2μl,1mg/mlBSA2μl,PCR纯化产物3μl(1μg),限制性内切酶1μl(3~4U),补足ddH2O至20μl,在37℃酶切2.5h ...
2021/8/15 22:05:36
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本文旨在探讨选取GroEL基因片段,运用PCR—RFLP和PCR—SSCP技术,进行大肠杆菌不同血清型别的鉴定,以期为临床快速鉴别诊断及流行病学调查提供方法依据,引物序列是:P上游5’AGTTACCCT(CT)GG(TC)CC(AG)AAAG3’(对应于大肠杆菌GroEL基因84—103位核苷酸),20μl酶切反应体系含10×酶切缓冲液2μl,1mg/mlBSA2μl,PCR纯化产物3μl(1μg),限制性内切酶1μl(3~4U),补足ddH2O至20μl,在37℃酶切2.5h ...
2021/8/15 22:05:36
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1.2标本的收集蜱标本系1997~1998年间从林区草丛采集的游离蜱及从家畜和野生动物宿主(山麂、山羊、野猪、野兔、狗、牛、狐狸等)体表捉到的寄生蜱,共计755只,经鉴定,按种类和宿主分组检测,1.4.2野鼠脏器及血块标本以无菌操作取野鼠脾脏3mm见方小块,用研磨器研碎(冻融的血取100μl),加蛋白酶K消化液(0.1mMTris—ClpH8.0,0.5μmEDTApH8.0,0.5%SDS,100μg/ml蛋白酶K)300μl,55℃水浴3h,中间多次振荡,至清亮无可见组织块,抽提及以后步骤同蜱标本处理,1.5PCR扩增第一轮扩增,取上述DNA模板3μl,10×PCR缓冲液3μl,引物(HE1和PER2)浓度为0.1μmol/L,dNTPs50μmol/L,总反应体积为30μl ...
2021/8/16 21:20:06
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1.2标本的收集蜱标本系1997~1998年间从林区草丛采集的游离蜱及从家畜和野生动物宿主(山麂、山羊、野猪、野兔、狗、牛、狐狸等)体表捉到的寄生蜱,共计755只,经鉴定,按种类和宿主分组检测,1.4.2野鼠脏器及血块标本以无菌操作取野鼠脾脏3mm见方小块,用研磨器研碎(冻融的血取100μl),加蛋白酶K消化液(0.1mMTris—ClpH8.0,0.5μmEDTApH8.0,0.5%SDS,100μg/ml蛋白酶K)300μl,55℃水浴3h,中间多次振荡,至清亮无可见组织块,抽提及以后步骤同蜱标本处理,1.5PCR扩增第一轮扩增,取上述DNA模板3μl,10×PCR缓冲液3μl,引物(HE1和PER2)浓度为0.1μmol/L,dNTPs50μmol/L,总反应体积为30μl ...
2021/8/16 21:20:06
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营改增之后,电信由原来3%的税率缴纳营业税更改为缴纳增值税,同时电信的增值业务实行6%税率,电信的基础业务实行11%税率,这在一定程度上对电信行业造成了很大的冲击,改善现状是电信企业首要解决的问题,在管理成本方面,在营改增之后,开具专用发票的过程相当复杂,审核计算的工作量增加,对电信的运营管理提高了要求,加大了难度,特别是在开具专用发票的环节,更会加大电信的成本费用,虽然电信企业在营改增试点前期可能会出现税收负担加重的情况,但是从长远来看,在电信企业积极应对下,不断的完善自身,及时调整战略,改变经营模式,优化管理制度,加上国家营改增的扩围,全面营改增时代的到来,在未来,电信企业一定会改变现状,享受营改增所带来的税制改革红利 ...
2021/8/5 19:41:03
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营改增之后,电信由原来3%的税率缴纳营业税更改为缴纳增值税,同时电信的增值业务实行6%税率,电信的基础业务实行11%税率,这在一定程度上对电信行业造成了很大的冲击,改善现状是电信企业首要解决的问题,在管理成本方面,在营改增之后,开具专用发票的过程相当复杂,审核计算的工作量增加,对电信的运营管理提高了要求,加大了难度,特别是在开具专用发票的环节,更会加大电信的成本费用,虽然电信企业在营改增试点前期可能会出现税收负担加重的情况,但是从长远来看,在电信企业积极应对下,不断的完善自身,及时调整战略,改变经营模式,优化管理制度,加上国家营改增的扩围,全面营改增时代的到来,在未来,电信企业一定会改变现状,享受营改增所带来的税制改革红利 ...
2021/8/5 19:41:03
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如果形成气溶胶污染而扩散,则可引起整个PCR实验室的污染,处理起来非常麻烦,严重的甚至要关闭PCR实验室,实验室分为试剂准备区、标本制备区、扩增区三个区,试剂存放在试剂准备区,标本是在标本制备区处理,处理完的标本置于扩增区上机扩增,将HBV标本拿到其他正规的PCR实验室检测,结果标本中阴、阳性结果都有,阴性对照是阴性,阳性对照是阳性,说明标本没有被污染 ...
2021/8/10 9:56:06
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作者:黄毓甘宝文周建生薜小霞周吉成,MTS1/P16基因,PCR技术对MTS1/P16基因在急性白血病中纯合缺失进行检测,以了解MTS1/P16基因缺失与急性白血病的关系 ...
2021/8/15 20:47:35
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如果形成气溶胶污染而扩散,则可引起整个PCR实验室的污染,处理起来非常麻烦,严重的甚至要关闭PCR实验室,实验室分为试剂准备区、标本制备区、扩增区三个区,试剂存放在试剂准备区,标本是在标本制备区处理,处理完的标本置于扩增区上机扩增,将HBV标本拿到其他正规的PCR实验室检测,结果标本中阴、阳性结果都有,阴性对照是阴性,阳性对照是阳性,说明标本没有被污染 ...
2021/8/10 9:56:06
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探讨丙型肝炎病毒(HCV)抗体检测酶联免疫吸附法出现假阳性的原因分析和解决方法,酶联免疫吸附试验检测HCV抗体由于有许多影响因素可导致结果假阳性,对怀疑假阳性的标本应检测丙型肝炎病毒RNA来确诊,对酶联免疫吸附法检测HCV抗体弱阳性的标本中3S/CO1的16份标本,再用核酸扩增荧光基因分析法检测HCV—RNA ...
2021/8/9 10:29:15
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作者:黄毓甘宝文周建生薜小霞周吉成,MTS1/P16基因,PCR技术对MTS1/P16基因在急性白血病中纯合缺失进行检测,以了解MTS1/P16基因缺失与急性白血病的关系 ...
2021/8/15 20:47:35
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探讨丙型肝炎病毒(HCV)抗体检测酶联免疫吸附法出现假阳性的原因分析和解决方法,酶联免疫吸附试验检测HCV抗体由于有许多影响因素可导致结果假阳性,对怀疑假阳性的标本应检测丙型肝炎病毒RNA来确诊,对酶联免疫吸附法检测HCV抗体弱阳性的标本中3S/CO1的16份标本,再用核酸扩增荧光基因分析法检测HCV—RNA ...
2021/8/9 10:29:15
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应用荧光PCR扩增病毒核酸免疫技术定量检测6018例血清标本的HBVDNA含量,1.1.1仪器Bio—RadiCycler多荧光频道可用于乙肝病毒DNA检测,我院就是应用荧光定量PCR技术开展对乙肝病人及疑是HBV—DNA感染者进行检测 ...
2021/11/24 21:48:40
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第一篇:发展和改革委员会关于扩权强县工作的调研报告第二篇:发展和改革委员会关于扩权强县工作的调研报告第三篇:关于我省扩权强县改革试点情况的调研报告第四篇:2014年市政府扩权强县试点改革工作情况报告第五篇:扩权强县工作第二次督查情况调研报告更多相关范文正文第一篇:发展和改革委员会关于扩权强县工作的调研报告,结合制定十一五规划和产业专项规划,对符合全省经济发展战略的扩权县(市)的特色主导产业、重点项目优先列入全省发展规划;对扩权县(市)项目融资难问题,尽快厂家解决办法;对项目用地问题,要加强调研,提出可行解决办法;对机构改革问题,要加强督导,加快扩权县(市)机构改革步伐,促进扩权县(市)机构改革尽快到位,扩权强县政策的实施,使扩权县(市)抓机遇、求发展的积极性空前高涨,谋划未来、加快发展形成共识,凝聚合力得到提高;通过省直及市直各部门的培训和传、帮、带,扩权县(市)的同志初步掌握了新的办事规则和运行程序,业务工作从不熟悉到相对熟练,综合素质有了一定程度的提高;扩权县(市)把扩权强县工作与机构改革工作相结合,对各部门机构职能进行了调整理顺,扎实开展双提活动,全面推行一站式办公和首办负责制,工作效率大大提高 ...
2021/4/20 7:19:21
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、我国对外贸易及贸易环境几变化,二、实施以“利共赢”核心对外贸易发展战略,首先对外贸易超速发展与对外贸易顺差迅速扩不利国济健康发展 ...
2021/10/3 16:10:40
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结论:以TPO/FL/IL—6/IL—3因子组合为体外诱导扩增巨核祖细胞的最佳组合,动员外周血的巨核祖细胞体外诱导扩增以培养第10天为宜,ofMegakaryocyticProgenitorsfromMobilizedHumanPeripheralBlood,甲基纤维素半固体培养体系包括:0.9%甲基纤维素、1%牛血清白蛋白(BSA),10—4mol/L2—巯基乙醇、20%胎牛血清(FCS)及TP0(20ng/ml),IL—3(10ng/ml)、IL—6(10ng/ml),SCF(50ng/ml),加上IMDM,使总量达1ml ...
2021/8/11 12:12:46
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结论:以TPO/FL/IL—6/IL—3因子组合为体外诱导扩增巨核祖细胞的最佳组合,动员外周血的巨核祖细胞体外诱导扩增以培养第10天为宜,ofMegakaryocyticProgenitorsfromMobilizedHumanPeripheralBlood,甲基纤维素半固体培养体系包括:0.9%甲基纤维素、1%牛血清白蛋白(BSA),10—4mol/L2—巯基乙醇、20%胎牛血清(FCS)及TP0(20ng/ml),IL—3(10ng/ml)、IL—6(10ng/ml),SCF(50ng/ml),加上IMDM,使总量达1ml ...
2021/8/11 12:12:46
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当前我国保险业实行营业税税制,该税制存在着许多弊端,阻碍了我国保险业的健康发展,本文正是以此为切入点,采用了理论分析与案例分析相结合的方法,研究了营改增对我国保险业合同定价、营销模式、理赔方式以及保险准备金的影响,然后在上述分析基础上分析了营改增对我国保险业财务方面(包括税负和盈利能力)的影响,随着金融服务业营改增政策颁布时间越来越临近,我们有必要全面分析、量化测算营改增可能对我国保险业产生的影响,提出积极的应对措施,保证我国保险业在营改增中平稳健康发展 ...
2021/9/7 7:25:34
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根据省政府办公厅《关对扩权强县(市)工作进行督通知》(冀政办传76)要省政府有关部门7月6日至0日以部门单位深入设区市、扩权县(市)对冀政8件和部门实施见落实情况进行了督导检扩权强县工作系统督情况调研报告,二扩权强县工作系统督情况调研报告扩权强县工作系统督情况调研报告根据省政府办公厅《关对扩权强县(市)工作进行督通知》(冀政办传[0]76)要省政府有关部门7月6日至0日以部门单位深入设区市、扩权县(市)对冀政[0]8件和部门实施见落实情况进行了督导检,了贯彻落实全省扩权强县座谈会精神按照冀政办传9件要由省发展改革委、省财政厅、省建设厅、等十省直部门组成五扩权强县工作督组0年8月6日—6日对各设区市、各扩权县(市)扩权强县工作进行了督导检分别与设区市政府及扩权县(市)政府及其主要相关部门进行了座谈听取了工作汇报扩权强县工作二次督情况调研报告 ...
2021/9/7 16:02:21
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要:在电力企业不断改革的经济形势下,人们对电力企业的供电质量有了更高的要求,电力企业也需要不断转变运作模式,不断改进电力营销业扩流程,实现电力营销业扩流程的精细化管理,最终提高企业的供电服务水平及客户满意度,2.1优化业扩流程通过推行业扩报装管理新模式,通过简化手续、优化流程、强化协同,实现“一口对外、流程精简、智能互动、协同高效、全程管控”的业扩报装新模式,提速业扩流程,精细化电力营销业扩流程管理制度要想精细化电力服务管理就要健全规范的营销业扩流程管理体制 ...
2021/7/26 6:33:37
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结论:HLA—B*4061等位基因为新的HLA—B等位基因,已荣获世界卫生组织HLA因子命名委员会正式命名,ofHLA—B*4061AlleleNewlyFound,基因序列设计,由上海申能博彩公司合成,扩增引物序列为5′GGCAGACAGTGTGACAAAGAGGC3′和5′CTGGGGAGGAAACACAGGTCAGCATGGGAAC3′ ...
2021/8/21 1:54:55
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DNA引物由上海生工生物工程技术服务有限公司合成,HAV—HGV标志物检测:ELISA方法,参照说明书,反应系统包括反应液(内含buffer缓冲液、dNTPs、荧光标记探针)39.6ul、Taq酶0.4ul,加入10ul模板提取液,总体积50ul ...
2021/8/7 6:45:55
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构建原核重组表达载体pGEX4T1MAGE3并检测其在大肠杆菌(E.coli)BL21中的表达,扩增出349bp的MAGE3目的基因并构建了原核重组表达载体pGEX4T1MAGE3,目的基因的原核表达及鉴定将转化有pGEX4T1MAGE3的E.coliBL21在1mmolIPTG诱导下分别培养1、2.5、4、6h ...
2021/8/21 20:40:05
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构建原核重组表达载体pGEX4T1MAGE3并检测其在大肠杆菌(E.coli)BL21中的表达,扩增出349bp的MAGE3目的基因并构建了原核重组表达载体pGEX4T1MAGE3,目的基因的原核表达及鉴定将转化有pGEX4T1MAGE3的E.coliBL21在1mmolIPTG诱导下分别培养1、2.5、4、6h ...
2021/8/21 2:35:06
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words:AconitumcarmichaelDexb.;Inter—SimpleSequenceRepeat;Optimization乌头AconitumcarmichaelDexb.为毛茛科乌头属植物,别名五毒根[1],应用表2中最佳组合,选用引物UBC846,20μl体系中模板浓度分别置为0.5,1.5,3.0ng/μl和6ng/μl共4个浓度处理,由图2可以见,当20μl反应体系中,模板量从0.5~6ng/μl均有扩增,但到了浓度达到6ng/μl条带变得异常模糊,1.5ng/μl浓度的模板扩增效果很清楚,因此反应体系中模板浓度确定为1.5ng/μl ...
2021/7/6 17:32:48
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构建原核重组表达载体pGEX4T1MAGE3并检测其在大肠杆菌(E.coli)BL21中的表达,扩增出349bp的MAGE3目的基因并构建了原核重组表达载体pGEX4T1MAGE3,目的基因的原核表达及鉴定将转化有pGEX4T1MAGE3的E.coliBL21在1mmolIPTG诱导下分别培养1、2.5、4、6h ...
2021/8/21 2:35:06
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构建原核重组表达载体pGEX4T1MAGE3并检测其在大肠杆菌(E.coli)BL21中的表达,扩增出349bp的MAGE3目的基因并构建了原核重组表达载体pGEX4T1MAGE3,目的基因的原核表达及鉴定将转化有pGEX4T1MAGE3的E.coliBL21在1mmolIPTG诱导下分别培养1、2.5、4、6h ...
2021/8/21 20:40:05
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DNA引物由上海生工生物工程技术服务有限公司合成,HAV—HGV标志物检测:ELISA方法,参照说明书,反应系统包括反应液(内含buffer缓冲液、dNTPs、荧光标记探针)39.6ul、Taq酶0.4ul,加入10ul模板提取液,总体积50ul ...
2021/8/7 6:45:55
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thuringiensis,Bt)与蜡状芽孢杆菌(Bacilluscereus,Bc)同属于蜡状芽孢杆菌菌群,为自然界中广泛分布的革兰阳性菌〔1〕,按照随机引物DNA标记试剂盒(RandomPrimerDNALabelingSystem)说明标记回收产物,以标记产物为探针,分别与供试菌株基因组DNA进行杂交,ERIC—PCR图谱(图1)6株苏云金芽孢杆菌和3株腊状芽孢杆菌的基因组DNA经ERIC—PCR扩增,均可产生清晰的DNA指纹图谱,扩增片段范围100~2500bp,各菌株扩增图谱的多态性程度不同 ...
2021/8/20 14:36:36
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机构申请增项范围与专业技术人员对照表序号机构名称申请扩项范围工程技术人员专业要求姓名所学专业培训合格证书编号1广东格林检测技术有限公司冶金、建材材料类专业尹荣华金属塑性加工粤职评化工、石化及医药化工与制药类专业陈燎原化学工艺粤职检粤职评轻工、纺织、烟草加工制造业轻工纺织食品类专业赵庆大食品科学与工程粤职检电力、燃气及水的生产和供应业能源动力类专业张千林热能工程粤职评 ...
2021/9/20 17:48:10
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目前,新型冠状病毒的检测依靠的是冠状病毒检测PCR试剂盒 ...
2022/1/15 23:37:40
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μl的离心管中加入下列物质:10×NEB2bufer25μl,样品DNA模板设计5个等次即100,200,300,400,500ng,MseⅠ(10U·μl—1)1.0μl,EcoRI(20U·μl—1)0.6μl,10×NEBbuffer25μl,100BSA0.5μl,双蒸水补足体积到50μl,μl经过酶切的DNA样品,加入EcoRI接头(30pm·μl—1)0.3μl,MseI接头(33pm·μl—1)2.0μl,T4DNAligase(400U·μl—1)1.2μl,T4ligasebuffer5.0μl,ddH2O1.5μl,总体积为50μl,预扩增反应取连接完成的DNA5μl,加入EcoRI预扩增引物(50pm·μl—1)2.0μl,MseI预扩增引物(50pm·μl—1)2.0μl,10×PCRbuffer(Mg2+free)5.0μl,MgCl2(25mmol·L—1)4.0μl,dNTP(2.5mmol·L—1)4.0μl,rTaq酶(5U·μl—1)0.5μl,双蒸水补足体积到50μl ...
2021/8/16 17:45:51
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words:Dendrobiumloddigesii;GenomicDNA;RAPD—PCRamplificationsystem美花石斛DendrobiumloddigesiiRolfe为兰科(Orchidaceae)石斛属多年生草本植物,又称环草石斛、粉花石斛或耳环石斛等,主要分布于贵州、广西、云南和广东等少数几个省区,g,在研钵里研磨成粉末(加少量石英砂),于5ml的离心管中,加1ml4×CTAB溶液(4%CTAB,0.1mol・L—1Triso—ClpH8.0,0.02mol・L—1EDTApH8.0,1.4mol・L—1NaCl,3%PVP)混匀,冰上放置10min,室温溶解,4℃8000r/min离心5min后弃上清液,min的4×CTAB溶液(含20μlβ—ME),65℃水浴30min(其间不时轻轻颠倒),取出后加入等体积的氯仿:异戊醇(24∶1),颠倒混匀5min,4℃5000r/min离心5min,吸取上清液(如果混浊,再抽提),加2倍体积的预冷无水乙醇,混匀后室温放置5min,4℃10000r/min离心10min,取沉淀,钩出DNA放在无菌的1.5ml离心管中,用预冷的70%乙醇洗2次,常温10000r/min离心2min,把沉淀在超净台上干燥后用0.1×TE(10mmol・L—1Triso—ClpH8.0 ...
2021/8/20 6:45:28
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μl的离心管中加入下列物质:10×NEB2bufer25μl,样品DNA模板设计5个等次即100,200,300,400,500ng,MseⅠ(10U·μl—1)1.0μl,EcoRI(20U·μl—1)0.6μl,10×NEBbuffer25μl,100BSA0.5μl,双蒸水补足体积到50μl,μl经过酶切的DNA样品,加入EcoRI接头(30pm·μl—1)0.3μl,MseI接头(33pm·μl—1)2.0μl,T4DNAligase(400U·μl—1)1.2μl,T4ligasebuffer5.0μl,ddH2O1.5μl,总体积为50μl,预扩增反应取连接完成的DNA5μl,加入EcoRI预扩增引物(50pm·μl—1)2.0μl,MseI预扩增引物(50pm·μl—1)2.0μl,10×PCRbuffer(Mg2+free)5.0μl,MgCl2(25mmol·L—1)4.0μl,dNTP(2.5mmol·L—1)4.0μl,rTaq酶(5U·μl—1)0.5μl,双蒸水补足体积到50μl ...
2021/8/16 17:45:51
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甲方、乙方丙方对增部分进行认购认购价,甲方、乙方丙方成珠海市x有限公司合法股东其股权占公司股份%享有股东合法权四、增公司股权结构变更甲方出占册%,乙方(签)丙方(签)签订日期年月日</ ...
2021/9/23 0:44:12
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地税局“营改增”试工作总结,现代业入库营业税XXXXX万元其企业入库XXXX万元,X、X月X日征期纯营业税管户做税种鉴定工作 ...
2021/9/27 8:07:20
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克隆人羧肽酶A1(CPA1)全酶及其4条肽段基因,构建重组表达载体,并在COS7细胞中分泌表达.方法:以胰腺总RNA为模板,RTPCR扩增CPA1全酶基因,获得了CPA1全酶及其4条肽段基因,构建了重组表达载体,测序证实插入序列正确,并在COS7细胞中成功分泌表达了融合FLAGtag的目的蛋白和肽段.结论:在COS7细胞成功分泌表达了融合FLAGtag的CPA1全酶及其4条肽段,为下一步酶活性测定奠定了基础.代写论文,再以全酶基因为模板,相应引物PCR扩增CPA1的4条肽段基因.PCR反应体系与TaqDNA聚合酶说明书50μL体系相同,反应条件:95℃5min后,95℃变性1min,57℃退火1.5min,72℃延伸1.5min,经过30个循环,最后72℃延伸5min.PCR产物经15g/L琼脂糖凝胶电泳鉴定结果.论文网 ...
2021/8/19 18:44:05
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滕林“营改增”改革进步减轻了建筑业、房地产业、金融业和生活业税,06年5月日起黔西县“营改增”试围扩到建筑业、房地产业、金融业和生活业,“营改增”改革进步减轻了建筑业、房地产业、金融业和生活业税 ...
2021/10/11 15:50:50
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文章以河北省为例,分析了过渡时期以及全部扩围后“营改增”给地方财政收入带来的影响,认为必须从制度上彻底改革才能减少对地方政府财政收入所造成的不稳定影响,进而推进“营改增”这一结构性减税举措的顺利进行,(三)全部扩围后“营改增”对河北省政府财政收入的影响上部分主要分析了过渡时期改征行业税收对河北省地方财政收入的影响,结果表明即使全部归属于地方,河北省财政收入仍然有缺口,在分成比例介于50%~55%时,地方财政收入才能维持到“营改增”之前的水平,当“营改增”前后地方财政收入保持不变,即1534.65X=783.75,得出X=51.07% ...
2021/8/7 13:33:09
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文章以河北省为例,分析了过渡时期以及全部扩围后“营改增”给地方财政收入带来的影响,认为必须从制度上彻底改革才能减少对地方政府财政收入所造成的不稳定影响,进而推进“营改增”这一结构性减税举措的顺利进行,(三)全部扩围后“营改增”对河北省政府财政收入的影响上部分主要分析了过渡时期改征行业税收对河北省地方财政收入的影响,结果表明即使全部归属于地方,河北省财政收入仍然有缺口,在分成比例介于50%~55%时,地方财政收入才能维持到“营改增”之前的水平,当“营改增”前后地方财政收入保持不变,即1534.65X=783.75,得出X=51.07% ...
2021/8/7 13:33:09
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通营改增税改革对企业财管理影响分析可以改进其不足推动企业健康持续发展,其三营改增税改革背景下企业税率选择根据灵活但提升可操作性定程上增加企业财管理风险,</ ...
2021/10/20 15:22:49
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摘要:随着“营改增”范围的不断扩大,辽宁省“营改增”试点纳税人不断增加,“营改增”减轻了企业税负,同时也对辽宁省经济产生相应影响,文章通过营业税对辽宁省地方财政收入的贡献,分析了“营改增”对辽宁省财政收入的影响、经济发展的影响及就业的影响,“营改增”的结果,一方面带来企业减税、财政减收,另一方面将地方财政收入转为中央财政收入,这必然影响辽宁省财政收入 ...
2021/5/27 23:58:00
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摘要:对采自我国南方不同地区的25份野生狗牙根〔Cynodondactylon(L.)Pers.〕进行了RAPD分子标记分析,DAMD、RAPD、AFLP、CpSSRLP已被用于检测当地野生狗牙根居群的遗传多样性[3~5],本试验采用拟RAPD分子标记方法对25份我国南方狗牙根种质进行遗传多样性分析,以期为我国野生狗牙根种质资源的保护与开发利用提供参考 ...
2021/8/14 17:41:25
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Fab段基因并进行序列分析.方法:设计扩增鼠IgG重链Fd段及κ轻链引物,从分泌cTnImAb的杂交瘤细胞中提取总RNA,RTPCR扩增,对扩增产物进行分子克隆、测序及序列分析.结果:重链和轻链引物分别扩增出一约700bp和800bpDNA片段.经序列分析,与已发表的鼠IgG基因序列对比,其核苷酸及其所推导的氨基酸序列符合鼠IgG1Fab段特征.在GenBank登录,登录号为AY484430(重链),AY484431(轻链);氨基酸序列登录号为AAR83243(重链),AAR83244(轻链).结论:本实验室获得了完整的鼠源性抗人cTnImAbFab段基因,为鼠抗人cTnI的人源化改造奠定了基础.
,AGGCTGTTGTGACTCAGGAATC3′;重链Fd段3′端引物IgG1:5′AGGCTTACTAGTACAATCCCTGGGCACAAT3′;IgG2b:5′CTCCTTACTAGTAGGACAGGGGTTGATTGT3′;IgG3:5′GGGGGTACTAGTCTTGGGTATTCTAGGCTC3′;轻链基因3′端引物:5′GCGCCGTCTAGAATTAACACTCATTCCTGTTGAA3′.以上S=C/G,Y=C/T,M=A/C,W=A/T,K=T/G,r=A/G,由TaKaRa公司合成.
,菌落PCR鉴定目的基因片段插入引物序列为T载体的测序引物:上游引物(SequencingPrimerRVM):5′GAGCGGATAACAATTTCACACAGG3′,下游引物(SequencingPrimerM1347):5′CGCCAGGGTTTTCCCAGTCACGAC3′,PCR反应条件为:94℃预变性10min,94℃变性1min,52℃退火2min,72℃延伸2min,30个循环,最后72℃延伸10min.取10μL的反应体积以13g/L琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物.电泳照片经计算机图像分析软件QuantityOne处理. ...
2021/8/22 8:31:35
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进步了扩权县(市)情况掌握手信息支持扩权县(市)发展省政府有关部门还通督加强了系统对扩权县(市)调研工作力,扩权各扩权县(市)近期会议和培训增多存省、市重复开会现象扩权县(市)通信、交通、差旅、办公、培训等方面费支出加,三、建议、各扩权县(市)可根据地实际不突破机构限额和人员编制情况下主设置机构待扩权县(市)运段省里再视情况对问题进行专题研究 ...
2021/12/30 5:50:50
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进步了扩权县(市)情况掌握手信息支持扩权县(市)发展省政府有关部门还通督加强了系统对扩权县(市)调研工作力,扩权各扩权县(市)近期会议和培训增多存省、市重复开会现象扩权县(市)通信、交通、差旅、办公、培训等方面费支出加,</ ...
2021/10/14 11:31:00
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2021/8/21 9:09:45
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随机扩增DNA的多态性(RAPD—DNA)分型是近年来继质粒谱分析、脉冲场电泳、探针杂交等分子生物学分型方法之后,发展起来的又一基因分型技术,在建立后的短短几年内,它已在医院感染菌株基因多态性分析中,显示了巨大的优势,6.聚合酶链反应(PCR)条件:反应体积为50μl,含引物2.0μmml/L,4种dNTP各125μmml/L,镁离子浓度3.5μmml/L,待测模板1μl,Taq聚合酶1U,本研究分型结果提示,三所医院之间基因型差别较大,且同一医院医院感染株与社区感染株基因型完全不同 ...
2021/8/13 5:31:46
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随机扩增DNA的多态性(RAPD—DNA)分型是近年来继质粒谱分析、脉冲场电泳、探针杂交等分子生物学分型方法之后,发展起来的又一基因分型技术,在建立后的短短几年内,它已在医院感染菌株基因多态性分析中,显示了巨大的优势,6.聚合酶链反应(PCR)条件:反应体积为50μl,含引物2.0μmml/L,4种dNTP各125μmml/L,镁离子浓度3.5μmml/L,待测模板1μl,Taq聚合酶1U,本研究分型结果提示,三所医院之间基因型差别较大,且同一医院医院感染株与社区感染株基因型完全不同 ...
2021/8/13 5:31:46
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要我国“营改增”税收改革是充分体现税收公平、保证税收体制与国际接轨及深化我国济体制改革重措施其实现企业税收减、企业积累扩再生产金及优化配置方面发挥着积极作用,三、“营改增”对各类型行业成控制作用()“营改增”政策对物流行业成控制作用,四、实行“营改增”企业应采取措施“营改增”实行我国企业应从税收筹划人才培养、规财核算及合理选择供应商等方面加强税收筹划以保证“营改增”政策对减轻企业税作用充分发挥切实企业扩再生产提供金 ...
2021/10/29 18:14:09
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金士正李茜梁延连邓志辉,检测的16个STR位点包括:D5S818,D13S317,D7S820,D8S1179,D21S11,D18S51,D3S1358,vWA,FGA,TH01,D16S539,D2S1338,D19S433,TPOX,CSF1PO和性染色体上Amelogenin位点,SchematicdiagramoftheinheritanceofA3B3inafamily.Thephenotypedeterminedareindicatedbycapitalletter.Arrowheadindicatespropositus.Sampleshownindashedsquarewasnotstudied. ...
2021/4/26 4:40:41
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要:本研究收集了6个彩色马铃薯品种,根据转基因技术原理,采用聚合酶链式反应技术(PCR),用马铃薯转基因常用35S启动子和筛选标记卡那霉素基因特异引物分析了彩色马铃薯是否为转基因马铃薯品种,试验结果表明,6个彩色马铃薯品种PCR扩增结果均为阴性,表明这些彩色品种并非转基因品种,这些品种实际上是经过常规杂交选育而成,管中加入各种试剂,20L体系:10BufferwithMgCl22L,dNTPs(2mmol/L)2L,左右引物(2mmol/L)各1L,DNA模板1L,不足部分用ddH2O补充 ...
2021/8/14 13:11:26
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毕业论文,4×CTAB溶液,65℃水浴30min,加等体积的氯仿:异戊醇(24∶1),混匀5min,4℃5000r/min离心5min,吸取上清液,加无水乙醇,4℃10000r/min离心10min,沉淀用70%乙醇清洗,干燥,用0.1×TE溶解,4℃保存,PCR反应总体积为25μl,其中10×Buffer2.5μl,Mg2+1.2mmol·L—1,dNTPs160mmol·L—1,模板DNA用量40ng,Taq聚合酶1.2U,随机引物0.3mmol·L—1,ddH2O16.2μl ...
2021/8/22 14:45:28
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1.2.1cDNA文库的构建解剖镜下挑取屋尘螨约200只,匀浆后用TaKaRaRNAisoReagent试剂盒提取TotalRNA,用PolyATtractmRNA分离试剂盒提取mRNA,操作按说明书进行.参照试剂盒说明书,cDNA文库的构建以mRNA为模板,SmartⅢOligonucleotid(dT)为引物,在MMLV反转录酶作用下合成cDNA第1链,1.2.2未扩增文库滴度测定取3种连接方式稀释度为1∶5,1∶10和1∶20的包装产物各1μL,分别与过夜液体培养物200μL混合,并加入融化的LB/MgSO4TopAgar3mL,快速倒在37℃预热的90mmLB/MgSO4平板,快速旋转平板,使TopAgar水平分布,室温冷却10min后置37℃倒置培养6~18h.统计噬菌斑,计算滴度pfu/mL=噬菌斑数×稀释因子×103/铺板体积(μL).利用IPTG和XGal诱导上述未扩增文库计数蓝、白斑,重组效率=白斑数/(白斑数+蓝斑数).
,1h,用灭菌烧杯收集平板中的噬菌体裂解液,充分混匀后分装于50mL灭菌离心管,每管加入氯仿10mL,盖紧,振荡混匀2min,7000r/min离心10min,收集上清液,4℃保存.扩增文库滴度计算方法同上,所选用的噬菌体裂解液稀释度为10—4,铺板体积为5μL/12mm. ...
2021/8/20 7:01:46
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禽流行性感冒病毒简称禽流感病毒(AIV),属于正粘病毒科、流感病毒属,年在香港致6人死亡,2003~2004年在亚洲致4人死亡,2003年H7N7在荷兰致1人死亡[2],酶联免疫吸附试验(ELISA)运用ELISA原理建立的AIV检测方法较多,如用单克隆抗体介导的、经生物素一亲和素系统放大的H5亚型禽流感病毒捕获ELISA检测方法,为进一步研究检测试剂盒提供基础[4] ...
2021/8/12 19:13:25
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了解临床分离嗜麦芽寡养单胞菌产L1、L2β内酰胺酶情况、酶基因定位及核苷酸序列进化和同源关系,sequencingandlocationofgenesencodingL1andL2βlactamases,L1、L2编码基因的定位13株嗜麦芽寡养单胞菌质粒电泳后回收不同大小的质粒DNA片断,再分别作为模板,以L1、L2引物进行PCR扩增(反应体系及扩增条件同前),对两种酶基因进行定位 ...
2021/8/12 21:39:16
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要:本研究收集了6个彩色马铃薯品种,根据转基因技术原理,采用聚合酶链式反应技术(PCR),用马铃薯转基因常用35S启动子和筛选标记卡那霉素基因特异引物分析了彩色马铃薯是否为转基因马铃薯品种,试验结果表明,6个彩色马铃薯品种PCR扩增结果均为阴性,表明这些彩色品种并非转基因品种,这些品种实际上是经过常规杂交选育而成,管中加入各种试剂,20L体系:10BufferwithMgCl22L,dNTPs(2mmol/L)2L,左右引物(2mmol/L)各1L,DNA模板1L,不足部分用ddH2O补充 ...
2021/8/14 13:11:26
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禽流行性感冒病毒简称禽流感病毒(AIV),属于正粘病毒科、流感病毒属,年在香港致6人死亡,2003~2004年在亚洲致4人死亡,2003年H7N7在荷兰致1人死亡[2],酶联免疫吸附试验(ELISA)运用ELISA原理建立的AIV检测方法较多,如用单克隆抗体介导的、经生物素一亲和素系统放大的H5亚型禽流感病毒捕获ELISA检测方法,为进一步研究检测试剂盒提供基础[4] ...
2021/8/12 19:13:25
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1.2.1cDNA文库的构建解剖镜下挑取屋尘螨约200只,匀浆后用TaKaRaRNAisoReagent试剂盒提取TotalRNA,用PolyATtractmRNA分离试剂盒提取mRNA,操作按说明书进行.参照试剂盒说明书,cDNA文库的构建以mRNA为模板,SmartⅢOligonucleotid(dT)为引物,在MMLV反转录酶作用下合成cDNA第1链,1.2.2未扩增文库滴度测定取3种连接方式稀释度为1∶5,1∶10和1∶20的包装产物各1μL,分别与过夜液体培养物200μL混合,并加入融化的LB/MgSO4TopAgar3mL,快速倒在37℃预热的90mmLB/MgSO4平板,快速旋转平板,使TopAgar水平分布,室温冷却10min后置37℃倒置培养6~18h.统计噬菌斑,计算滴度pfu/mL=噬菌斑数×稀释因子×103/铺板体积(μL).利用IPTG和XGal诱导上述未扩增文库计数蓝、白斑,重组效率=白斑数/(白斑数+蓝斑数).
,1h,用灭菌烧杯收集平板中的噬菌体裂解液,充分混匀后分装于50mL灭菌离心管,每管加入氯仿10mL,盖紧,振荡混匀2min,7000r/min离心10min,收集上清液,4℃保存.扩增文库滴度计算方法同上,所选用的噬菌体裂解液稀释度为10—4,铺板体积为5μL/12mm. ...
2021/8/20 7:01:46
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了解临床分离嗜麦芽寡养单胞菌产L1、L2β内酰胺酶情况、酶基因定位及核苷酸序列进化和同源关系,sequencingandlocationofgenesencodingL1andL2βlactamases,L1、L2编码基因的定位13株嗜麦芽寡养单胞菌质粒电泳后回收不同大小的质粒DNA片断,再分别作为模板,以L1、L2引物进行PCR扩增(反应体系及扩增条件同前),对两种酶基因进行定位 ...
2021/8/12 21:39:16
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目的:用聚合酶链反应(PCR)方法检测棘阿米巴的26S核糖体DNA(26SrDNA,Rns),为早期诊断棘阿米巴角膜炎提供方法,acanthamoebakeratitis;ribosomal26S,将上述不同种株分装的三管DNA分别在同一棘阿米巴属特异性引物(ArDNA—a)作用下,运用PCR技术对棘阿米巴的26SrDNA基因片段进行扩增 ...
2021/8/10 9:03:45
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探讨PCR—DGGE技术在中草药栽培及药理研究中的应用,中草药药理,PCR—DGGE在微生物群落结构研究中,日渐发挥着巨大作用 ...
2021/8/14 4:22:35
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目的:用聚合酶链反应(PCR)方法检测棘阿米巴的26S核糖体DNA(26SrDNA,Rns),为早期诊断棘阿米巴角膜炎提供方法,acanthamoebakeratitis;ribosomal26S,将上述不同种株分装的三管DNA分别在同一棘阿米巴属特异性引物(ArDNA—a)作用下,运用PCR技术对棘阿米巴的26SrDNA基因片段进行扩增 ...
2021/8/10 9:03:45
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探讨PCR—DGGE技术在中草药栽培及药理研究中的应用,中草药药理,PCR—DGGE在微生物群落结构研究中,日渐发挥着巨大作用 ...
2021/8/14 4:22:35
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中图分类号R450文献标识码A文章编号1005—2720(2009)36—1913—01在泌尿系结核中肾结核最为常见、最先发生,以后由肾脏蔓延至整个泌尿系统,78例肾结核疑似患者最后确诊为肾结核54例,其中38例尿中TB—PCR检出阳性,而非结核患者无1例检出尿TB—PCR阳性,24小时尿液浓缩作直接涂片抗酸染色后作抗酸杆菌检查,方法简单,结果迅速,阳性率可达50~70%,但包皮垢杆菌、草分支杆菌也是经常在尿液中存在的抗酸杆菌,因此尿液中的抗酸杆菌并不等于结核杆菌 ...
2021/10/20 16:49:01
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分别采用单加IL—2,及同时加IL—2和α—半乳糖神经酰胺(α—Galcer)的方法,从人脐带血单个核细胞(UCB—MNCs)中扩增NKT细胞,proliferationofnaturalkillerTcellsinumbilicalcordbloodandthedifferentphenotypebetweenthem【Abstract,2.1.1IL—2刺激单个核细胞中NKT的扩增扩增后脐血TCRVαβ+NKT细胞占淋巴细胞的比例:第7天时,UCB—NKT为(0.29±0.09)% ...
2021/8/21 3:46:35
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2021/9/7 19:43:34
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这充分说明:由于电信业在国民经济中的重要地位,电信业“营改增”具有较大复杂性,国家对电信业“营改增”非常慎重,但电信业“营改增”的最终实施说明国家在十二五期间完成“营改增”改革的决心,五、电信业“营改增”面临的问题与对策(一)电信业“营改增”面临的问题――对《中国联通关于营业税改征增值税的公告―摘要》的解读:1.挑战:“营改增”政策的实施成本费用的下调幅度会低于当期营业收入的下调幅度,净利润有大幅下降,1.通过夯实收入基础,优化收入结构,合理利用多税率政策,减少收入下降规模 ...
2021/8/4 0:39:33
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这充分说明:由于电信业在国民经济中的重要地位,电信业“营改增”具有较大复杂性,国家对电信业“营改增”非常慎重,但电信业“营改增”的最终实施说明国家在十二五期间完成“营改增”改革的决心,五、电信业“营改增”面临的问题与对策(一)电信业“营改增”面临的问题――对《中国联通关于营业税改征增值税的公告―摘要》的解读:1.挑战:“营改增”政策的实施成本费用的下调幅度会低于当期营业收入的下调幅度,净利润有大幅下降,1.通过夯实收入基础,优化收入结构,合理利用多税率政策,减少收入下降规模 ...
2021/8/4 0:39:33
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摘要05年李克强总理政府报告工作提出要全面实现“营改增”按照国相关要05年建筑业、房地产业、金融业等将会被纳入“营改增”围济不断发展下“营改增”围不断扩这也味着有更多行业要做出相应改革顺应“营改增”要,将主要从房地产行业“营改增”相关政策、“营改增”政策对房地产开发企业财积极影响、房地产开发企业“营改增”对财不利影响以及面对“营改增”政策房地产开发企业应对策略这四方面对“营改增”对房地产开发企业财管理影响进行分析研究希望提出观能房地产企业应对今战略挑战提供参考,二、“营改增”政策对房地产开发企业财积极影响“营改增”政策对房地产开发企业财积极影响主要可以体现三方面 ...
2021/10/20 10:00:39
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通过PCR从国内柔红霉素生产菌种天蓝淡红链霉菌SIPI—1482基因组DNA中扩增出约1080bp的dnrX部分序列,将PCR扩增片段中985bp的片段亚克隆至大肠埃希菌质粒pYG813构建了同源重组突变质粒pYG963,转化SIPI—1482原生质体并成功地敲除了dnrX基因,得到一株稳定的突变株,Doxorubicin;Daunorubicin;Homologousrecombination;SIPI—1482,amplificationofdnrXgenefromSIPI—1482 ...
2021/8/17 6:40:47
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本试验采用正交设计法对梨属野生种质资源SRAP—PCR反应体系进行优化,并通过正交直观分析法和新复极差法,更直观快速地找到梨属SRAP—PCR反应体系的最佳组合,以期为梨属野生种质资源的开发利用与保护提供基础技术支持,说明梨属SRAP—PCR反应的适宜dNTPs浓度为200mol/L,说明梨属SRAP—PCR反应的引物适宜浓度为0.4mol/L ...
2021/8/17 18:16:25
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霍振义王静高俊薇杨剑朱晓君马万山贾淑琴刘雅诚,异基因造血干细胞移植是通过异体的造血干细胞植入受体内而获得造血和免疫功能重建的医疗手段.供者细胞在受者体内的形成情况及动态变化是临床预测疾病复发倾向的一项指标,因此移植后动态检测嵌合状态对判断移植效果、实施临床早期干预治疗具有重要的意义[1].短串联重复序列(shorttandemrepeat,STR)是基因组染色体上的一些简单重复序列,STR具有高度多态性和体细胞稳定性,STRPCR现已成为鉴别不同个体DNA的强有力的工具,故STR方法可用于对异基因造血干细胞移植患者的植入情况进行动态检测的研究[2].我们采用复合扩增荧光标记STR技术,对31例异基因造血干细胞移植患者的植入情况进行动态检测,评价移植后的嵌合状态.
,1.1对象200202/200607在北京大学人民医院和北京道培医院接受异基因造血干细胞移植的患者31(男19,女12)例,年龄15~52(平均32)岁.其中,慢性粒细胞白血病6例,急性淋巴细胞白血病9例,红白血病2例,骨髓增生异常综合征2例,急性粒细胞白血病6例,急性单核细胞白血病3例,急性粒―单核细胞白血病2例,地中海贫血1例.接受有血缘关系供者移植27例,无血缘关系供者4例.供受体性别相合28例,性别不合3例.主要试剂及仪器:DNA提取选用Chelex100,使用美国ABI公司ProfilerPlusTM试剂盒,扩增D3S1358,vWA,FGA,D8S1179,D21S11,D18S51,D5S818,D13S317,D7S820等9个常染色体基因座和1个性别基因座.内标ROX500及等位基因梯Ladder、上样液去离子甲酰胺(Promega公司) ...
2021/8/18 7:19:56
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霍振义王静高俊薇杨剑朱晓君马万山贾淑琴刘雅诚,异基因造血干细胞移植是通过异体的造血干细胞植入受体内而获得造血和免疫功能重建的医疗手段.供者细胞在受者体内的形成情况及动态变化是临床预测疾病复发倾向的一项指标,因此移植后动态检测嵌合状态对判断移植效果、实施临床早期干预治疗具有重要的意义[1].短串联重复序列(shorttandemrepeat,STR)是基因组染色体上的一些简单重复序列,STR具有高度多态性和体细胞稳定性,STRPCR现已成为鉴别不同个体DNA的强有力的工具,故STR方法可用于对异基因造血干细胞移植患者的植入情况进行动态检测的研究[2].我们采用复合扩增荧光标记STR技术,对31例异基因造血干细胞移植患者的植入情况进行动态检测,评价移植后的嵌合状态.
,1.1对象200202/200607在北京大学人民医院和北京道培医院接受异基因造血干细胞移植的患者31(男19,女12)例,年龄15~52(平均32)岁.其中,慢性粒细胞白血病6例,急性淋巴细胞白血病9例,红白血病2例,骨髓增生异常综合征2例,急性粒细胞白血病6例,急性单核细胞白血病3例,急性粒―单核细胞白血病2例,地中海贫血1例.接受有血缘关系供者移植27例,无血缘关系供者4例.供受体性别相合28例,性别不合3例.主要试剂及仪器:DNA提取选用Chelex100,使用美国ABI公司ProfilerPlusTM试剂盒,扩增D3S1358,vWA,FGA,D8S1179,D21S11,D18S51,D5S818,D13S317,D7S820等9个常染色体基因座和1个性别基因座.内标ROX500及等位基因梯Ladder、上样液去离子甲酰胺(Promega公司) ...
2021/8/18 7:19:56
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这发展关键刻恰逢公司开展了深入学习实践科学发展观活动这对集团公司发展必定是有利促进,公司领导高瞻远瞩提出了扩规模、快尽快出、占领市场、快速发展战略方针,践行科学发展观我做贡献乘风破浪正当直挂济沧海集团党委四党支部</ ...
2021/7/13 2:09:30
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关增扩股方案请示 银监分局 董事会研究并股份有限公司03年次临股东会通,增扩股股权结构次募集股金3000万股全部投股其原法人新增扩股 股原然人新增扩股 股新增然人投入股 股,股占比 %(见股东名册)妥否请批复 ...
2021/7/28 3:16:00
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(3)清远山区地貌比郴州圆顶单峰地貌地形更复杂但因发射附近山峰高不是太高信多径延测试可以做比郴州更远,()圆顶单峰地貌对信阻隔更严重导致30k以测试无法完成,(5)多径延扩频探测受环境噪声影响续有待选择更测试环境做进步探测和分析 ...
2021/10/17 0:04:01