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长玻璃用亲和硅烷,短玻璃用剥离硅烷处理,便于电泳结束后长短玻璃板的分离,凝胶都粘附在长玻璃板上,在凝胶灌制中胶室底部漏胶不可避免,需要准备较多的胶液以防漏胶过多而灌胶不足,选择稍长于玻璃板宽度的间隔片,仅需插入1mm即可,紧密对齐两边的间隔片,用弹簧夹夹住 ...
2021/8/13 11:49:13
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长玻璃用亲和硅烷,短玻璃用剥离硅烷处理,便于电泳结束后长短玻璃板的分离,凝胶都粘附在长玻璃板上,在凝胶灌制中胶室底部漏胶不可避免,需要准备较多的胶液以防漏胶过多而灌胶不足,选择稍长于玻璃板宽度的间隔片,仅需插入1mm即可,紧密对齐两边的间隔片,用弹簧夹夹住 ...
2021/8/13 11:49:13
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、掌握分离纯化蛋白质基原理和基程,、取3L,℃预冷血清加入3L℃预冷饱和硫酸铵,血清样由蛋白质种类较多区带不清 ...
2021/11/7 16:58:41
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毛细管电泳在种子遗传分析中的应用国内外已有报道,如Gerber等采用高效毛细管电泳对大豆种子品质的遗传学进行研究分析引,作为一种高效分离技术,毛细管电泳在食品、药物、环境、生物碱、毒品、天然产物等方面的应用已显示出巨大的潜力,目前,毛细管电泳在种子分析领域的应用才刚刚起步,国内已有种子部门开展此方面的应用研究,随着毛细管电泳技术研究的深入、毛细管电泳仪器的普及和种子分析检验技术的发展 ...
2021/10/3 17:00:31
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摘要[目]初步了市罕见沙门菌血清型菌株分子流行病学特征,[结]株列克星敦、株非丁伏斯沙门菌电泳图谱显示有较差异株蒙得维亚、株朗根萨尔、株鸟普萨拉、5株胥戈成格隆、株波摩那图谱显示存性,[结论]市沙门菌罕见血清型流行菌株和食品菌株既存分子水平性也存非性加强沙门菌综合监测和即分子分型可预警罕见沙门菌血清型流行 ...
2021/9/20 12:59:19
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摘要:本文结合制作生物教学片《聚丙烯酰胺凝胶电泳》的实践,总结了电视教学片的编制手法及经验,肯定了电视教学片对教学的推动作用,利用电视和电视录像教材进行教学,在提高教学质量、扩大教学规模、提高教学效率和促进教学改革等方面都能起到良好的作用,简历大全/html/jianli/ ...
2021/9/10 18:45:22
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fluidicchip;Electrophoresis;Urineproteins;Selectivityofproteinuria,并可实现阵列并行操作,用于无机分子、有机分子、生物大分子(如DNA、氨基酸、蛋白质、细胞)、细菌及病毒等的分析检测已有较多研究报道,但鲜见在临床上用于分离尿蛋白的报道,我们自行研制了微流控电泳芯片,并用于分离临床尿蛋白的验证试验,效果很好,与美国Helena琼脂糖凝胶电泳结果100%相符,与临床诊断符合率为97.14%,新制芯片分别用1mol/LNaOH、双蒸水、电泳缓冲液浸泡30min ...
2021/8/26 6:02:05
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高二生物下册《血红蛋白的提取和分离》知识梳理,2、血红蛋白的释放:
,3、分离血红蛋白溶液: ...
2021/12/7 15:14:58
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words:TrachyspermumammiL.;CuminvmcyminvmL.;Polypropyleneacylamic;Albumenelectrophoresis.
,试剂丙烯酰胺(Acr)、甲叉双丙烯酰胺(Bis)、三羧甲基氨基甲烷(Tris)、四甲基乙二胺(TEMED)、盐酸、过硫酸胺、甘胺酸、溴酚蓝、考马斯亮蓝R250、甲醇、醋酸,试剂配制[1]分离胶缓冲液、分离胶贮液、过硫酸铵溶液、浓缩胶缓冲液、四甲基乙二胺溶液、电极缓冲液、溴酚蓝指示液、染色液、脱色液 ...
2021/8/22 2:04:16
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/L硫脲、40g/LCHAPS、100mmol/LDTT、5g/L(pH3—10)IPGbuffer,1mmol/LPMSF作为裂解液,丙酮沉淀蛋白,主动水化上样法,聚焦电压达到140kV可以得到分辨率高、重复性好的结果,oftwo—dimensionalpolyacrylamidegelelectrophoresis(2—DE)techniquesforproteomicresearchofhepatocellularcarcinoma(HCC)tissues.【Methods,provided2—Dresultswithhighresolutionandrepetitiveness,whichpavethewayfortheproteomicresearchforHCCtissues. ...
2021/8/11 12:10:46
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/L硫脲、40g/LCHAPS、100mmol/LDTT、5g/L(pH3—10)IPGbuffer,1mmol/LPMSF作为裂解液,丙酮沉淀蛋白,主动水化上样法,聚焦电压达到140kV可以得到分辨率高、重复性好的结果,oftwo—dimensionalpolyacrylamidegelelectrophoresis(2—DE)techniquesforproteomicresearchofhepatocellularcarcinoma(HCC)tissues.【Methods,provided2—Dresultswithhighresolutionandrepetitiveness,whichpavethewayfortheproteomicresearchforHCCtissues. ...
2021/8/11 12:10:46
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核酸染料比较结果:GoldViewnaII的灵敏度最高,DNAGreen的灵敏度与EB相当,GoldView的灵敏度略低于EB,gelelecthophoresis;nucleicaciddye;Ethidiumbromide,近年来陆续推出了多种新型核酸染料,比如GoldViewnaII,GoldView,DNAGreen等 ...
2021/8/19 0:08:27
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核酸染料比较结果:GoldViewnaII的灵敏度最高,DNAGreen的灵敏度与EB相当,GoldView的灵敏度略低于EB,gelelecthophoresis;nucleicaciddye;Ethidiumbromide,近年来陆续推出了多种新型核酸染料,比如GoldViewnaII,GoldView,DNAGreen等 ...
2021/8/19 0:08:27
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采用奥林巴斯700全动生化分析仪双缩脲法检测血清总蛋白溴甲酚绿法(BG)检测白蛋白(LB)・计算/G比值,a球蛋白球蛋白γ球蛋白,是由汉坦病毒感染引起种全身性疾病,病理程极复杂,常由全身炎性反应综合征发展多器官功能障碍综合征() ...
2021/9/30 22:39:20
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园参、野山参、西洋参水溶性蛋白的制备,由表1可知,野山参及西洋参中水溶性蛋白的含量较园参中的蛋白低很多,西洋参中的水溶性蛋白为园参的50%左右,而野山参中的水溶性蛋白,仅为园参的10%,低分子量标准蛋白电泳泳道密度曲线图数据(略)表3园参水溶性蛋白电泳泳道密度曲线图数据(略)表4野山参水溶性蛋白电泳泳道密度曲线图数据(略)表5西洋参水溶性蛋白电泳泳道密度曲线图数据(略) ...
2021/8/20 16:32:19
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园参、野山参、西洋参水溶性蛋白的制备,由表1可知,野山参及西洋参中水溶性蛋白的含量较园参中的蛋白低很多,西洋参中的水溶性蛋白为园参的50%左右,而野山参中的水溶性蛋白,仅为园参的10%,低分子量标准蛋白电泳泳道密度曲线图数据(略)表3园参水溶性蛋白电泳泳道密度曲线图数据(略)表4野山参水溶性蛋白电泳泳道密度曲线图数据(略)表5西洋参水溶性蛋白电泳泳道密度曲线图数据(略) ...
2021/8/20 16:32:19
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当前,细菌耐药性问题日趋严重,给临床治疗带来困难,对卜内酞胺类抗生素而言,某些菌青霉素结合蛋白(PBps)改变造成的耐药性,是卜内酞胺类抗生素的特点,国内有关PBps测定技术报道甚少,以3H标记者更少,本文介绍这一技术,制备凝胶薄片(厚0.2cm),凝胶配方:分离胶(10%):Aerylamide:bis(30:0.5)6.7ml,Tris(pH8.8,1.5ml/l)5ml,10%SDS0.2ml,蒸馏水8.1ml,真空搅拌10一15min除去气体,再加入TEMED,浓缩胶(5%):按上述配方依次为1.7ml,2.5ml,0.1而,5.6ml,7.5,和150 ...
2021/8/25 13:38:48
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当前,细菌耐药性问题日趋严重,给临床治疗带来困难,对卜内酞胺类抗生素而言,某些菌青霉素结合蛋白(PBps)改变造成的耐药性,是卜内酞胺类抗生素的特点,国内有关PBps测定技术报道甚少,以3H标记者更少,本文介绍这一技术,制备凝胶薄片(厚0.2cm),凝胶配方:分离胶(10%):Aerylamide:bis(30:0.5)6.7ml,Tris(pH8.8,1.5ml/l)5ml,10%SDS0.2ml,蒸馏水8.1ml,真空搅拌10一15min除去气体,再加入TEMED,浓缩胶(5%):按上述配方依次为1.7ml,2.5ml,0.1而,5.6ml,7.5,和150 ...
2021/8/25 13:38:48
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目的为开展针灸治疗胃溃疡的蛋白质组研究,建立并优化其蛋白质组分析所需的双向凝胶电泳技术,提高其分辨率及重复性,IPG3—10预制胶条、尿素、二硫苏糖醇(DTT)、碘乙酰胺(Iodoacetamide)、丙乙酰胺(Acr,A.R.)、N,N甲叉双丙乙酰胺(Bis,A.R.)、40%载体两性电解质(Bio—Lyte3/10ampholytes)、矿物油(MinalOil)以上试剂均来自美国Bio—Rad,样品处理胃组织总蛋白的提取:于溃疡模型成功后处死大鼠,分别取出正常对照组与模型组观察溃疡形成情况,取针刺治疗组大鼠胃溃疡处组织进行处理,予冰盐水反复清洗干净,以去除血液,并尽可能剪去多余的其他组织,滤纸吸去多余的液体,立即置液氮中速冻,后移至—80℃低温冰箱保存 ...
2021/8/21 4:01:46
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目的为开展针灸治疗胃溃疡的蛋白质组研究,建立并优化其蛋白质组分析所需的双向凝胶电泳技术,提高其分辨率及重复性,IPG3—10预制胶条、尿素、二硫苏糖醇(DTT)、碘乙酰胺(Iodoacetamide)、丙乙酰胺(Acr,A.R.)、N,N甲叉双丙乙酰胺(Bis,A.R.)、40%载体两性电解质(Bio—Lyte3/10ampholytes)、矿物油(MinalOil)以上试剂均来自美国Bio—Rad,样品处理胃组织总蛋白的提取:于溃疡模型成功后处死大鼠,分别取出正常对照组与模型组观察溃疡形成情况,取针刺治疗组大鼠胃溃疡处组织进行处理,予冰盐水反复清洗干净,以去除血液,并尽可能剪去多余的其他组织,滤纸吸去多余的液体,立即置液氮中速冻,后移至—80℃低温冰箱保存 ...
2021/8/21 4:01:46
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摘要聚丙烯酰胺凝胶电泳(简称PAGE)技术,对天南星类中药材进行鉴别结果表明:三种天南星药材样品的PAGE图谱完全不同,可作为天南星类中药材鉴别的一种有效,words:ArisaemaconsangumeumSchott.Arisaemaheterophyllumbi.
,peclatisectaSchott.PAGEidentification. ...
2021/8/27 1:35:46
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Tris—HCl(pH=8.8),1mol·L—1Tris—HCl(pH=6.8),10%(质量浓度)SDS,50%(体积分数)甘油,1%(质量浓度)溴酚蓝,考马斯亮蓝R—250染液(取0.04g考马斯亮蓝R—250,加入甲醇18mL、蒸馏水18mL和冰醋酸4mL,即得),考马斯亮蓝脱色液(10mL甲醇、10mL冰醋酸和80mL蒸馏水混匀),30%(质量浓度,下同)丙烯酰胺,0.8%N,N’—甲叉双丙烯酰胺,10%SDS,10%过硫酸铵,1%溴酚蓝,mol·L—1的Tris—HCl0.6mL,加入50%(体积分数)的甘油5mL、10%(体积分数)的SDS2mL、2—硫基乙醇0.5mL、1%(质量分数)溴酚蓝1mL和蒸馏水0.9mL,4℃冰箱中存放,备用,mL(C液)取1mol·L—1Tris—HCl50mL,加入10%SDS4mL,再加入蒸馏水46mL,即得 ...
2021/8/25 17:00:45
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Tris—HCl(pH=8.8),1mol·L—1Tris—HCl(pH=6.8),10%(质量浓度)SDS,50%(体积分数)甘油,1%(质量浓度)溴酚蓝,考马斯亮蓝R—250染液(取0.04g考马斯亮蓝R—250,加入甲醇18mL、蒸馏水18mL和冰醋酸4mL,即得),考马斯亮蓝脱色液(10mL甲醇、10mL冰醋酸和80mL蒸馏水混匀),30%(质量浓度,下同)丙烯酰胺,0.8%N,N’—甲叉双丙烯酰胺,10%SDS,10%过硫酸铵,1%溴酚蓝,mol·L—1的Tris—HCl0.6mL,加入50%(体积分数)的甘油5mL、10%(体积分数)的SDS2mL、2—硫基乙醇0.5mL、1%(质量分数)溴酚蓝1mL和蒸馏水0.9mL,4℃冰箱中存放,备用,mL(C液)取1mol·L—1Tris—HCl50mL,加入10%SDS4mL,再加入蒸馏水46mL,即得 ...
2021/8/25 17:00:45
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血清脂蛋白电泳法是近些年临床上经常采用的一种检验方法,由于其分离和显色效果均不是很满意,目前不少实验室已废弃脂蛋白电泳法,改用脂蛋白胆固醇和载脂蛋白测定,1.1.2凝胶缓冲液:巴比妥钠30mmol/L,乙二胺四乙酸二钠0.94mmol/L,蔗糖146mmol/L,1.0mol/LHCL调pH至8.6(含聚乙烯吡咯烷酮K—605g/L),1.1.35g/L琼脂糖凝胶,以凝胶缓冲液制备并分装后,贮于4℃ ...
2021/8/19 0:20:06
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血清脂蛋白电泳法是近些年临床上经常采用的一种检验方法,由于其分离和显色效果均不是很满意,目前不少实验室已废弃脂蛋白电泳法,改用脂蛋白胆固醇和载脂蛋白测定,1.1.2凝胶缓冲液:巴比妥钠30mmol/L,乙二胺四乙酸二钠0.94mmol/L,蔗糖146mmol/L,1.0mol/LHCL调pH至8.6(含聚乙烯吡咯烷酮K—605g/L),1.1.35g/L琼脂糖凝胶,以凝胶缓冲液制备并分装后,贮于4℃ ...
2021/8/19 0:20:06
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浓缩胶浓度为3%,分离胶浓度为17.5%,上样量为10μl,恒定电流为40mA,电泳时间50min条件下,获得最佳壳寡糖分析图谱,按参考文献[4]方法,取1%壳聚糖醋酸溶液,加入1mg/ml的酶溶液,于40℃的水浴锅中反应100min,煮沸10min终止反应,加1mol/LNaOH溶液,4000r/min离心5min,取上清液于10kD的超滤管中,3000r/min离心10min,收集滤液进行真空冷冻干燥,按参考文献[5]方法取上述实验步骤得到的冻干样品、盐酸氨基葡萄糖和寡糖各0.01g,分别加入0.2ml已预热的标记溶液,65℃的水浴锅中保温2h后加入1.2ml丙酮,于15000r/min离心3min,收集沉淀并加入0.05ml样品缓冲溶液(0.08mol/LTris盐酸缓冲溶液,pH6.8+5%SDS+87%甘油+溴酚蓝),混匀 ...
2021/8/19 20:00:36
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浓缩胶浓度为3%,分离胶浓度为17.5%,上样量为10μl,恒定电流为40mA,电泳时间50min条件下,获得最佳壳寡糖分析图谱,按参考文献[4]方法,取1%壳聚糖醋酸溶液,加入1mg/ml的酶溶液,于40℃的水浴锅中反应100min,煮沸10min终止反应,加1mol/LNaOH溶液,4000r/min离心5min,取上清液于10kD的超滤管中,3000r/min离心10min,收集滤液进行真空冷冻干燥,按参考文献[5]方法取上述实验步骤得到的冻干样品、盐酸氨基葡萄糖和寡糖各0.01g,分别加入0.2ml已预热的标记溶液,65℃的水浴锅中保温2h后加入1.2ml丙酮,于15000r/min离心3min,收集沉淀并加入0.05ml样品缓冲溶液(0.08mol/LTris盐酸缓冲溶液,pH6.8+5%SDS+87%甘油+溴酚蓝),混匀 ...
2021/8/19 20:00:36
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胡林森,与对照组比较,PD细胞模型中膜联蛋白A7氧化修饰水平显著降低(P0.05),PC12细胞复苏后,以2×105/ml的密度接种于底面积25cm2的塑料培养瓶(10ml/瓶),于37℃、5%CO2、饱和湿度的培养箱中培养 ...
2021/8/19 9:44:06
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胡林森,与对照组比较,PD细胞模型中膜联蛋白A7氧化修饰水平显著降低(P0.05),PC12细胞复苏后,以2×105/ml的密度接种于底面积25cm2的塑料培养瓶(10ml/瓶),于37℃、5%CO2、饱和湿度的培养箱中培养 ...
2021/8/19 9:44:06
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赵玲,mol/L三羟基甲基氨基甲烷盐酸Tris—HCl,pH8.8分离胶缓冲液):称取18.15gTris,用60ml双蒸水溶解,再用4mol/L盐酸调节至pH8.8,然后定容至100ml,4℃保存,Tris—HCl,pH6.8浓缩胶缓冲液):称取6.06gTris,用60ml双蒸水溶解,再用4mol/L盐酸调节至pH6.8,然后定容至100ml,4℃保存 ...
2021/8/26 9:58:46
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赵玲,mol/L三羟基甲基氨基甲烷盐酸Tris—HCl,pH8.8分离胶缓冲液):称取18.15gTris,用60ml双蒸水溶解,再用4mol/L盐酸调节至pH8.8,然后定容至100ml,4℃保存,Tris—HCl,pH6.8浓缩胶缓冲液):称取6.06gTris,用60ml双蒸水溶解,再用4mol/L盐酸调节至pH6.8,然后定容至100ml,4℃保存 ...
2021/8/26 9:58:46
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pH3~10L,24cm)、IPG缓冲液(pH3~10L)、两性电解质(pharmalyte,pH3~10)、覆盖液、低分子量标准蛋白质、蛋白银染试剂盒、尿素、丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺均为AmershanPharmacia公司产品,30~80mg组织样品于液氮下充分研磨至粉末状,置于400ml裂解液(7mol/Lurea,2mol/Lthiourea,2%NP—40,1%TritonX—100,100mmol/LDTT,5mmol/LPMSF,4%CHAPS,0.5mmol/LEDTA,40mmol/LTris,2%pharmalyte,1mg/mlDNaseⅠ,0.25mg/mlRNaseA)中,充分旋涡混匀,置于37℃孵育箱孵育1h,取出后再充分旋涡,4℃,15000r/min离心30min[2],吸取上清液即为组织的总蛋白质,用BCA蛋白质定量试剂盒测定蛋白质的浓度,(2)平衡:等电聚焦结束后,迅速取出一向的IPG胶条先后置于10ml平衡液A(50mmol/LTrisHCLpH6.8,6mol/Lurea,30%甘油,1%SDS,0.2%DTT)和10ml平衡液B(50mmol/LTrisHCLpH6.8,6mol/Lurea,30%甘油,1%SDS,3%碘乙酰胺,痕量溴酚蓝)中分别平衡15min ...
2021/8/17 11:34:17
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pH3~10L,24cm)、IPG缓冲液(pH3~10L)、两性电解质(pharmalyte,pH3~10)、覆盖液、低分子量标准蛋白质、蛋白银染试剂盒、尿素、丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺均为AmershanPharmacia公司产品,30~80mg组织样品于液氮下充分研磨至粉末状,置于400ml裂解液(7mol/Lurea,2mol/Lthiourea,2%NP—40,1%TritonX—100,100mmol/LDTT,5mmol/LPMSF,4%CHAPS,0.5mmol/LEDTA,40mmol/LTris,2%pharmalyte,1mg/mlDNaseⅠ,0.25mg/mlRNaseA)中,充分旋涡混匀,置于37℃孵育箱孵育1h,取出后再充分旋涡,4℃,15000r/min离心30min[2],吸取上清液即为组织的总蛋白质,用BCA蛋白质定量试剂盒测定蛋白质的浓度,(2)平衡:等电聚焦结束后,迅速取出一向的IPG胶条先后置于10ml平衡液A(50mmol/LTrisHCLpH6.8,6mol/Lurea,30%甘油,1%SDS,0.2%DTT)和10ml平衡液B(50mmol/LTrisHCLpH6.8,6mol/Lurea,30%甘油,1%SDS,3%碘乙酰胺,痕量溴酚蓝)中分别平衡15min ...
2021/8/17 11:34:17
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flowerDanshen;VioletflowerDanshen;Storageprotein;Isozyme;PAGE;Biochemicalmarker丹参Salviamiltiorrhiza味苦、性微寒,功能活血祛淤,安神宁心,排脓止痛[1],临床应用范围较广,称取1g鲜材料,冰浴研磨,加入1ml稀释4倍的浓缩胶缓冲液(pH=6.7),冰浴超声提取15min,8000r/min,0℃离心20min,丹参种子蛋白质种类的分析用分步提取法对白花丹参和紫花丹参两品种种子提取得到的水溶性蛋白、盐溶性蛋白、醇溶性蛋白和碱溶性蛋白电泳结果见图2 ...
2021/8/16 20:15:51
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flowerDanshen;VioletflowerDanshen;Storageprotein;Isozyme;PAGE;Biochemicalmarker丹参Salviamiltiorrhiza味苦、性微寒,功能活血祛淤,安神宁心,排脓止痛[1],临床应用范围较广,称取1g鲜材料,冰浴研磨,加入1ml稀释4倍的浓缩胶缓冲液(pH=6.7),冰浴超声提取15min,8000r/min,0℃离心20min,丹参种子蛋白质种类的分析用分步提取法对白花丹参和紫花丹参两品种种子提取得到的水溶性蛋白、盐溶性蛋白、醇溶性蛋白和碱溶性蛋白电泳结果见图2 ...
2021/8/16 20:15:51
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—生育三烯酚(γ—tocotrienol)对人胃癌细胞SGC—7901生长抑制作用,采用离体细胞培养技术,利用细胞生长曲线,单细胞凝胶电泳法、琼脂糖凝胶电泳等方法,观察γ—生育三烯酚对SGC—7901细胞生长抑制及其肿瘤细胞DNA损伤作用,生育三烯酚可明显抑制SGC—7901细胞生长 ...
2021/8/17 4:30:05
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—生育三烯酚(γ—tocotrienol)对人胃癌细胞SGC—7901生长抑制作用,采用离体细胞培养技术,利用细胞生长曲线,单细胞凝胶电泳法、琼脂糖凝胶电泳等方法,观察γ—生育三烯酚对SGC—7901细胞生长抑制及其肿瘤细胞DNA损伤作用,生育三烯酚可明显抑制SGC—7901细胞生长 ...
2021/8/17 4:30:05
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许志军胡林森,从氧化修饰蛋白质的角度探讨帕金森病(PD)的发病机制,帕金森病;发病机制;氧化修饰;蛋白质组学;细胞骨架蛋白 ...
2021/8/16 2:29:06
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许志军胡林森,从氧化修饰蛋白质的角度探讨帕金森病(PD)的发病机制,帕金森病;发病机制;氧化修饰;蛋白质组学;细胞骨架蛋白 ...
2021/8/16 2:29:06
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培养NIH3T3细胞,H2O2造成细胞氧化损伤,单细胞凝胶电泳技术(SCGE,CometAssay)检测细胞DNA的损伤情况,DNAdamageandthereparationinNIH3T3mousefibroblastsbysinglecellgelelectrophoresis,cellgelelectrophoresistechnique(SCGE);singlestrandbreaks(SSB);oxidantinducedDNAdamage;DNAreparation ...
2021/8/16 20:01:07
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培养NIH3T3细胞,H2O2造成细胞氧化损伤,单细胞凝胶电泳技术(SCGE,CometAssay)检测细胞DNA的损伤情况,DNAdamageandthereparationinNIH3T3mousefibroblastsbysinglecellgelelectrophoresis,cellgelelectrophoresistechnique(SCGE);singlestrandbreaks(SSB);oxidantinducedDNAdamage;DNAreparation ...
2021/8/16 20:01:07
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结果:鹿茸水溶性总蛋白、鹿托盘水溶性总蛋白和鹿骨水溶性总蛋白的相对含量及组成差异极其明显,SDS聚丙烯酰铵凝胶电泳法及BCATM蛋白含量测定法是鉴别鹿茸、鹿托盘及鹿骨有效方法,梅花鹿鹿茸、鹿托盘及鹿骨水溶性总蛋白含量测定各取100g梅花鹿鹿茸粉、鹿托盘粉及鹿骨粉得到水溶性蛋白粗品分别为17.1g、8.0g、0.1g,使用PIERCE公司生产的BCATM蛋白试剂盒测定浓度,粗品蛋白中蛋白含量分别为93%、88%、73%,可见鹿茸水溶性总蛋白明显可见有8条带,其分子量大约分别为110KD、100KD、66KD、51KD、43KD、35KD、30KD、14KD ...
2021/8/19 1:42:07
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代写论文,ProtEinElectophoresisofFarmCultivarsofFructusTrichosanthisfromShandong毕业论文,1~7号为山东产瓜蒌的农家栽培品种,原植物为栝楼TrichosantheskirilowiiMaxim.,8号为栝楼野生种的果实,9号为湖北栝楼TrichosantheshupehensisC.Y.ChengetYueh的果实论文代写 ...
2021/8/21 8:58:47
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方法免疫抑制法检测血清标本心肌型肌酸激酶同工酶(CKMB)、肌酸激酶(CK)活性,计算二者比值,CKMB%(电泳法)+CKBB%(电泳法)≈1/2CKMB/CK(免疫抑制法),2.490份标本中CKBB的组织含量60%标本43份,50%标本29份,经CK同工酶电泳所得CKBB的测量值分别为[(26.76±8.56)vs(19.28±6.32),P0.01] ...
2021/8/19 22:02:05
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方法免疫抑制法检测血清标本心肌型肌酸激酶同工酶(CKMB)、肌酸激酶(CK)活性,计算二者比值,CKMB%(电泳法)+CKBB%(电泳法)≈1/2CKMB/CK(免疫抑制法),2.490份标本中CKBB的组织含量60%标本43份,50%标本29份,经CK同工酶电泳所得CKBB的测量值分别为[(26.76±8.56)vs(19.28±6.32),P0.01] ...
2021/8/19 22:02:05
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DYYIII2稳压稳流电泳仪(北京市六一仪器厂),DYCZ28A型垂直板电泳槽(北京市六一仪器厂),BCD225AG型电冰箱,电热恒温培养箱,离心机,JA1203型电子分析天平,真空干燥器,微量进样器,定量可调微量移液器,烧杯,量筒,刻度吸管,离心管,大培养皿,玻璃注射器,剪刀,研钵等,试剂分离胶缓冲液,分离胶贮液,浓缩胶缓冲液,浓缩胶贮液,电极缓冲液,40%蔗糖溶液,过硫酸铵溶液,四甲基乙二胺,溴酚蓝指示剂,醋酸联苯胺显色液,脱色液等,样品液的制备取新鲜样品2~5g,加适量稀释4倍的电极缓冲液,冰浴研磨成匀浆,冷冻离心机中3000r/min离心15min,取其上清液,加入等体积蔗糖溶液,混匀,存于冰箱内备用 ...
2021/8/21 20:33:45
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“恩五叶蜜”绞股蓝过氧化氢同功酶,探讨其指纹鉴定依据,材料本实验所用的“恩五叶蜜”绞股蓝鲜活株取自湖北民族学院生科院苗圃,g联苯胺加少量无水乙醇溶解,依次加入5mol/LHAC10ml,5mol/LNaAC10ml,重蒸馏水70ml,最后加入3~5滴双氧水 ...
2021/8/25 4:23:48
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“恩五叶蜜”绞股蓝过氧化氢同功酶,探讨其指纹鉴定依据,材料本实验所用的“恩五叶蜜”绞股蓝鲜活株取自湖北民族学院生科院苗圃,g联苯胺加少量无水乙醇溶解,依次加入5mol/LHAC10ml,5mol/LNaAC10ml,重蒸馏水70ml,最后加入3~5滴双氧水 ...
2021/8/25 4:23:48
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建立脾肾虚型重症肌无力患者血清蛋白质双向电泳图谱,观察脾肾虚型重症肌无力患者与正常人血清蛋白质差异表达情况,SDS—PAGE垂直电泳采用12.5%的均匀SDS2聚丙烯酰胺凝胶(水23.2ml,30%丙烯酰胺溶液32.46ml,1.5mol/LTris—HCl缓冲液pH8.820ml,10%SDS0.8ml,10%APS0.4ml,TEMED3.76μl,胶总体积80ml),基质辅助激光解吸电离—飞行时间质谱分析用手术刀片切下胶上目标条带,进行切胶、胶上胰蛋白酶酶解20h,抽提酶解肽段,ZipTip脱盐后点样,行基质辅助激光解吸电离—飞行时间质谱(matrixassistedlaserdesorption/ionizationtimeofflightmassspectrometry,MALDI—TOF—MS)分析(飞行管长2.7m,加速电压20kV,反射电压23kV) ...
2021/8/16 20:08:14
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onDifferencesamongHighandLowDifferentiationColorectalCarcinomaTissues,国内外已有应用蛋白质组学技术研究大肠癌细胞株发生、耐药和转移机制的报道[3,4],在本研究中将蛋白质组学方法用于比较高、低分化大肠癌组织差异表达蛋白,本研究中用于蛋白质组研究的组织标本取自中南大学湘雅医院普外科,共10例,经病理诊断5例为高分化腺癌(高分化组),5例为低分化腺癌(低分化组) ...
2021/8/22 23:43:26
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onDifferencesamongHighandLowDifferentiationColorectalCarcinomaTissues,国内外已有应用蛋白质组学技术研究大肠癌细胞株发生、耐药和转移机制的报道[3,4],在本研究中将蛋白质组学方法用于比较高、低分化大肠癌组织差异表达蛋白,本研究中用于蛋白质组研究的组织标本取自中南大学湘雅医院普外科,共10例,经病理诊断5例为高分化腺癌(高分化组),5例为低分化腺癌(低分化组) ...
2021/8/22 23:43:26
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测定朝鲜族新生儿脐带血血红蛋白中γG136/(γG136+γA136)比值,并分析其意义.[方法]采用血红蛋白解链、聚丙烯酰胺凝胶电泳分离法和电泳光密度法测定160例延边朝鲜族新生儿脐带血血红蛋白中γG136/(γG136+γA136)的比值.[结果]1例(0.63%)γG136/(γG136+γA136)比值在20%~48%区间,胎儿血红蛋白存在两种类型的γ链,即γG136和γA136,由γG,γA2个不等位基因所表达.新生儿出生时γG136/γA136比值为7∶3,6个月以后可达到成人(4∶6)的水平.已知γG,γA链存在于所有人群中,而有些新生儿的γG136/γA136比值明显高于或低于7∶3,基因图谱分析发现这些新生儿常有γ链基因异常[1,2].此外,某些人群及民族γ链基因异常的发生频率间亦存在差异,因此对某人群的新生儿血红蛋白γG136/γA136比值的测定对研究人类遗传变异和基因调节机制具有重要的意义.
,脐带血取自延边大学医院妇产科产室所接生的160例朝鲜族新生儿,取样后立即冷冻于液氮中. ...
2021/8/17 7:18:27
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测定朝鲜族新生儿脐带血血红蛋白中γG136/(γG136+γA136)比值,并分析其意义.[方法]采用血红蛋白解链、聚丙烯酰胺凝胶电泳分离法和电泳光密度法测定160例延边朝鲜族新生儿脐带血血红蛋白中γG136/(γG136+γA136)的比值.[结果]1例(0.63%)γG136/(γG136+γA136)比值在20%~48%区间,胎儿血红蛋白存在两种类型的γ链,即γG136和γA136,由γG,γA2个不等位基因所表达.新生儿出生时γG136/γA136比值为7∶3,6个月以后可达到成人(4∶6)的水平.已知γG,γA链存在于所有人群中,而有些新生儿的γG136/γA136比值明显高于或低于7∶3,基因图谱分析发现这些新生儿常有γ链基因异常[1,2].此外,某些人群及民族γ链基因异常的发生频率间亦存在差异,因此对某人群的新生儿血红蛋白γG136/γA136比值的测定对研究人类遗传变异和基因调节机制具有重要的意义.
,脐带血取自延边大学医院妇产科产室所接生的160例朝鲜族新生儿,取样后立即冷冻于液氮中. ...
2021/8/17 7:18:27
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kD、152kD、134kD、118kD、103kD、98kD、84kD、62kD、54kD、43kD,这些稳定检出的10条蛋白条带分子量分别为200kD、152kD、134kD、118kD、103kD、98kD、84kD、62kD、54kD、43kD,图3为肺结核性胸水和肺腺癌性胸水两类混合胸水的蛋白条带波形图,可见肺结核性胸水和肺腺癌性胸水的蛋白条带波形基本相似,在分子量50~60kD区间,肺结核性胸水的蛋白含量高于肺腺癌性胸水 ...
2021/8/21 4:25:35
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kD、152kD、134kD、118kD、103kD、98kD、84kD、62kD、54kD、43kD,这些稳定检出的10条蛋白条带分子量分别为200kD、152kD、134kD、118kD、103kD、98kD、84kD、62kD、54kD、43kD,图3为肺结核性胸水和肺腺癌性胸水两类混合胸水的蛋白条带波形图,可见肺结核性胸水和肺腺癌性胸水的蛋白条带波形基本相似,在分子量50~60kD区间,肺结核性胸水的蛋白含量高于肺腺癌性胸水 ...
2021/8/24 16:10:36
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kD、152kD、134kD、118kD、103kD、98kD、84kD、62kD、54kD、43kD,这些稳定检出的10条蛋白条带分子量分别为200kD、152kD、134kD、118kD、103kD、98kD、84kD、62kD、54kD、43kD,图3为肺结核性胸水和肺腺癌性胸水两类混合胸水的蛋白条带波形图,可见肺结核性胸水和肺腺癌性胸水的蛋白条带波形基本相似,在分子量50~60kD区间,肺结核性胸水的蛋白含量高于肺腺癌性胸水 ...
2021/8/24 16:10:36
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kD、152kD、134kD、118kD、103kD、98kD、84kD、62kD、54kD、43kD,这些稳定检出的10条蛋白条带分子量分别为200kD、152kD、134kD、118kD、103kD、98kD、84kD、62kD、54kD、43kD,图3为肺结核性胸水和肺腺癌性胸水两类混合胸水的蛋白条带波形图,可见肺结核性胸水和肺腺癌性胸水的蛋白条带波形基本相似,在分子量50~60kD区间,肺结核性胸水的蛋白含量高于肺腺癌性胸水 ...
2021/8/21 4:25:35
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strippH3—10NL,IPGstrippH5—8,17cm)、urea、CHAPS、TBP、DTT、Bio—Lyte3/10Ampholyte、IAM、SDS、Tris、丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺、甘氨酸、CBB—G250均为BIO—RAD公司产品,取4份经常规培养的急性早幼粒白血病细胞株(NB4)1×107细胞各重悬于350μl蛋白质裂解缓冲液中(8mol/LUrea,2g/LCHAPS,2mmol/LTBP,2ml/LCarrierAmpholyte,痕量溴酚兰),置冰浴中超声裂解,静置30分钟,15500×g离心30分钟,取上清,进行蛋白质定量,胶条,先后分别置于含DTT平衡液1(6mol/Lurea,2g/LSDS,0.05mol/LTrispH8.8,200ml/Lgylcecol,2g/L)及含碘乙酰胺平衡液2(同平衡液1,但其中DTT换为2.5g/L碘乙酰胺)中轻微摇荡各10分钟 ...
2021/7/7 22:02:49
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88888888 ...
2021/8/15 4:58:46
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2021/8/15 4:58:46
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rrrrlgrllrgrlrlglglxvgrllrglrrRRrglrlrvrxrlrlrlrRrvrgrrrxvblvrrrllbblglrrllbrggrbrrrllvrlrzrlvrrlzrrrrlrrrlr关键词蛋白质组学;研究方法;蛋白质分离Krr;rr;rr图分类Q93 献标识码 编0063(00)0303030 引言蛋白质组是指种细胞、组织乃至种生物所表达全部蛋白质,对蛋白质功能进行分析是比较复杂实验操作但是了研究蛋白质不生物通路上作用对蛋白质功能研究是必须因应该考虑使用不适用方法进行研究,就蛋白组学研究方法做了总结包括蛋白质获取以及蛋白质含量测定、功能分析再到蛋白质组鉴定着重介绍了研究程涉及到技术以期能够想开展蛋白质组学研究人员提供参考也希望能对蛋白组学技术发展起到铺垫作用 ...
2022/1/6 1:42:49
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Tris—HCl(PH8.0)、0.5MEDTA(PH8.0)、CTAB提取液、3mol/L醋酸钠(PH5.6)1.2方法1.2.1基因组DNA的提取参考文献[2]提取基因组DNA,对提取产物的PCR检测[3—4]1.2.3.1设计引物18S:18SrDNACaMV35s:promoterfromcanliflomermosaicvirus,花椰菜花叶病毒35S启动子NOS:nopalinesynthaselerminator,胭脂碱合成酶3’转录终止子1.2.3.2PCR反应体系按照WizardPCRprepsDNAPurificationSystem试剂盒要求进行PCR反应,2.2PCR检测2.2.1内标的检测分别对番茄样品DNA用18SrDNA引物进行PCR扩增,如果出现预期大小的条带,则说明提取出的基因组DNA能够经过PCR扩增得出特定序列,可进一步用于外源基因检测并进行转基因成分的判定 ...
2021/11/23 0:19:10
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秦书俭,N末端激酶(JNK)在胚胎小鼠脑发育中的作用,分别取胚龄10、12、14、16、18天及新生鼠大脑称重,PBS冲洗,迅速置于液氮冷冻,—70℃冰箱保存 ...
2021/8/19 22:42:15
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秦书俭,N末端激酶(JNK)在胚胎小鼠脑发育中的作用,分别取胚龄10、12、14、16、18天及新生鼠大脑称重,PBS冲洗,迅速置于液氮冷冻,—70℃冰箱保存 ...
2021/8/27 3:55:25
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脉冲场凝胶电泳(pulse—fieldgelelectrophoresis,PFGE),又称脉冲式交变电场电泳,该技术是将电泳电场方向交替性改变,并优化脉冲时间和其他条件,可以分辨凝胶中35~10000kb的DNA分子,a1.MolecularepidemiologyofClostridiumperfringensrelatedtofood—borneoutbreaksofdiseaseinFinlandfrom1984to1999[J].ApplEnvironMicrobiol,2002(8):3744—3749.
,al.ClonallinesofSalmonellaentericaserotypeEnteritidisdocumentedbyIS200—,ribo—,pulsed—fieldgelelectrophoresisandRFLPtyping[J].JMedMicrobiol,1994,40(1):15—22. ...
2021/10/10 11:04:01
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将耻垢分枝杆菌20μl悬液接种到2mlLB液体培养基中,37℃振荡培养,取对数生长期细胞进行实验,不同浓度INH处理前后mc2155细胞生长变化情况,不同浓度INH处理前后mc2155细胞生长曲线(略) ...
2021/8/12 23:40:27
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将耻垢分枝杆菌20μl悬液接种到2mlLB液体培养基中,37℃振荡培养,取对数生长期细胞进行实验,不同浓度INH处理前后mc2155细胞生长变化情况,不同浓度INH处理前后mc2155细胞生长曲线(略) ...
2021/8/12 23:40:27
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组织培养取消毒后的金钗石斛野生苗茎尖作为外植体依次分别接种在培养基①MS+0.5mg/L6—BA+0.1mg/LNAA+2.0%蔗糖,②MS+0.2mg/L6—BA+0.3mg/LIBA+0.05mg/LNAA+2.0%蔗糖和③1/2MS+0.1~0.5mg/LIBA+0.5~2.0mg/LNAA(含椰汁和香蕉提取物)上进行诱导、增殖和生根培养,μl反应体系,其中模板DNA70~80ng,2.5μl25mmol/LMgCl2,2μl10×Buffer,2μl2.5mmol/LdNTPs(总的dNTP为10mmol/L),0.5μl5U/μlTaq酶,3μl5μmol/L选择性引物,1μl5μmol/L反向引物(北京鼎国合成),DALP—PCR的建立和引物组合的筛选根据文献资料[6,7],通过对DALP—PCR反应体系中引物浓度、上下游引物量的比例和不同的退火温度等几个条件的摸索,得到了扩增金钗石斛基因组DNA最佳DALP—PCR反应体系和扩增程序,分别为:采用20μl反应体系,其中模板DNA70~80ng,2.5μl25mmol/LMgCl2,2μl10×Buffer,2μl2.5mmol/LdNTPs(总的dNTP为10mmol/L),0.5μl5U/μlTaq酶,3μl5μmol/L选择性引物,1μl5μmol/L反向引物;扩增程序95℃预变性5min,然后先进行12个循环:94℃变性30s,55℃复性30s,72℃延伸1min,该循环复性温度为0.5℃梯度降温;然后再进行18个循环:94℃变性30s,50℃复性30s,72℃延伸1min;最后,72℃延伸10min ...
2021/8/19 7:05:35
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段承刚陶忠桦何涛,探讨八肽胆囊收缩素(CCK8)对糖尿病大鼠胰岛细胞损伤的保护作用,CCK8可能通过刺激特异蛋白质的表达,对糖尿病大鼠受损胰岛细胞起到一定的保护和恢复作用 ...
2021/8/15 5:50:46
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段承刚陶忠桦何涛,探讨八肽胆囊收缩素(CCK8)对糖尿病大鼠胰岛细胞损伤的保护作用,CCK8可能通过刺激特异蛋白质的表达,对糖尿病大鼠受损胰岛细胞起到一定的保护和恢复作用 ...
2021/8/15 5:50:46
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125阴性卵巢上皮性恶性肿瘤患者血清相关蛋白检测及其意义,本研究取卵巢上皮性恶性肿瘤和卵巢良性肿瘤、盆腔良性病变患者及正常妇女血清(后三者简称正常组)进行CA125检测,并采用双向电泳质谱(twodimensionalgelelectrophoresismassspectrometry,2DEMS)技术来分离和鉴定生理状态与病理状态的差异表达蛋白,为进一步研究卵巢上皮性恶性肿瘤发病机制及有效的诊疗手段提供实验依据,选择受试者200例,年龄46~68岁,其中CA125阴性的卵巢上皮性恶性肿瘤患者100例,卵巢良性肿瘤患者50例,盆腔良性病变患者(包括子宫内膜异位症、盆腔炎性包块)25例,正常妇女25例,共收集血清200份,置于—70℃冰箱保存 ...
2021/8/10 1:02:17
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125阴性卵巢上皮性恶性肿瘤患者血清相关蛋白检测及其意义,本研究取卵巢上皮性恶性肿瘤和卵巢良性肿瘤、盆腔良性病变患者及正常妇女血清(后三者简称正常组)进行CA125检测,并采用双向电泳质谱(twodimensionalgelelectrophoresismassspectrometry,2DEMS)技术来分离和鉴定生理状态与病理状态的差异表达蛋白,为进一步研究卵巢上皮性恶性肿瘤发病机制及有效的诊疗手段提供实验依据,选择受试者200例,年龄46~68岁,其中CA125阴性的卵巢上皮性恶性肿瘤患者100例,卵巢良性肿瘤患者50例,盆腔良性病变患者(包括子宫内膜异位症、盆腔炎性包块)25例,正常妇女25例,共收集血清200份,置于—70℃冰箱保存 ...
2021/8/10 1:02:17
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目的:探讨中枢神经系统疾病患者脑脊液出现免疫球蛋白IgG特异性寡克隆区带的临床意义,1.2.2标本处理须将脑脊液及血清标本的IgG浓度稀释为10mg/L,℃的恒温状态及20W的持续电流下进行,累计达到80Vh ...
2021/8/13 8:22:35
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目的:探讨中枢神经系统疾病患者脑脊液出现免疫球蛋白IgG特异性寡克隆区带的临床意义,1.2.2标本处理须将脑脊液及血清标本的IgG浓度稀释为10mg/L,℃的恒温状态及20W的持续电流下进行,累计达到80Vh ...
2021/8/13 8:22:35
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要:凝胶成像分析在生物及医药研究中已成为越来越重要的研究手段,对先进的FluorChemQ凝胶成像分析系统应用进行了初步阐述,该仪器运用到教学实践当中,使科研工作者对凝胶成像仪有进一步的了解,同时使得学生初步了解该仪器,提高学生的实践运用能力,达到理论与实践相结合的目的,数据分析报告3日常维护注意事项(1)仪器电脑专机专用,以免感染病毒无法使用,禁止重装电脑系统,因重装后仪器软件需再次激活才能使用,必须向厂家再次申请注册号,耽误仪器使用,且要负担一定的服务费用,Q凝胶成像分析系统在实验教学中的应用FluorChemQ凝胶成像分析系统是一款集多种功能于一身的仪器,既能采集核酸电泳图像,还进一步开发出了蛋白化学发光及蛋白荧光图像采集等功能,避免了蛋白图像采集过程在暗室中的显影、定影等操作过程及不可控程度 ...
2021/10/29 4:32:01
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试剂L—DMEM培养基、南美洲胎牛血清(FBS、海克隆),杜仲(产地云南),0.25%胰酶(GIBCO公司),矿物油、标准蛋白、CHAPS、DTT、Indoacetamide(sigma),尿素(BBI),硫脲(天津市化学试剂一厂),PH3—10两性电解质(Bio—Rad),考马斯亮蓝(G2250、R2250)、低熔点琼脂糖、苯甲基磺酰氟(PMSF)、三羟甲基胺基甲烷(Tris)、N,N‘—甲叉双丙烯酰胺、甘氨酸、十二烷基磺酸钠(SDS)、溴酚蓝、甘油、无水碳酸钠、硫代硫酸钠、三氟乙酸(TFA)、无水甲醇、无水乙醇、冰醋酸为国产分析纯,购于广州威佳公司,cm2培养瓶(Coning),酶标仪(Thermo),CO2培养箱(Heraeus),注射器针头滤器,0.22μm滤膜(MILLIpore),SIGMA—3K15离心机(sigma),双向电泳仪器:MultiphorII(Amersham)、ProteanIIxicell(Bio—Rad),IPG固相胶条(17cm,PH:3—10,Bio—Rad),PDQuest凝胶分析软件(7.3.0版本)(美国Bio—Rad公司)、Powerlook2100XL凝胶图像扫描仪(美国UMAX公司)、质谱仪器4700proteomicsAnalyzer(ABI公司),超低温冰箱(SANYO),细胞总蛋白的提取及定量细胞解冻后用10mmol/LTris/250mmol/LSrirose(pH7.0)洗涤3次,加入2ml裂解液〔8mol/L尿素,4%(W/V)CHAPS,65mmol/LDTT,2%PHarmalyte—10〕混匀,加50μg/mlRNase及200μg/mlDnase,在4℃放置15min,再14000r/min,4℃离心30min,上清bradford法测浓度,—80℃保存 ...
2021/8/27 6:18:59
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试剂L—DMEM培养基、南美洲胎牛血清(FBS、海克隆),杜仲(产地云南),0.25%胰酶(GIBCO公司),矿物油、标准蛋白、CHAPS、DTT、Indoacetamide(sigma),尿素(BBI),硫脲(天津市化学试剂一厂),PH3—10两性电解质(Bio—Rad),考马斯亮蓝(G2250、R2250)、低熔点琼脂糖、苯甲基磺酰氟(PMSF)、三羟甲基胺基甲烷(Tris)、N,N‘—甲叉双丙烯酰胺、甘氨酸、十二烷基磺酸钠(SDS)、溴酚蓝、甘油、无水碳酸钠、硫代硫酸钠、三氟乙酸(TFA)、无水甲醇、无水乙醇、冰醋酸为国产分析纯,购于广州威佳公司,cm2培养瓶(Coning),酶标仪(Thermo),CO2培养箱(Heraeus),注射器针头滤器,0.22μm滤膜(MILLIpore),SIGMA—3K15离心机(sigma),双向电泳仪器:MultiphorII(Amersham)、ProteanIIxicell(Bio—Rad),IPG固相胶条(17cm,PH:3—10,Bio—Rad),PDQuest凝胶分析软件(7.3.0版本)(美国Bio—Rad公司)、Powerlook2100XL凝胶图像扫描仪(美国UMAX公司)、质谱仪器4700proteomicsAnalyzer(ABI公司),超低温冰箱(SANYO),细胞总蛋白的提取及定量细胞解冻后用10mmol/LTris/250mmol/LSrirose(pH7.0)洗涤3次,加入2ml裂解液〔8mol/L尿素,4%(W/V)CHAPS,65mmol/LDTT,2%PHarmalyte—10〕混匀,加50μg/mlRNase及200μg/mlDnase,在4℃放置15min,再14000r/min,4℃离心30min,上清bradford法测浓度,—80℃保存 ...
2021/8/27 6:18:59
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BP230,BP230/180andBP230/180combinedwithminorantigensinvolvedinacutephaseofBPpatient,mainlyintheremissionofthedisease.AutoantigenBP180werenotminorantigen.【Keywords,2.3ml,1.5MpH8.8Tris—HCl2.5ml,双蒸水5ml,10%SDS0.1ml,10%APS0.1ml,TEMED10μl) ...
2021/8/16 0:40:26
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BP230,BP230/180andBP230/180combinedwithminorantigensinvolvedinacutephaseofBPpatient,mainlyintheremissionofthedisease.AutoantigenBP180werenotminorantigen.【Keywords,2.3ml,1.5MpH8.8Tris—HCl2.5ml,双蒸水5ml,10%SDS0.1ml,10%APS0.1ml,TEMED10μl) ...
2021/8/16 0:40:26
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当前,细菌耐药性问题日趋严重,给临床治疗带来困难,对卜内酞胺类抗生素而言,某些菌青霉素结合蛋白(PBps)改变造成的耐药性,是卜内酞胺类抗生素的特点,制备凝胶薄片(厚0.2cm),凝胶配方:分离胶(10%):Aerylamide:bis(30:0.5)6.7ml,Tris(pH8.8,1.5ml/l)5ml,10%SDS0.2ml,蒸馏水8.1ml,真空搅拌10一15min除去气体,再加入TEMED,浓缩胶(5%):按上述配方依次为1.7ml,2.5ml,0.1而,5.6ml,7.5,和150,氖标记物穿透力较弱,用一般放射自显影方法不能得出图象,本实验采用荧光放射自显影法(6—8)(Fluoro,aphy),检测聚丙烯酞胺凝胶片上3H标记的蛋白质,有一定的优点 ...
2021/8/17 3:07:25
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当前,细菌耐药性问题日趋严重,给临床治疗带来困难,对卜内酞胺类抗生素而言,某些菌青霉素结合蛋白(PBps)改变造成的耐药性,是卜内酞胺类抗生素的特点,制备凝胶薄片(厚0.2cm),凝胶配方:分离胶(10%):Aerylamide:bis(30:0.5)6.7ml,Tris(pH8.8,1.5ml/l)5ml,10%SDS0.2ml,蒸馏水8.1ml,真空搅拌10一15min除去气体,再加入TEMED,浓缩胶(5%):按上述配方依次为1.7ml,2.5ml,0.1而,5.6ml,7.5,和150,氖标记物穿透力较弱,用一般放射自显影方法不能得出图象,本实验采用荧光放射自显影法(6—8)(Fluoro,aphy),检测聚丙烯酞胺凝胶片上3H标记的蛋白质,有一定的优点 ...
2021/8/17 3:07:25
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micromolecularproteininhumanserumwithimprovedTricine—SDS—PAGEsystem,磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、氯化钠、尿素、丙烯酰铵、N,N′—甲叉双丙烯酰铵、过硫酸铵、盐酸、氢氧化钠、甘油、溴酚蓝、三氯乙酸(TCA)、甲醇、戊二醛、醋酸、考马斯亮蓝G250、低分子量蛋白质标准品、三羟甲基氨基甲烷(Tris)、三羟甲基甲基甘氨酸(Tricine)、二硫苏糖醇(DTT)、3—[(3—胆酰胺丙基)—二乙胺]—丙磺酸(CHAPS)、十二烷基硫酸钠(SDS)、四甲基乙二胺(TEMED)(上海生工生物工程有限责任公司),内槽装阴极缓冲液,外槽用阳极缓冲液恒压电泳,先40V约15h,当样品进入分离胶时,电压升至60V约15h ...
2021/8/18 21:13:16
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°C放置2h,离心(6000×g,20min,4℃),收集沉淀,用少量去离子水溶解,对去离子水充分透析,离心(10000×g,10min,4℃),所得上清液即为山合欢蛋白酶抑制剂粗提物,置—20°C下储存,明胶—Tricine—SDS—PAGE采用Schagger等人建立的Tricine系统[11]并略加修改,分离胶为12%(W/V)丙烯酰胺,0.32%(W/V)双丙烯酰胺,0.2%(W/V)明胶,10%(W/V)甘油,0.75MTris—HCl,pH8.45,0.1%SDS,8.9)缓冲液为阳极缓冲液,以0.1MTris,0.1MTricine,0.1%SDS(pH8.25)缓冲液为阴极缓冲液,电流大小为1mA/孔,当溴酚蓝迁移至凝胶底部时停止电泳 ...
2021/8/23 22:40:55
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°C放置2h,离心(6000×g,20min,4℃),收集沉淀,用少量去离子水溶解,对去离子水充分透析,离心(10000×g,10min,4℃),所得上清液即为山合欢蛋白酶抑制剂粗提物,置—20°C下储存,明胶—Tricine—SDS—PAGE采用Schagger等人建立的Tricine系统[11]并略加修改,分离胶为12%(W/V)丙烯酰胺,0.32%(W/V)双丙烯酰胺,0.2%(W/V)明胶,10%(W/V)甘油,0.75MTris—HCl,pH8.45,0.1%SDS,8.9)缓冲液为阳极缓冲液,以0.1MTris,0.1MTricine,0.1%SDS(pH8.25)缓冲液为阴极缓冲液,电流大小为1mA/孔,当溴酚蓝迁移至凝胶底部时停止电泳 ...
2021/8/23 22:40:55
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DifferentProteomesbetweentheAcuteLeukemiaCellsandNormalWhiteBloodCells,DifferentiallyexpressedproteinsbetweenALandnormalwhitebloodcellsidentifiedbyMALDI—TOF—MS,在建立各型AL细胞2—DE图谱后,将在AL各型中均存在的区别于正常白细胞的蛋白点定义为差异表达点,我们加大双向电泳中的蛋白上样量(1mg),用考马斯亮蓝染色方法进行染色,找到对应的差异点,切出蛋白点后进行脱色、胶内胰酶酶切和肽段提取,然后用MALDI—TOF/MS进行肽质量指纹谱(PMF)分析 ...
2021/8/7 5:26:05
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DifferentProteomesbetweentheAcuteLeukemiaCellsandNormalWhiteBloodCells,DifferentiallyexpressedproteinsbetweenALandnormalwhitebloodcellsidentifiedbyMALDI—TOF—MS,在建立各型AL细胞2—DE图谱后,将在AL各型中均存在的区别于正常白细胞的蛋白点定义为差异表达点,我们加大双向电泳中的蛋白上样量(1mg),用考马斯亮蓝染色方法进行染色,找到对应的差异点,切出蛋白点后进行脱色、胶内胰酶酶切和肽段提取,然后用MALDI—TOF/MS进行肽质量指纹谱(PMF)分析 ...
2021/8/7 5:26:05
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2021/8/15 0:13:45
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2021/8/15 0:13:45
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2021/8/12 8:29:55
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[编]005―70(009)7―0799―0,[摘要]目综合征是种因三体导致常见染色体病研究采用RR快速鉴定综合征额外染色体,方法R扩增5染色体上R位变性聚丙烯酰胺凝胶电泳半定量分析 ...
2021/10/30 17:22:30
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摘要:采用稀释平板-刚果红染色法从腐木中分离到1株产耐高温纤维素酶的菌株CY15-10,
,rDNA序列分析,鉴定该菌株为多粘类芽孢杆菌(Paenibacilluspolymyxa) ...
2021/12/13 8:24:59
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(1)福氏痢疾杆菌标准株:菌株号51571—9(中国药品生物制品检定所),(3)诱导耐多药株:使用志贺菌标准株和分离出的敏感株,参考文献〔1〕的次抑菌浓度(1/2MIC)诱导耐多药方法,建立诱导耐多药株,次抑菌浓度(1/2MIC)诱导耐多药结果志贺菌出发菌的抑菌浓度(MIC)分别为头孢噻吩32mg/L,诺氟沙星05mg/L,庆大霉素2mg/L,磺胺甲基异恶唑512mg/L ...
2021/8/21 7:52:31
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words:Agkistrodonacutussnakevenom;thrombinlikeenzyme;subunitseparation;proteinNterminalsequencing.
,自1993年起,本课题组尝试从尖吻蝮蛇蛇毒中分离具有止血功能的类凝血酶,CAPS电转移缓冲液取200mL的CAPS储存液(CAPS22.13g,加去离子水至900mL,用2mol/LNaOH调pH值至11.0,定容至1L),加甲醇200mL和去离子水1600mL ...
2021/8/23 20:45:36
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应用蛋白质组学技术研究6羟基多巴胺(6OHDA)诱导SHSY5Y细胞帕金森病(PD)模型中1433蛋白的表达变化,6OHDA诱导SHSY5Y细胞的PD模型中1433蛋白表达上调,提示1433蛋白上调可能与PD的发病机制有关,6羟基多巴胺;SHSY5Y;帕金森病;1433蛋白;IDGE ...
2021/8/13 19:10:46
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应用蛋白质组学技术研究6羟基多巴胺(6OHDA)诱导SHSY5Y细胞帕金森病(PD)模型中1433蛋白的表达变化,6OHDA诱导SHSY5Y细胞的PD模型中1433蛋白表达上调,提示1433蛋白上调可能与PD的发病机制有关,6羟基多巴胺;SHSY5Y;帕金森病;1433蛋白;IDGE ...
2021/8/13 19:10:46
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应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定部分差异蛋白质,并用WesternBlot、免疫细胞化学技术验证表达差异蛋白质.结果:正常人及RA患者滑膜成纤维细胞蛋白2DE凝胶图谱上分别平均显示896和992个点.有64个蛋白质点表达存在2倍以上的差异.选取9个在RA滑膜成纤维细胞中表达上调的蛋白质点进行质谱鉴定,成功鉴定出钙结合蛋白S100A4和S100A10两个蛋白质.经WesternBlot、免疫细胞化学技术验证这两个蛋白在RA滑膜成纤维细胞中表达上调,与上述结果一致,并且发现S100A4在RA滑膜成纤维细胞中的表达分布发生了变化.结论:结合蛋白S100A4和S100A10可能参与RA的发病.S100A4在细胞中的表达易位可能与RA滑膜成纤维细胞表型改变有关.
,细胞总蛋白质的制备[5]取3~5代培养滑膜细胞,待细胞生长至融合期时,吸出培养液,用胰酶消化,PBS液洗涤细胞3次后,加入细胞裂解液(尿素7mol/L,硫脲2mol/L,CHAPS40g/L,DTT65mmol/L,pharmalyte2g/L)充分混匀,14000g,4℃离心1h,取上清,用Bradford方法测定蛋白含量,并分装于—80℃冻存备用.
,Blot验证差异蛋白将20μg滑膜总蛋白加入2×SDS上样缓冲液(0.1mol/LTrispH6.8,0.2mmol/LDTT,40g/LSDS,200mL/L甘油,2g/L溴酚蓝),100℃变性5min,上样,120V120g/LSDSPAGE电泳2h,1mA/cm2胶面积电转30min.含50g/L脱脂奶粉的TBST室温封闭1h,分别加入抗S100A4,S100A10抗体,4℃振荡孵育膜过夜.TBST洗膜10min×3次.加入HRP标记的二抗,室温1h.TBST洗膜10min×3次.凝胶成像分析仪化学发光检测,扫描、保存、分析图像. ...
2021/8/15 22:56:36
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应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定部分差异蛋白质,并用WesternBlot、免疫细胞化学技术验证表达差异蛋白质.结果:正常人及RA患者滑膜成纤维细胞蛋白2DE凝胶图谱上分别平均显示896和992个点.有64个蛋白质点表达存在2倍以上的差异.选取9个在RA滑膜成纤维细胞中表达上调的蛋白质点进行质谱鉴定,成功鉴定出钙结合蛋白S100A4和S100A10两个蛋白质.经WesternBlot、免疫细胞化学技术验证这两个蛋白在RA滑膜成纤维细胞中表达上调,与上述结果一致,并且发现S100A4在RA滑膜成纤维细胞中的表达分布发生了变化.结论:结合蛋白S100A4和S100A10可能参与RA的发病.S100A4在细胞中的表达易位可能与RA滑膜成纤维细胞表型改变有关.
,细胞总蛋白质的制备[5]取3~5代培养滑膜细胞,待细胞生长至融合期时,吸出培养液,用胰酶消化,PBS液洗涤细胞3次后,加入细胞裂解液(尿素7mol/L,硫脲2mol/L,CHAPS40g/L,DTT65mmol/L,pharmalyte2g/L)充分混匀,14000g,4℃离心1h,取上清,用Bradford方法测定蛋白含量,并分装于—80℃冻存备用.
,Blot验证差异蛋白将20μg滑膜总蛋白加入2×SDS上样缓冲液(0.1mol/LTrispH6.8,0.2mmol/LDTT,40g/LSDS,200mL/L甘油,2g/L溴酚蓝),100℃变性5min,上样,120V120g/LSDSPAGE电泳2h,1mA/cm2胶面积电转30min.含50g/L脱脂奶粉的TBST室温封闭1h,分别加入抗S100A4,S100A10抗体,4℃振荡孵育膜过夜.TBST洗膜10min×3次.加入HRP标记的二抗,室温1h.TBST洗膜10min×3次.凝胶成像分析仪化学发光检测,扫描、保存、分析图像. ...
2021/8/15 22:56:36
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extractionofDNAofGastrodiaelata.scapeinanimprovedSDSmethod;【Abstract,;;1.2.1;天麻基因组DNA提取;本研究在Edwards等(1991)[2,3]提取DNA方法的基础上,做了以下改进,具体操作步骤如下:(1)取新鲜和幼嫩的天麻花葶用70%的乙醇清洗表面,用灭菌去离子水冲洗干净,本试验采用SDS法提取天麻基因组DNA,SDS法操作简单,温和,可提取到较高分子量DNA,经DNA的质量检测显示,其分子量太小约23.2kb,点样孔不发亮,DNA主带清晰,无弥散带,无明显的RNA带,说明天麻的RNA、蛋白质、多糖以及其他次生代谢物质去除的比较干净,纯度较高(见图1) ...
2021/8/16 5:19:06
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extractionofDNAofGastrodiaelata.scapeinanimprovedSDSmethod;【Abstract,;;1.2.1;天麻基因组DNA提取;本研究在Edwards等(1991)[2,3]提取DNA方法的基础上,做了以下改进,具体操作步骤如下:(1)取新鲜和幼嫩的天麻花葶用70%的乙醇清洗表面,用灭菌去离子水冲洗干净,本试验采用SDS法提取天麻基因组DNA,SDS法操作简单,温和,可提取到较高分子量DNA,经DNA的质量检测显示,其分子量太小约23.2kb,点样孔不发亮,DNA主带清晰,无弥散带,无明显的RNA带,说明天麻的RNA、蛋白质、多糖以及其他次生代谢物质去除的比较干净,纯度较高(见图1) ...
2021/8/16 5:19:06
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words:HedyotisdiffusaWilld;CEMcell;Growthinhibition;Apoptosis,绘制细胞生长曲线取对数生长期的CEM细胞制成细胞悬液,调整细胞数为5×104/ml进行实验,将细胞悬液接种于96孔培养板,每孔190μl,实验组分别加入3种不同浓度的白花蛇舌草水提物(每孔终浓度分别为0.64,3.2,16μg/ml)10μl,对照组不加药,只加含血清的RPMI1640培养基10μl,每组3个复孔,每隔24h随机抽取各实验组及对照组3个孔的细胞,按台盼蓝拒染法染色,光镜下计数活细胞数,取平均值,以时间为横坐标,每毫升活细胞数为纵坐标绘制生长曲线,DNA琼脂糖凝胶电泳取对数生长期的CEM细胞制成细胞悬液,调整细胞数为3×105/ml进行实验,将细胞悬液接种于培养皿,每个培养皿5ml细胞悬液,即细胞数为1.5×106 ...
2021/8/26 16:08:59
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words:HedyotisdiffusaWilld;CEMcell;Growthinhibition;Apoptosis,绘制细胞生长曲线取对数生长期的CEM细胞制成细胞悬液,调整细胞数为5×104/ml进行实验,将细胞悬液接种于96孔培养板,每孔190μl,实验组分别加入3种不同浓度的白花蛇舌草水提物(每孔终浓度分别为0.64,3.2,16μg/ml)10μl,对照组不加药,只加含血清的RPMI1640培养基10μl,每组3个复孔,每隔24h随机抽取各实验组及对照组3个孔的细胞,按台盼蓝拒染法染色,光镜下计数活细胞数,取平均值,以时间为横坐标,每毫升活细胞数为纵坐标绘制生长曲线,DNA琼脂糖凝胶电泳取对数生长期的CEM细胞制成细胞悬液,调整细胞数为3×105/ml进行实验,将细胞悬液接种于培养皿,每个培养皿5ml细胞悬液,即细胞数为1.5×106 ...
2021/8/26 16:08:59
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青霉素结合蛋白苯唑西林亲和力,本文应用微生物生化研究方法,从金葡球菌标准株ATCC25923中提取细菌内膜蛋白,采用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)、荧光放射自显影术及竞争分析法,研究了苯唑西林与金葡球菌标准株ATCC25923细胞内膜青霉素结合蛋白的亲和力,探讨苯唑西林杀菌作用的分子学基础,金葡球菌标准株ATCC25923,获自中国科学院菌种保存中心 ...
2021/8/25 0:00:45
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青霉素结合蛋白苯唑西林亲和力,本文应用微生物生化研究方法,从金葡球菌标准株ATCC25923中提取细菌内膜蛋白,采用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)、荧光放射自显影术及竞争分析法,研究了苯唑西林与金葡球菌标准株ATCC25923细胞内膜青霉素结合蛋白的亲和力,探讨苯唑西林杀菌作用的分子学基础,金葡球菌标准株ATCC25923,获自中国科学院菌种保存中心 ...
2021/8/25 0:00:45
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studyonrathepatocytesproteinsafterhypoxicpreconditioningbytwo—dimensionalgelelectrophoresischenwei,wuzhiyong,sunyongwei,etal.departmentofgeneralsurgery,renjihospital,shanghaijiaotonguniversity,schoolofmedicine,shanghai200127,hotterg,closad,etal.theprotectiveroleofadenosineininducingnitricoxidesynthesisinratliverischemiapreconditioningismediatedbyactivationofadenosinea2receptors[j].hepatology,1999,29(1):126—132.
,wangxh.roleofnf—kappabaseffectorofipcindonorliversbeforelivertransplantationinrats[j].transplantproc,2006,38(5):1584—1587. ...
2021/9/9 0:13:04
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2021/8/22 14:29:55
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摘要:在遗传学实验教学中,亲子鉴定实验是对遗传学基本定律的实际应用,通过该实验,熟悉实验过程和分析技术,掌握亲子鉴定的原理与技术,深入理解孟德尔定律的内涵,本实验属于综合性实验,涉及到了基本的分子生物学技术,也进行了实验和分析技术的改进 ...
2021/8/11 16:22:37
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摘要:在遗传学实验教学中,亲子鉴定实验是对遗传学基本定律的实际应用,通过该实验,熟悉实验过程和分析技术,掌握亲子鉴定的原理与技术,深入理解孟德尔定律的内涵,本实验属于综合性实验,涉及到了基本的分子生物学技术,也进行了实验和分析技术的改进 ...
2021/8/11 16:22:37
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PFGE技术分辨力高,是病原微生物分子分型的最佳选择,细菌质粒分析是较早被使用的对病原微生物流行病学进行调查的分子分型技术〔4〕,目前,常用的PCR分型技术有随机扩增的多态性DNA技术(RAPD)和重复序列PCR技术(Rep—PCR) ...
2021/8/13 7:36:36
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PFGE技术分辨力高,是病原微生物分子分型的最佳选择,细菌质粒分析是较早被使用的对病原微生物流行病学进行调查的分子分型技术〔4〕,目前,常用的PCR分型技术有随机扩增的多态性DNA技术(RAPD)和重复序列PCR技术(Rep—PCR) ...
2021/8/13 7:36:36
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目的:探讨全自动蛋白电泳系统用于妊娠妇女产前血红蛋白(Hb)病检查的意义,并对3187例测定结果进行分析,结果:检出α地中海贫血(HbH病)5例(0.16%),β地中海贫血120例(3.77%),HbE1例(0.03%),其他异常Hb2例(0.06%),我院将全自动蛋白电泳系统应用于产前妊娠妇女的Hb检查,取得了良好的效果 ...
2021/8/15 12:06:06
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目的:探讨全自动蛋白电泳系统用于妊娠妇女产前血红蛋白(Hb)病检查的意义,并对3187例测定结果进行分析,结果:检出α地中海贫血(HbH病)5例(0.16%),β地中海贫血120例(3.77%),HbE1例(0.03%),其他异常Hb2例(0.06%),我院将全自动蛋白电泳系统应用于产前妊娠妇女的Hb检查,取得了良好的效果 ...
2021/8/15 12:06:06
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28株鲍曼不动杆菌PFGE图谱分为A(A1、A2、A3)、B(B1、B2)、C、D、E五型,其中主要流行型A1亚型11株,流行型B1亚型9株,剩余8株中A2亚型2株,A3亚型2株,B2亚型1株,C型2株,E型1株,28株鲍曼不动杆菌分为A(A1、A2、A3)型15株、B(B1、B2)型9株、C型2株、D型1株、E型1株,A型中有11株条带完全一致,为同一克隆株,定义为A1亚型,由表1可见,在调查的11个月中,该院存在耐头孢哌酮/舒巴坦鲍曼不动杆菌的暴发流行 ...
2021/7/3 4:09:29
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于泳,史玉荣,肖绪祺,方法—普通PCR(GPCR)和巢式PCR(NPCR)的检测结果做一比较,以期找到更为简便、实用的方法,琼脂糖凝胶电泳显示GPCR扩增条带清晰,与NPCR相同,见图1 ...
2021/8/29 14:17:07
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31.2gNaH2PO4—2H2O,溶于1000mL水,个浓度处理组,Cu2+浓度分别为0.000mg/L、0.008mg/L、0.016mg/L、0.032mg/L,并配有平行组,(从左至右编号为1、2、3、4、5、6、7、8,其对应浓度分别为1号和5号:0.032mg/L,2号和6号:0.016mg/L, ...
2021/8/21 9:05:26
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31.2gNaH2PO4—2H2O,溶于1000mL水,个浓度处理组,Cu2+浓度分别为0.000mg/L、0.008mg/L、0.016mg/L、0.032mg/L,并配有平行组,(从左至右编号为1、2、3、4、5、6、7、8,其对应浓度分别为1号和5号:0.032mg/L,2号和6号:0.016mg/L, ...
2021/8/21 9:05:26
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campestrisL.ssp.pekinensis)适应范围广,栽培面积大,是我国第一大蔬菜作物[1],种子蛋白质超薄等电聚焦电泳(Ultrathin—layerIsoelectricFocusing,简称为UTLIEF)是一种简便、快速、准确、经济的蛋白质分离技术,该法在番茄[14]、水稻[15]、玉米[16]、南瓜[17]等品种鉴定上取得较好结果,因此,种子蛋白质超薄等电聚焦电泳是一种可靠、简单、快速、经济的大白菜品种鉴定技术 ...
2021/8/18 2:21:25
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黄竹英,桂嵘,李登清,唐华,细胞培养至对数生长期,弃出培养液,用胰酶消化,PBS洗后约2×106细胞中加入50μL裂解液(8mol/Lurea,40g/LCHAPS,40mmol/LTris,65mmol/LDTT),液氮反复冻融后,加20μLRNase(20g/L)在4℃放置15min,13000r/min,4℃离心30min,收集上清液,样品存放—70℃,采用IPGphor等电聚焦系统,把干胶条置于胶条盒中放置在IPGphor电泳仪上水化(水化液组成为:8mol/Lurea,5g/LCHAPS,2.8g/LDTT及痕量溴酚蓝)15~18h,水化完毕按500V,1000V各1h,8000V5h等电聚焦聚焦结束后,取出胶条,加入平衡液A(8mol/Lurea,0.5mol/LTrisHCl,20g/LSDS,300g/L甘油,1g/LDTT)振荡平衡15min,再换平衡液B(8mol/Lurea,0.5mol/LTrisHCl,20g/LSDS,300g/L甘油,15g/L碘乙酰胺)振荡平衡15min,取出胶条滤干 ...
2021/8/14 13:52:26
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黄竹英,桂嵘,李登清,唐华,细胞培养至对数生长期,弃出培养液,用胰酶消化,PBS洗后约2×106细胞中加入50μL裂解液(8mol/Lurea,40g/LCHAPS,40mmol/LTris,65mmol/LDTT),液氮反复冻融后,加20μLRNase(20g/L)在4℃放置15min,13000r/min,4℃离心30min,收集上清液,样品存放—70℃,采用IPGphor等电聚焦系统,把干胶条置于胶条盒中放置在IPGphor电泳仪上水化(水化液组成为:8mol/Lurea,5g/LCHAPS,2.8g/LDTT及痕量溴酚蓝)15~18h,水化完毕按500V,1000V各1h,8000V5h等电聚焦聚焦结束后,取出胶条,加入平衡液A(8mol/Lurea,0.5mol/LTrisHCl,20g/LSDS,300g/L甘油,1g/LDTT)振荡平衡15min,再换平衡液B(8mol/Lurea,0.5mol/LTrisHCl,20g/LSDS,300g/L甘油,15g/L碘乙酰胺)振荡平衡15min,取出胶条滤干 ...
2021/8/14 13:52:26
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作者:樊慧杰康慧芳姚建强王晓媛杨利军牛勃,GradifracV1.2层析系统,pharamacia公司,取2μLλDNA,分别加入LD1、LD210μL,37℃反应30min后进行0.8%琼脂糖凝胶电泳,EB染色后分析结果 ...
2021/8/19 0:44:05
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作者:樊慧杰康慧芳姚建强王晓媛杨利军牛勃,GradifracV1.2层析系统,pharamacia公司,取2μLλDNA,分别加入LD1、LD210μL,37℃反应30min后进行0.8%琼脂糖凝胶电泳,EB染色后分析结果 ...
2021/8/19 0:44:05
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本文将利用已建立的ITS—RFLP技术,对商品佛手和香橼进行RFLP分析,根据酶切后的电泳结果准确、快速地鉴别商品佛手,材料与试剂论文网,DNA聚合酶(TakaRa),琼脂糖(Promega),限制性内切酶Alul、Mspl(TaKaRa) ...
2021/8/24 13:32:15
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研究青海藏族人群第21号染色体D21S1432、D21S1435、D21S1270、D21S1440、D21S1446、GATA24H09、ATA42C09、GATA129D11等8个STR位点的遗传多态性,8个STR位点多态信息量(Polymorphisminformationcontent,PIC)分别为0.6977、0.6985、0.7116、0.4582、0.6240、0.7340、0.7754、0.7382,累积多态信息量为0.7123,tandemrepeat,STR)已应用于人类群体遗传学及法医学方面[1],以核心序列重复单位数目的变化构成遗传多态性,大多数STR基因座的重复单元为2~6bp片段,人类基因组中,平均每15~20kb就存在一个STR基因座,在众多的STR基因座中,以四碱基重复的STR位点具有突变率较低、稳定性好、易于标准化的特点[2],这一特点为人类群体遗传学研究提供了丰富的信息量遗传标记,然而关于D21S1432、D21S1435、D21S1270、D21S1440、D21S1446、GATA24H09、ATA42C09、GATA129D11的8个STR位点的群体遗传学研究,国内外目前未见报道 ...
2021/8/17 0:29:56
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我们对枸杞多糖诱导人食管癌细胞Eca—109凋亡进行了系统研究,现报道如下,将人食管癌细胞株Eca—109置于RPMI1640培养液中(含10%胎牛血清和青霉素、链霉素各100U/ml),在37℃,饱和湿度,5%CO2培养箱中培养,流式细胞仪检测枸杞多糖对Eca—109癌细胞凋亡的影响不同剂量的枸杞多糖对Eca—109癌细胞有显著的促进细胞凋亡作用,呈剂量依赖关系 ...
2021/8/28 23:27:05
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我们对枸杞多糖诱导人食管癌细胞Eca—109凋亡进行了系统研究,现报道如下,将人食管癌细胞株Eca—109置于RPMI1640培养液中(含10%胎牛血清和青霉素、链霉素各100U/ml),在37℃,饱和湿度,5%CO2培养箱中培养,流式细胞仪检测枸杞多糖对Eca—109癌细胞凋亡的影响不同剂量的枸杞多糖对Eca—109癌细胞有显著的促进细胞凋亡作用,呈剂量依赖关系 ...
2021/8/28 23:27:05
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研究杭州部分地区甲型副伤寒暴发与散发分离菌株的分子流行病学关系及菌株耐药状况,分离自2个地区的15株菌株被分为A、B、C、D共4型,A、B、C等3个型密切近缘,同属一个克隆系,从每起暴发疫情分离菌株中各选择1株以及散发病例分离株作为代表菌株,计15株 ...
2021/8/15 4:03:16
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典灵辉,杨丽,王晓丽,天麻基因组DNA的酶切与连接取加入45μl如下的酶切-连接混和液:ddH2O37.85μl,)1μl ...
2021/8/27 18:23:56
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典灵辉,杨丽,王晓丽,天麻基因组DNA的酶切与连接取加入45μl如下的酶切-连接混和液:ddH2O37.85μl,)1μl ...
2021/8/27 18:23:56
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摘要目进行正常人和冠心病心绞痛血瘀证患者血浆双向电泳图谱检测寻心绞痛血瘀证血浆差异蛋白探心绞痛血瘀证蛋白质组学特,brgrvlrrkrrvlrrgrgl[]rl,000,063638,Q,lRrLlvgLrLvlrgvrxrglrV[]lv,997,9990696 ...
2021/12/26 15:39:30
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尿总蛋白测定及组分分析:将94例实验尿标本行PRM法和BEC法测定尿总蛋白,按电泳中白蛋白百分含量将尿标本分组,分别比较各组两法测定尿总蛋白的结果,按白蛋白占总蛋白含量为96%~100%,81%~95%,66~80%,51%~65%,31%~50%,10%~30%和<10%进行分组,分别标为为1~7组,7组94例尿液采用PRM法和BEC法测定尿总蛋白,两法的校准液均采用稀释50倍的罗氏血清混合校准液,其总蛋白浓度为1.04g/L ...
2021/8/10 21:22:26
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尿总蛋白测定及组分分析:将94例实验尿标本行PRM法和BEC法测定尿总蛋白,按电泳中白蛋白百分含量将尿标本分组,分别比较各组两法测定尿总蛋白的结果,按白蛋白占总蛋白含量为96%~100%,81%~95%,66~80%,51%~65%,31%~50%,10%~30%和<10%进行分组,分别标为为1~7组,7组94例尿液采用PRM法和BEC法测定尿总蛋白,两法的校准液均采用稀释50倍的罗氏血清混合校准液,其总蛋白浓度为1.04g/L ...
2021/8/10 21:22:26
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DR,LermanLS,eta1.Attachmentofa4|D—base—pairG+C—richsequencefGC—clamp)togeno~cDNAfragmentsbythepolymerasechainreactionresultsinimproveddetectionofsinglebasechanges[J].ProcNailAcadSciUSA,1989,86(1):232—236[4,K,KodairaM,eta1.Thelengthpolymorphisminthe5flankingregionofthehumanbeta—globingenewithde—naturinggradientgelelectrophoresisinaJapanesepopulation叨.HumGenet,1991,87(2):219—220【13,KH,eta1.TypingoftheHl—DRB3genebytemperaturegradientgelelectrophoresis.Predictionoftheresolu—tionoffourallelicfragmentsbycomputationalsimulationofDNAmelting[J].JImmunolMethods,1994,168(2):257~265【14 ...
2021/7/24 20:17:41
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探讨用蛋白质组学方法分析人骨髓间充质干细胞(MSCs)定向成骨细胞诱导分化中细胞蛋白表达谱的改变.方法:从人骨髓细胞中分离获得MSCs,经细胞表型及多向分化能力测定鉴定MSCs的纯度和功能后,采用定向成骨细胞分化诱导培养体系,于分化后14d分别提取未分化细胞及分化后细胞的总蛋白,双向电泳分析,确定蛋白差异点,经酶切后行蛋白肽质量指纹谱鉴定差异蛋白表达.结果:双向电泳找到38个蛋白差异点,质谱分析鉴定出23个差异蛋白分子表达.结论:用蛋白质组学方法可高通量筛选与MSCs定向诱导成骨细胞分化相关的重要蛋白.
,间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)是一群具有向成骨细胞、成软骨细胞和脂肪细胞分化能力的干细胞,存在于成体的骨髓、骨、脂肪和肌肉等组织中.MSCs体外贴壁性使之易于分离纯化,且体外培养的MSCs增殖能力强,是一种具有重要应用价值的种子细胞[1].但有关MSCs定向分化的分子机制尚不清楚.为探讨MSCs定向成骨分化过程中细胞内可能具有调控作用的蛋白分子的变化,我们首先从人骨髓单个核细胞中分离获得MSCs,对所获得的MSCs进行了细胞表型及多向分化能力测定,在鉴定MSCs的纯度和功能后,采用定向成骨分化诱导培养体系诱导MSCs定向成骨细胞分化,对未分化MSCs及分化后细胞总蛋白进行提取,经双向电泳比较蛋白差异点,选择差异点蛋白,酶切后进行蛋白点肽质量指纹谱鉴定分析.
,1.2.3.1双向电泳蛋白质样品的制备收集3代以后的MSCs和向成骨诱导分化的细胞,用冷的PBS洗2遍后,加入细胞裂解液(8mol/L尿素,40g/LCHAPS,40mmol/LTrisbase),混匀后用液氮反复冻融,再加入适量RNA酶和DNA酶,冰浴20min.4℃离心(14000g,30min),取上清,Bradford法定量,分装,—70℃保存. ...
2021/8/17 19:36:25
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通过测定小肠引流液中分泌型IgA(sIgA)的含量,观察组胺对老龄大鼠肠黏膜sIgA的分泌调节,给予小剂量组胺肠内灌注,可促进老龄大鼠肠黏膜sIgA的分泌,增加肠液中sIgA的含量,组胺(SigmaAldrich公司) ...
2021/8/16 6:50:46
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通过测定小肠引流液中分泌型IgA(sIgA)的含量,观察组胺对老龄大鼠肠黏膜sIgA的分泌调节,给予小剂量组胺肠内灌注,可促进老龄大鼠肠黏膜sIgA的分泌,增加肠液中sIgA的含量,组胺(SigmaAldrich公司) ...
2021/8/16 6:50:46
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绿色荧光蛋白(GFP)基因的克隆和表达背景知识绿色荧光蛋白(greenfluorescentprotein,GFP)是一类存在于包括水母、水螅和珊瑚等腔肠动物体内的生物发光蛋白,管250μL50μL50μLddH2OddH2O重组质粒4.重组质粒DNA的鉴定(菌落PCR法)(1)挑取菌落随机挑取1个菌落,(2)配12%分离胶8mL,分别取:30%丙烯酰胺3.2mL,1.5MpH8.8Tris—HCl2.08mL,(分离胶缓冲液)10%SDS8μL,TEMED10μL,双蒸水2.64mL混匀后加10%过硫酸铵30μL混匀,灌胶 ...
2021/7/7 17:05:03
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88888888 ...
2021/8/14 17:58:36
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2021/8/14 17:58:36
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2021/10/21 0:15:59
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2021/11/12 4:15:59
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对人胃癌AGS细胞侵袭性的影响,CXCL12在体外可增加人胃癌AGS细胞的体外侵袭性,buffer4μl,dNTP10mmol,RNase20U,MMLV100U,OligodT20pmol,RNA1μg ...
2021/8/12 14:32:17
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对人胃癌AGS细胞侵袭性的影响,CXCL12在体外可增加人胃癌AGS细胞的体外侵袭性,buffer4μl,dNTP10mmol,RNase20U,MMLV100U,OligodT20pmol,RNA1μg ...
2021/8/12 14:32:17
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作者:齐宝宁,易建华,唐国慧,苗江丽,郭剑锋,肝细胞SCGE检测彗星尾长、尾DNA(%)、尾矩、Olive尾矩均增大,组间比较有显著性差异(P0.01),尾矩值与染毒剂量作相关分析,相关系数r为0.981,呈正相关(P0.05),dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathioneperoxidase,GSHPx)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和还原型谷胱甘肽(reducedglutathionehormone,GSH)测试盒均为南京建成生物工程研究所产品 ...
2021/8/21 3:11:34
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体外设计、合成针对survivin基因的小分子干扰RNA(survivin—siRNA),应用脂质体介导survivin—siRNA转染Panc—1细胞后,MTT试验测定转染细胞的增殖抑制率,RT—PCR检测细胞survivinmRNA表达,琼脂糖凝胶电泳分析其对Panc—1细胞凋亡诱导作用,稀释上、下游模板,终浓度均为100μmol/L,分别与T7启动子序列连接,70℃5min,室温5min,37℃延伸30min,体外转录,37℃2h,siRNA的正、反义RNA结合,37℃过夜,去除前导序列和DNA模板,37℃2h,用层析方法纯化siRNA,采用常规方法培养Panc—1细胞,取对数期生长的细胞用于实验 ...
2021/8/24 8:50:25
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目的探讨中药桂枝对MRL小鼠心肌细胞凋亡的作用及对Caspase3基因表达的影响,方法将MRL小鼠分为空白组、强的松组和桂枝组,检测MRL小鼠心肌组织凋亡细胞,计算心肌细胞凋亡指数(AI),RT—PCR法检测心肌细胞凋亡基因Caspase3表达,观察桂枝对MRL小鼠心肌细胞凋亡的影响,结果桂枝能调控心肌细胞凋亡基因Caspase3表达,即抑制Caspase3表达,明显抑制心肌细胞凋亡(心肌细胞凋亡指数显著下降) ...
2021/8/20 7:47:16
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cadmiumchloride;testisindex;DNAdamage;singlecellgelelectrophoresis,处死小鼠后称体重,取出双侧睾丸称重,计算睾丸指数[1],生精细胞DNA损伤率和彗星迁移长度测定采用单细胞凝胶电泳法,取小鼠右侧睾丸,PBS制成细胞悬液,调细胞密度至0.3~0.6×1010个/L,测定细胞活力大于90%后参照文献[3,4]方法进行单细胞凝胶电泳,溴乙锭染色,荧光显微镜观察 ...
2021/8/17 4:57:05
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目的探讨中药桂枝对MRL小鼠心肌细胞凋亡的作用及对Caspase3基因表达的影响,方法将MRL小鼠分为空白组、强的松组和桂枝组,检测MRL小鼠心肌组织凋亡细胞,计算心肌细胞凋亡指数(AI),RT—PCR法检测心肌细胞凋亡基因Caspase3表达,观察桂枝对MRL小鼠心肌细胞凋亡的影响,结果桂枝能调控心肌细胞凋亡基因Caspase3表达,即抑制Caspase3表达,明显抑制心肌细胞凋亡(心肌细胞凋亡指数显著下降) ...
2021/8/20 7:47:16
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cadmiumchloride;testisindex;DNAdamage;singlecellgelelectrophoresis,处死小鼠后称体重,取出双侧睾丸称重,计算睾丸指数[1],生精细胞DNA损伤率和彗星迁移长度测定采用单细胞凝胶电泳法,取小鼠右侧睾丸,PBS制成细胞悬液,调细胞密度至0.3~0.6×1010个/L,测定细胞活力大于90%后参照文献[3,4]方法进行单细胞凝胶电泳,溴乙锭染色,荧光显微镜观察 ...
2021/8/17 4:57:05
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体外设计、合成针对survivin基因的小分子干扰RNA(survivin—siRNA),应用脂质体介导survivin—siRNA转染Panc—1细胞后,MTT试验测定转染细胞的增殖抑制率,RT—PCR检测细胞survivinmRNA表达,琼脂糖凝胶电泳分析其对Panc—1细胞凋亡诱导作用,稀释上、下游模板,终浓度均为100μmol/L,分别与T7启动子序列连接,70℃5min,室温5min,37℃延伸30min,体外转录,37℃2h,siRNA的正、反义RNA结合,37℃过夜,去除前导序列和DNA模板,37℃2h,用层析方法纯化siRNA,采用常规方法培养Panc—1细胞,取对数期生长的细胞用于实验 ...
2021/8/24 8:50:25
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目的研究原阿片碱(protopine)和别隐品碱(allocryptopine)对DNA拓扑异构酶I(TOPOI)活性的影响,琼脂糖凝胶、β—巯基乙醇、溴乙锭(EB)、溴酚蓝、硼酸、甘油、苯酚、十二烷基硫酸钠(SDS)、二甲基亚砜(DMSO)、EDTA(ethylenediamineN,N,N‘,N‘—tetraacetate)、牛血清白蛋白(bovineserumalbumin,BSA)、NaOAc、KCl、MgCl2均购自美国Sigma公司,topoisomeraseI,Sigma,USA) ...
2021/8/18 22:13:45
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将所得DNA样品用TE稀释20倍,紫外可见光分光光度计(TU—1810)测定DNA样品的A260nm和A280nm,以A260/A280比值检测核酸纯度,DNA样品,以0.5倍TBE作电泳缓冲液,在含0.5mg/L溴化乙锭(EB)的0.8%琼脂糖凝胶上恒压100V电泳45min,在凝胶成像系统照相观察,检测DNA样品完整性,min,54℃退火1min,72℃延伸1min,循环35次,72℃最后一次延伸10min ...
2021/8/8 18:35:37
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将所得DNA样品用TE稀释20倍,紫外可见光分光光度计(TU—1810)测定DNA样品的A260nm和A280nm,以A260/A280比值检测核酸纯度,DNA样品,以0.5倍TBE作电泳缓冲液,在含0.5mg/L溴化乙锭(EB)的0.8%琼脂糖凝胶上恒压100V电泳45min,在凝胶成像系统照相观察,检测DNA样品完整性,min,54℃退火1min,72℃延伸1min,循环35次,72℃最后一次延伸10min ...
2021/8/8 18:35:37
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proteincomponentsofskeletalmusclefromthepatientswithmyastheniagravis,常量提取:肌肉样品取米粒大小置微量玻璃匀浆器,加入100μl肌球蛋白提取液Gubstraub溶液(0.3mol/LKCl,0.10mol/LKH2PO4,0.05mol/LK2HPO4,pH6.5),冰浴下制成匀浆,吸出肌肉匀浆,加50μl提取液洗涤,合并匀浆液并放置4℃过夜,10000×g离心15min,上清液再经25000×g离心10min,按Spector[5]方法测定蛋白浓度,000蛋白水平的比较:常量电泳分析,25000蛋白谱带经扫描计算,密度在正常肌肉中为4.14±1.33,MG肌肉中为2.02±1.08,差异有非常显著意义(P<0.001) ...
2021/8/14 18:28:15
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Laryngealneoplasms;NucleartranscriptionfactorkappaB;Westernblot;Electrophoreticmobilityshiftassay(EMSA)核转录因子(NFkB)广泛存在于真核细胞中,通过调控众多下游基因的转录来参与机体的免疫应答、炎症反应、细胞凋亡和肿瘤形成过程,blot法检测NFkBP65蛋白喉癌组织中NFkB蛋白区带加宽,深于正常对照组织(图1),其NFkB蛋白积分光密度值为1?775.87±362.81,癌旁正常组织NFkB蛋白积分光密度值为476.42±53.00,二者比较有统计学意义(t=15.69,t0.05=2.1,P0.05),即喉癌组织中NFkB的蛋白含量明显高于癌旁正常组织,DNA结合活性喉癌组织中有较强的DNA结合活性的NFkB条带(图2),其积分光密度值为10?962.91±2?938.44,而癌旁正常组织NFkBDNA结合活性积分光密度值为1?426.88±70.80,二者比较有统计学意义(t=14.5,t0.05=2.1,P0.05),即喉癌组织中NFkBDNA结合活性明显高于癌旁正常组织 ...
2021/8/21 6:39:55
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Laryngealneoplasms;NucleartranscriptionfactorkappaB;Westernblot;Electrophoreticmobilityshiftassay(EMSA)核转录因子(NFkB)广泛存在于真核细胞中,通过调控众多下游基因的转录来参与机体的免疫应答、炎症反应、细胞凋亡和肿瘤形成过程,blot法检测NFkBP65蛋白喉癌组织中NFkB蛋白区带加宽,深于正常对照组织(图1),其NFkB蛋白积分光密度值为1?775.87±362.81,癌旁正常组织NFkB蛋白积分光密度值为476.42±53.00,二者比较有统计学意义(t=15.69,t0.05=2.1,P0.05),即喉癌组织中NFkB的蛋白含量明显高于癌旁正常组织,DNA结合活性喉癌组织中有较强的DNA结合活性的NFkB条带(图2),其积分光密度值为10?962.91±2?938.44,而癌旁正常组织NFkBDNA结合活性积分光密度值为1?426.88±70.80,二者比较有统计学意义(t=14.5,t0.05=2.1,P0.05),即喉癌组织中NFkBDNA结合活性明显高于癌旁正常组织 ...
2021/8/14 3:55:06
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Laryngealneoplasms;NucleartranscriptionfactorkappaB;Westernblot;Electrophoreticmobilityshiftassay(EMSA)核转录因子(NFkB)广泛存在于真核细胞中,通过调控众多下游基因的转录来参与机体的免疫应答、炎症反应、细胞凋亡和肿瘤形成过程,blot法检测NFkBP65蛋白喉癌组织中NFkB蛋白区带加宽,深于正常对照组织(图1),其NFkB蛋白积分光密度值为1?775.87±362.81,癌旁正常组织NFkB蛋白积分光密度值为476.42±53.00,二者比较有统计学意义(t=15.69,t0.05=2.1,P0.05),即喉癌组织中NFkB的蛋白含量明显高于癌旁正常组织,DNA结合活性喉癌组织中有较强的DNA结合活性的NFkB条带(图2),其积分光密度值为10?962.91±2?938.44,而癌旁正常组织NFkBDNA结合活性积分光密度值为1?426.88±70.80,二者比较有统计学意义(t=14.5,t0.05=2.1,P0.05),即喉癌组织中NFkBDNA结合活性明显高于癌旁正常组织 ...
2021/8/14 3:55:06
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肺表面活性物质结合蛋白D(SurfactantproteinD,SPD)是肺泡表面活性物质(PS)的重要蛋白成分之一[1],在调节表面活性磷脂代谢和肺防御功能方面起重要作用[2],临床上应用合成的肺表面活性物质治疗呼吸窘迫综合征、胎粪吸入综合征等肺部疾病[3],TrisHCl和10mmol/LEDTA,调节pH值为7.4,室温下搅拌1h,在4℃下10000g离心40min,取上清液配制成20mmol/LCaCl2,重调pH至7.4,得SPD粗提物,共提取9只大鼠BALF的SPD,浓缩后的SPD干粉经电子天平称量,获得0.1311gSPD ...
2021/8/10 1:17:16
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肺表面活性物质结合蛋白D(SurfactantproteinD,SPD)是肺泡表面活性物质(PS)的重要蛋白成分之一[1],在调节表面活性磷脂代谢和肺防御功能方面起重要作用[2],临床上应用合成的肺表面活性物质治疗呼吸窘迫综合征、胎粪吸入综合征等肺部疾病[3],TrisHCl和10mmol/LEDTA,调节pH值为7.4,室温下搅拌1h,在4℃下10000g离心40min,取上清液配制成20mmol/LCaCl2,重调pH至7.4,得SPD粗提物,共提取9只大鼠BALF的SPD,浓缩后的SPD干粉经电子天平称量,获得0.1311gSPD ...
2021/8/10 1:17:16
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探讨转化生长因子β(TGFβ)Ⅱ型受体基因突变、微卫星不稳定性(MSI)在大肠腺瘤癌变过程中的作用,ofTransformingGrowthFactorβⅡReceptorGeneinColorectalAdenomaCarcinogenesis,转化生长因子β(transforminggrowthfactorβ,TGFβ)是人体多种上皮组织细胞的负生长调控因子,但研究发现,不同的细胞株对TGFβ的反应不同,并且某些肿瘤细胞存在着逃逸TGFβ负调控作用的现象 ...
2021/8/13 9:26:46
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探讨转化生长因子β(TGFβ)Ⅱ型受体基因突变、微卫星不稳定性(MSI)在大肠腺瘤癌变过程中的作用,ofTransformingGrowthFactorβⅡReceptorGeneinColorectalAdenomaCarcinogenesis,转化生长因子β(transforminggrowthfactorβ,TGFβ)是人体多种上皮组织细胞的负生长调控因子,但研究发现,不同的细胞株对TGFβ的反应不同,并且某些肿瘤细胞存在着逃逸TGFβ负调控作用的现象 ...
2021/8/13 9:26:46
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作者:李圣青,赵峰,戚好文,张晓君,赵馨,潘刚,吴哲,王宇,阙海萍,刘少君,二硫苏糖醇(DTT)、尿素(Urea)、十二烷基硫酸钠(SDS)、甘氨酸(glycine)、琼脂糖(agarose)、甘油(glycerol)、溴酚蓝(bromophenolblue)、3(3胆胺丙基)二甲氨基1丙磺酸(CHAPS)、苯甲基磺酰氟(PMSF)、两性电解质(CA)、丙烯酰胺(acrylamide)、甲叉丙烯酰胺(N,Nmethylenebisacrylamide)、三羟甲基氨基甲烷(Tris)、碘乙酰胺(iodoacetamide)、四乙基乙二胺(TEMED)、低分子质量标准蛋白、IPG缓冲液、IPG覆盖液和IPG干胶条(3—10NL和3—10L,18cm)均购自AmershamPharmacia公司,考马斯亮蓝R250购自Amresco公司,双向电泳所有溶液均用MilliQ水配制,Urea,40g/LCHAPS,10g/LDTT,5mL/LCA,1mmol/LEDTA,35mg/LPMSF,0.7mg/L抑肽素,0.5mg/L亮肽素),15℃,40000×g,离心1h,取上清 ...
2021/7/9 17:14:28
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目的:研究蛇床愈伤组织形态发生过程中过氧化物酶活性的变化与过氧化物酶同工酶的差异,植物组织培养过程中形态发生的途径有两条,不同分化程度的愈伤组织过氧化物酶的活性测定实验结果表明,分化芽和产生胚状体的愈伤组织,酶活性高于未分化的愈伤组织,说明过氧化物酶活性与愈伤组织分化程度呈正相关 ...
2021/8/10 16:50:25
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目的:研究蛇床愈伤组织形态发生过程中过氧化物酶活性的变化与过氧化物酶同工酶的差异,植物组织培养过程中形态发生的途径有两条,不同分化程度的愈伤组织过氧化物酶的活性测定实验结果表明,分化芽和产生胚状体的愈伤组织,酶活性高于未分化的愈伤组织,说明过氧化物酶活性与愈伤组织分化程度呈正相关 ...
2021/8/10 16:50:25
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王海燕赵明明马明王宇,ml(成分为25mmol/L蔗糖,75mmol/L甘露糖,50μmol/L乙二胺四乙酸钾盐(EDTAK),10mmol/LTrisHCl,0.1mol/LKCl,并加入肝素50U/ml,pH调至7.2),在冰浴中匀浆,各组大鼠海马线粒体COX基因表达的影响 ...
2021/8/18 11:15:53
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王海燕赵明明马明王宇,ml(成分为25mmol/L蔗糖,75mmol/L甘露糖,50μmol/L乙二胺四乙酸钾盐(EDTAK),10mmol/LTrisHCl,0.1mol/LKCl,并加入肝素50U/ml,pH调至7.2),在冰浴中匀浆,各组大鼠海马线粒体COX基因表达的影响 ...
2021/8/18 11:15:53
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作者:曹飞麟,朱敏,谢伯剑,甘梅富,潘印,徐东,周申康,毕铁男,mRNA分别在87.50%和83.33%乳腺癌组织中表达,而仅在16.67%和31.25%癌旁组织中表达,癌组织与癌旁组织COX—2mRNA和VEGFmRNA的表达差异有显著意义,Cyclooxygenase—2andVEGFinBreastCancerandItsSignificance ...
2021/8/7 20:51:06
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作者:曹飞麟,朱敏,谢伯剑,甘梅富,潘印,徐东,周申康,毕铁男,mRNA分别在87.50%和83.33%乳腺癌组织中表达,而仅在16.67%和31.25%癌旁组织中表达,癌组织与癌旁组织COX—2mRNA和VEGFmRNA的表达差异有显著意义,Cyclooxygenase—2andVEGFinBreastCancerandItsSignificance ...
2021/8/7 20:51:06
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[目的]探讨吉林省延边地区朝鲜族人群短串联重复序列(STR)基因座DXS6854的遗传多态性分布,获取相应多态位点的群体遗传学数据.[方法]采用PCR扩增技术及聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,分析101名朝鲜族女性和160名朝鲜族男性个体的DXS6854STR基因座等位基因频率.[结果]在女性样本DXS6854基因座中各检测出6种等位基因和17种不同的基因型,基因座多态性分布符合HardyWeinberg平衡定律,杂合度为0.7723,多态信息含量为0.67,个人识别率为0.857,tandemrepeat,STR)通常由长度为2~6bp的核心序列串联重复而成,广泛存在于人类DNA编码区及非编码区,具有高度遗传多态性[1],并遵循孟德尔遗传规律.目前,关于常染色体和Y染色体STR的研究较多,但X染色体STR多态性研究报道少见.X染色体STR遗传多态性对法医学个人识别和亲子鉴定等起重要的作用,如父女关系确定及缺少双亲的姐妹之间关系确定等[2,3].本研究应用PCR扩增技术对吉林省延边地区朝鲜族人群DXS6854基因座多态性进行了实验研究,获得了群体遗传多态性资料,为相关疾病的诊断、法医学个人识别及亲子鉴定提供依据.
,参照人类基因数据库(Humangenomedatabase)资料设计PCR引物序列,并由GenoTech公司(韩国)提供.反应体系总量为20μL,内含100g/L10×缓冲液,0.5μmol/L引物,50kU/LTaq酶,DNA2μL(20~30mg/L),最终用去离子水补充不足.将样品混匀后置入GeneAmpPCR2400系统(PerkinElmer,CA)中进行扩增,其参数为96℃预变性3min,94℃变性30s,61℃退火30s,70℃延伸30s,共循环30次后于72℃继续延伸10min,产物置于4℃条件下保存. ...
2021/8/13 14:25:07
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[目的]探讨吉林省延边地区朝鲜族人群短串联重复序列(STR)基因座DXS6854的遗传多态性分布,获取相应多态位点的群体遗传学数据.[方法]采用PCR扩增技术及聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,分析101名朝鲜族女性和160名朝鲜族男性个体的DXS6854STR基因座等位基因频率.[结果]在女性样本DXS6854基因座中各检测出6种等位基因和17种不同的基因型,基因座多态性分布符合HardyWeinberg平衡定律,杂合度为0.7723,多态信息含量为0.67,个人识别率为0.857,tandemrepeat,STR)通常由长度为2~6bp的核心序列串联重复而成,广泛存在于人类DNA编码区及非编码区,具有高度遗传多态性[1],并遵循孟德尔遗传规律.目前,关于常染色体和Y染色体STR的研究较多,但X染色体STR多态性研究报道少见.X染色体STR遗传多态性对法医学个人识别和亲子鉴定等起重要的作用,如父女关系确定及缺少双亲的姐妹之间关系确定等[2,3].本研究应用PCR扩增技术对吉林省延边地区朝鲜族人群DXS6854基因座多态性进行了实验研究,获得了群体遗传多态性资料,为相关疾病的诊断、法医学个人识别及亲子鉴定提供依据.
,参照人类基因数据库(Humangenomedatabase)资料设计PCR引物序列,并由GenoTech公司(韩国)提供.反应体系总量为20μL,内含100g/L10×缓冲液,0.5μmol/L引物,50kU/LTaq酶,DNA2μL(20~30mg/L),最终用去离子水补充不足.将样品混匀后置入GeneAmpPCR2400系统(PerkinElmer,CA)中进行扩增,其参数为96℃预变性3min,94℃变性30s,61℃退火30s,70℃延伸30s,共循环30次后于72℃继续延伸10min,产物置于4℃条件下保存. ...
2021/8/13 14:25:07
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本文旨在探讨选取GroEL基因片段,运用PCR—RFLP和PCR—SSCP技术,进行大肠杆菌不同血清型别的鉴定,以期为临床快速鉴别诊断及流行病学调查提供方法依据,引物序列是:P上游5’AGTTACCCT(CT)GG(TC)CC(AG)AAAG3’(对应于大肠杆菌GroEL基因84—103位核苷酸),20μl酶切反应体系含10×酶切缓冲液2μl,1mg/mlBSA2μl,PCR纯化产物3μl(1μg),限制性内切酶1μl(3~4U),补足ddH2O至20μl,在37℃酶切2.5h ...
2021/8/15 22:05:36
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本文旨在探讨选取GroEL基因片段,运用PCR—RFLP和PCR—SSCP技术,进行大肠杆菌不同血清型别的鉴定,以期为临床快速鉴别诊断及流行病学调查提供方法依据,引物序列是:P上游5’AGTTACCCT(CT)GG(TC)CC(AG)AAAG3’(对应于大肠杆菌GroEL基因84—103位核苷酸),20μl酶切反应体系含10×酶切缓冲液2μl,1mg/mlBSA2μl,PCR纯化产物3μl(1μg),限制性内切酶1μl(3~4U),补足ddH2O至20μl,在37℃酶切2.5h ...
2021/8/15 22:05:36
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目的应用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术,对甲氧西林耐药溶血性葡萄球菌(MRSH)进行基因多态性研究,methicillinresistance;randomamplifiedpolymorphicDNAtechnique;staphylococcus,而甲氧西林耐药溶血性葡萄球菌(Methicillinresistantsta—phylococcihaemolyticus,MRSH)的多重耐药情况则是CoNS中最严重的 ...
2021/8/14 4:56:35
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目的应用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术,对甲氧西林耐药溶血性葡萄球菌(MRSH)进行基因多态性研究,methicillinresistance;randomamplifiedpolymorphicDNAtechnique;staphylococcus,而甲氧西林耐药溶血性葡萄球菌(Methicillinresistantsta—phylococcihaemolyticus,MRSH)的多重耐药情况则是CoNS中最严重的 ...
2021/8/14 4:56:35
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链霉菌JK—1HMWDNA脉冲电泳注:M:LowrangePFGEMarker(NEB产品),图2链霉菌JK—1HMWDNA的BamHI不完全酶切注:M:LowrangePFGEMarker(NEB产品),456个克隆,覆盖了链霉菌JK—1基因组至少17.3倍 ...
2021/8/21 6:03:04
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研究通生物信息学软件对恶臭假单胞菌甲基趋化受体蛋白()进行筛选然对其进行克隆和表达结表明克隆得到可稳定表达通对恶臭假单胞菌甲基趋化受体蛋白纯化及分析其与不配体物质热力学作用强弱以期出恶臭假单胞菌特异性趋化受体进步阐明其趋化机理恶臭假单胞菌对植物促生效应提供理论支撑,编码039690066500080500brlgrrgrzrbrbrrrkgblrgrrvrlrrlrlzlrzrrlxrlxrrr()bgvrlbrrlxrrlllxrblrgrlxrrrlrrlglxrrlrxgvrlrggrrglKrlgrrgrzrbr,下步尝试采用低温低速诱导方式使能够可溶性表达并采用固定金属亲和层析法分离纯化得到有活性纯蛋白然通等温滴定(rlrlrr)和热漂移试验(lrbrl)分析与各类不趋化物质(配体)亲和力即热力学作用强弱以期出恶臭假单胞菌特异性趋化受体进步阐明其趋化机理恶臭假单胞菌对植物促生效应提供理论支撑 ...
2021/9/21 6:40:41
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观察过量碘化物对原代培养的猪甲状腺细胞凋亡的诱导作用,并对机制作初步探讨,过量碘化物诱导了原代培养的猪甲状腺细胞凋亡,可能通过活性氧机制启动凋亡,过量碘化物对体外培养的猪甲状腺细胞的作用未见报道,其诱导甲状腺细胞凋亡的机制尚未阐明 ...
2021/8/27 1:35:27
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观察过量碘化物对原代培养的猪甲状腺细胞凋亡的诱导作用,并对机制作初步探讨,过量碘化物诱导了原代培养的猪甲状腺细胞凋亡,可能通过活性氧机制启动凋亡,过量碘化物对体外培养的猪甲状腺细胞的作用未见报道,其诱导甲状腺细胞凋亡的机制尚未阐明 ...
2021/8/27 1:35:27
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本实验共分6组,分为以脂质体介导反义寡核苷酸组(ASODN/Lip)、无义寡核苷酸组(NODN/Lip)及RPMI1640培养液的空白对照组(Lip),转染人乳腺癌MCF—7细胞系,应用Hoechst33258/PI双重染色观察MCF—7细胞的形态学改变,透射电镜观察细胞超微结构,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡的变化,DNA凝胶电泳观察凋亡情况,研究Survivin反义寡核苷酸对MCF—7乳腺癌细胞的生长抑制作用,流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期细胞转染结束后培养48h,每组收集2×106个细胞,预冷的70%乙醇4℃固定24h,PBS洗涤3次,细胞重悬于0.4mlPBS中,加入10.15mg/m1的PnaseA37℃孵育1h,1g/mlPI4℃染色过夜,流式细胞仪检测凋亡细胞的比率和细胞周期,处理后的MCF—7细胞经Hoechst33528/PI双重染色后,表现为细胞体积缩小,细胞完整、细胞膜皱缩、染色质浓缩边聚呈新月形、细胞核固缩与断裂、核仁消失,在细胞核或细胞质内可见浓染致密的颗粒状荧光的即为早期凋亡细胞(见图1,2) ...
2021/8/13 4:14:55
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本实验共分6组,分为以脂质体介导反义寡核苷酸组(ASODN/Lip)、无义寡核苷酸组(NODN/Lip)及RPMI1640培养液的空白对照组(Lip),转染人乳腺癌MCF—7细胞系,应用Hoechst33258/PI双重染色观察MCF—7细胞的形态学改变,透射电镜观察细胞超微结构,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡的变化,DNA凝胶电泳观察凋亡情况,研究Survivin反义寡核苷酸对MCF—7乳腺癌细胞的生长抑制作用,流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期细胞转染结束后培养48h,每组收集2×106个细胞,预冷的70%乙醇4℃固定24h,PBS洗涤3次,细胞重悬于0.4mlPBS中,加入10.15mg/m1的PnaseA37℃孵育1h,1g/mlPI4℃染色过夜,流式细胞仪检测凋亡细胞的比率和细胞周期,处理后的MCF—7细胞经Hoechst33528/PI双重染色后,表现为细胞体积缩小,细胞完整、细胞膜皱缩、染色质浓缩边聚呈新月形、细胞核固缩与断裂、核仁消失,在细胞核或细胞质内可见浓染致密的颗粒状荧光的即为早期凋亡细胞(见图1,2) ...
2021/8/13 4:14:55
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取新鲜血清2ml,加入等量PBS和饱和硫酸铵溶液,混匀后静止30min,3000rpm离心10min,沉淀物即是γ球蛋白,将γ球蛋白通过SephadexG25层析作用,用PBS洗脱,除去蛋白质中的小分子铵盐,从而达到γ球蛋白纯化的目的,把纯化的γ球蛋白、正常猪血清及标准蛋白(2mg/ml)分别用含巯基乙醇的样品缓冲液处理,用12%分离胶进行SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)[4],作进一步对照验证 ...
2021/8/15 13:33:46
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取新鲜血清2ml,加入等量PBS和饱和硫酸铵溶液,混匀后静止30min,3000rpm离心10min,沉淀物即是γ球蛋白,将γ球蛋白通过SephadexG25层析作用,用PBS洗脱,除去蛋白质中的小分子铵盐,从而达到γ球蛋白纯化的目的,把纯化的γ球蛋白、正常猪血清及标准蛋白(2mg/ml)分别用含巯基乙醇的样品缓冲液处理,用12%分离胶进行SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)[4],作进一步对照验证 ...
2021/8/15 13:33:46
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[摘要]目的:运用基于8位点的PCR—荧光探针法检测人Y染色体AZF区微缺失情况,分析其结果的可靠性并探讨其对严重少精或无精症患者的临床意义,结果:Y染色体微缺失总发生率为6.00%,非梗阻性无精子症组为9.26%,结论:Y染色体AZF区与精子生成关系密切,严重少精子症或非梗阻性无精子症男性行辅助生殖技术前应筛查其微缺失情况 ...
2021/8/11 1:24:36
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[摘要]目的:运用基于8位点的PCR—荧光探针法检测人Y染色体AZF区微缺失情况,分析其结果的可靠性并探讨其对严重少精或无精症患者的临床意义,结果:Y染色体微缺失总发生率为6.00%,非梗阻性无精子症组为9.26%,结论:Y染色体AZF区与精子生成关系密切,严重少精子症或非梗阻性无精子症男性行辅助生殖技术前应筛查其微缺失情况 ...
2021/8/11 1:24:36
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目检测汉族、哈萨克族湿热痹阻证类风湿关节炎患者信通路基因以期发现不民族类风湿关节炎患者信通路上表现机制是否存差异进步研究类风湿关节炎发病机制及临床治疗提供理论依据,①临床症状及体征关节疼痛视觉模拟评分法(V)评分、晨僵、疾病活动评分(8)、关节功能分级,论研究发现组患者RB、L、b、R 水平比较差异有统计学义(相关热词哈萨克族汉族湿热</ ...
2021/11/14 15:07:50
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同时采用流式细胞术(FCM)进行CD4+CD28—T细胞测定,分析HLA与CD4+CD28—T细胞的相关性,DRB1*04和DRB1*01等位基因与CD4+CD28—T淋巴细胞数量相关,表达DRB1*04和DRB1*01的患者有高百分比的CD4+CD28—T淋巴细胞,而表达DRB1*15的所有患者却有低数量的CD4+CD28—T淋巴细胞,CD3PerCPmAb,PECD4mAb和FITCCD28mAb,对照管加入20μLPE鼠IgG1、PerCP鼠IgG1和FITC鼠IgG1,混匀,室温避光孵育30min ...
2021/8/19 5:07:26
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同时采用流式细胞术(FCM)进行CD4+CD28—T细胞测定,分析HLA与CD4+CD28—T细胞的相关性,DRB1*04和DRB1*01等位基因与CD4+CD28—T淋巴细胞数量相关,表达DRB1*04和DRB1*01的患者有高百分比的CD4+CD28—T淋巴细胞,而表达DRB1*15的所有患者却有低数量的CD4+CD28—T淋巴细胞,CD3PerCPmAb,PECD4mAb和FITCCD28mAb,对照管加入20μLPE鼠IgG1、PerCP鼠IgG1和FITC鼠IgG1,混匀,室温避光孵育30min ...
2021/8/19 5:07:26
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随着纳米科技的飞速发展,人们对纳米材料的研究也越来越深入,下面是小编搜集整理的一篇探究蛋白质与纳米金颗粒相互作用的论文范文,欢迎阅读参考,蛋白质可以通过物理作用吸附在纳米颗粒表面,通过与纯的AP—AuNPs相比较我们认为,图中与AP—AuNPs在同一水平位置的条带为没有吸附上BSA的AP—AuNPs,图中微滞后的条带为吸附上一条BSA的AP—AuNPs. ...
2021/9/7 23:38:43
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StabilityofmPEGModifiedRedBloodCells,modifiedredbloodcell;Rhantigen;redbloodcell,μl,加10倍体积的PBS(pH7.4),4℃放置30分钟,3500×g/min离心10分钟,弃上清,加入600μl的低渗磷酸缓冲液,4℃放置30分钟,3500×g/min离心10分钟,弃上清,低渗磷酸缓冲液洗涤4次,3500×g/min离心10分钟,沉淀即为血影细胞 ...
2021/7/9 8:54:28
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许云禄,目的从舟山眼镜蛇蛇毒中分离L氨基酸氧化酶(LAO),测定其理化和酶学性质,mg);凝胶柱:SephadexG1002.6cm×100cm;洗脱液:HAcNaAc缓冲液(0.05mol/L,pH5.8,含0.05mol/LNaCl);流速:16mL/h,4管/h;阴影部分为L氨基酸氧化酶活性组分. ...
2021/8/12 9:30:16
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许云禄,目的从舟山眼镜蛇蛇毒中分离L氨基酸氧化酶(LAO),测定其理化和酶学性质,mg);凝胶柱:SephadexG1002.6cm×100cm;洗脱液:HAcNaAc缓冲液(0.05mol/L,pH5.8,含0.05mol/LNaCl);流速:16mL/h,4管/h;阴影部分为L氨基酸氧化酶活性组分. ...
2021/8/16 0:38:26
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许云禄,目的从舟山眼镜蛇蛇毒中分离L氨基酸氧化酶(LAO),测定其理化和酶学性质,mg);凝胶柱:SephadexG1002.6cm×100cm;洗脱液:HAcNaAc缓冲液(0.05mol/L,pH5.8,含0.05mol/LNaCl);流速:16mL/h,4管/h;阴影部分为L氨基酸氧化酶活性组分. ...
2021/8/16 0:38:26
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许云禄,目的从舟山眼镜蛇蛇毒中分离L氨基酸氧化酶(LAO),测定其理化和酶学性质,mg);凝胶柱:SephadexG1002.6cm×100cm;洗脱液:HAcNaAc缓冲液(0.05mol/L,pH5.8,含0.05mol/LNaCl);流速:16mL/h,4管/h;阴影部分为L氨基酸氧化酶活性组分. ...
2021/8/12 9:30:16
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1.1材料限制性核酸内切酶,T4DNAligase购自NewEnglandBiolab公司.厌氧发生剂、脑心浸液(干粉)购自生物梅里埃公司(bioMerieux).其他试剂为国产分析纯.艰难梭菌(clostridiumdifficile,C.dVPI10463)从兰州生物制品研究所购买.大肠杆菌菌株BL21(DE3)及质粒PET22b(+)系南方医科大学消化研究所存.
,1.2.3目的基因表达阳性克隆菌落接种到2mL选择性LB培养液37℃,180r摇菌致A600nm为0.6,4℃过夜,然后2%转接LB培养液中,培养3h至A600nm值为0.8,加IPTG至终浓度为1mmol/L,诱导后取样.产物进行SDSPAGE分析.
,2.1PCR扩增的目的基因电泳分析发现在1800bp左右有一条带,大小与预计相符(图1). ...
2021/8/15 1:33:16
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[文献标识码]B[文章编号]1673—7210(2007)10(b)—096—02DetectionofthefunctionsofthebloodcoagulationandanticoagulationinpatientswithlivercirrhosisWULong—qi1,MAXiao—bo2,SHAOCui—qing1(1.ShandongTrafficHospital,Jinan250031,China,血浆凝血指标测定结果(表1)由表1可以看出,肝硬化患者肝功能A级与对照组比较,PT、TT、APTT均明显延长,且随着肝功能从A→B→C逐渐降低,这种变化趋势更加显著,未安装PDF浏览器用户请先下载安装原版全文两两比较,A组vs对照组,B组vsA组,C组vsB组 ...
2022/1/14 3:26:00
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南,孙春莉,闵凌峰,unsteadyDNArepeatlocatedinthementallyretardantFMR1geneoffragileX,FMR1CGGrepeatsPCR ...
2021/8/12 15:11:46
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南,孙春莉,闵凌峰,unsteadyDNArepeatlocatedinthementallyretardantFMR1geneoffragileX,FMR1CGGrepeatsPCR ...
2021/8/12 15:11:46
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随着LPA剂量的增加,MMP9表达及活性,核蛋白NFκBp65表达逐渐增强,在LPA1μmol/L时达到最高点,然后逐渐减弱,LPA以剂量依赖的方式激活NFκB,在转录水平促进THP1细胞MMP9mRNA表达,增强MMP9活性,LPA上调THP1细胞MMP9mRNA表达,0、0.1、0.5、1、5、10μmol/L刺激THP1细胞4h后,THP1MMP9mRNA分别为0.057±0.004,0.085±0.005,0.106±0.007,0.140±0.005,0.118±0.003,0.105±0.005,各组间差异有统计学意义(P<0.05) ...
2021/8/15 13:39:06
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随着LPA剂量的增加,MMP9表达及活性,核蛋白NFκBp65表达逐渐增强,在LPA1μmol/L时达到最高点,然后逐渐减弱,LPA以剂量依赖的方式激活NFκB,在转录水平促进THP1细胞MMP9mRNA表达,增强MMP9活性,LPA上调THP1细胞MMP9mRNA表达,0、0.1、0.5、1、5、10μmol/L刺激THP1细胞4h后,THP1MMP9mRNA分别为0.057±0.004,0.085±0.005,0.106±0.007,0.140±0.005,0.118±0.003,0.105±0.005,各组间差异有统计学意义(P<0.05) ...
2021/8/15 13:39:06
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制备包裹pcDNA3.1NR2B重组质粒的免疫脂质体,重组质粒pcDNA3.1NR2B的扩增制备用质粒小量提取试剂盒提取质粒DNA,经BamHI酶切鉴定,将相同质量的质粒,经反复冻融的脂质体,通过100nm薄膜挤出器的脂质体以及经核酸酶消化的脂质体同时置于5g/L琼脂糖凝胶中电泳,紫外灯下观察 ...
2021/8/7 20:45:46
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制备包裹pcDNA3.1NR2B重组质粒的免疫脂质体,重组质粒pcDNA3.1NR2B的扩增制备用质粒小量提取试剂盒提取质粒DNA,经BamHI酶切鉴定,将相同质量的质粒,经反复冻融的脂质体,通过100nm薄膜挤出器的脂质体以及经核酸酶消化的脂质体同时置于5g/L琼脂糖凝胶中电泳,紫外灯下观察 ...
2021/8/7 20:45:46
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BGC823细胞在37℃,5%CO2培养箱中培养,培养液为含10%小牛血清、100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素的RPMI—1640(美国GIBCOBRL),待细胞至指数生长期,收集细胞,调整细胞浓度为1×104/ml,按每孔0.1ml接种到96孔培养板中,24h后,分别加入不同浓度的槲皮素,设3个复孔,培养48h,每孔加入MTT100μl,作用4h后,加入DMSO100μl,孵育30min,在酶标仪570nm处测吸光度A值,计算抑制率,RNA,取总RNA1μg,以OligodT(15mer)为引物逆转录合成cDNA第1链,以此cDNA链2μl为模板进行PCR扩增,步骤参照说明书 ...
2021/8/22 21:22:25